三七中三七素的分离纯化与结构分析

以三七(Panaxnotoginseng)为材料,经醇提、水提,得到三七素粗提物,用乙醇沉淀、正丁醇萃取去除皂苷类成分,经阳离子交换树脂柱层析,得到三七素.三七素经初步纯化含量从4.43%提高到13.98%.经过离子交换树脂柱分离后含量提高到96.46%.通过重结晶得到的无色板状晶体三七素的结构经过红外光谱,核磁共振光谱及质谱加以鉴定。     

土生曲霉转化三七中药材的研究

从土壤真菌中筛选出直接转化中药材三七化学成分的菌株YM31966,经鉴定该菌株为土生曲霉(Aspergillus terreus).以固态转化方式,结合化学提取分离方法,通过高效液相色谱、核磁共振及质谱等波谱检测,该菌株转化三七产物由三七皂苷nR2 、RX1和人参皂苷Rg1、Rd、Rh1、Rh4构成主体成分,而原三七成分Rb1、Rc、Re和R1、R3,R6等物质被分解.结果表明,土生曲霉是一株能转化中药材三七的微生物,它具有改变原三七化学成分,形成新化合物,以及提高某些原化合物成分含量的作用.     

UPLC/Q-TOFMS对三七中皂苷类成分的快速化学表征

本文主要运用超高效液相串联四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC/Q-TOF MS)对三七中皂苷类成分进行快速分离和鉴定。以超高效液相为分离手段,飞行时间质谱仪为鉴定方法,水饱和正丁醇为提取溶剂,以0.05%甲酸水(A)-0.05%甲酸乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,采用ESI负离子模式进行数据采集。根据实验结果,并结合相关参考文献,二级质谱裂解数据以及元素组成,分离、鉴定出17种皂苷类成分,并发现三七中含有姜糖酯B成分。实验结果表明经过超高效液相的分离,以及Q-TOF MS的二级负离子信息的鉴定,为分析三七中皂苷类成分提供了一种快速、简便、可靠的方法。     

UPLC/Q-TOFMS对三七中皂苷类成分的快速化学表征北大核心CSCD

本文主要运用超高效液相串联四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC/Q-TOF MS)对三七中皂苷类成分进行快速分离和鉴定。以超高效液相为分离手段,飞行时间质谱仪为鉴定方法,水饱和正丁醇为提取溶剂,以0.05%甲酸水(A)-0.05%甲酸乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,采用ESI负离子模式进行数据采集。根据实验结果,并结合相关参考文献,二级质谱裂解数据以及元素组成,分离、鉴定出17种皂苷类成分,并发现三七中含有姜糖酯B成分。实验结果表明经过超高效液相的分离,以及Q-TOF MS的二级负离子信息的鉴定,为分析三七中皂苷类成分提供了一种快速、简便、可靠的方法。     

密闭微波辅助间歇提取RP-HPLC测定三七中三种皂苷类化合物

本文建立了采用微波辅助间歇提取三七样品中的皂苷类化合物,并以反相高效液相色谱（RP—HPLC）测定其中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1含量的实验方法。分别通过单因素实验和正交实验设计,优化了萃取溶剂浓度、溶剂用量、微波功率和微波辐射时间等提取条件。与传统的索氏提取法、冷浸法和超声波提取法比较,微波辅助萃取法具有快速、提取率高、溶剂消耗少等优点,间歇萃取较连续萃取更是大大节省了微波能耗。     

蔓三七茎多糖理化性质及抗氧化和免疫调节研究

为提取蔓三七茎中的多糖及研究它的理化性质并评价其抗氧化、免疫调节活性,以蔓三七茎为原料,采用水提醇沉法获得蔓三七茎粗多糖(GPSCP),先测定了粗多糖的含量、糖醛酸含量、硫酸根含量、蛋白质含量。再采用Sevage试剂和透析法对蔓三七茎粗多糖进行纯化,得到蔓三七茎多糖(GPSP)。采用气相色谱法测定GPSP中单糖组分和红外光谱测定多糖的结构,通过总抗氧化能力、DPPH自由基、OH自由基的清除能力评价GPSP的体外抗氧化能力;通过体外实验评估GPSP对RAW264.7巨噬细胞免疫调节活性。结果表明,所得GPSCP的得率为15.56%,总糖含量为52.32%;GPSP的得率为8.67%,含量为78.54±2.13%;GPSP中单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,摩尔比为1.69∶4.64∶9.17∶1.00∶1.92∶4.85。体外抗氧化实验结果表明,GPSP具有良好的抗氧化能力,对总抗氧化能力、DPPH和OH自由基清除效果明显。GPSP可显著提高RAW264.7细胞内一氧化氮(NO)的浓度,在给药浓度为50.0μg/mL时,NO的分泌量达到最大,为39.28±3.25μmol/L,GPSP可以提高免疫力,在功能食品的开发中,可以作为一个潜在的免疫调节剂。     

HPLC法测定银杏叶征剂中决黄酮甙的含量

银杏 (ＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａＬｉｎｎ .)叶提取物 (ＧＢＥ)是银杏叶经提取、分离而得的干浸膏 ,是银杏叶制剂的主要原料。药理及临床表明 ,它能增加冠状动脉血流量 ,可用于动脉硬化及高血压所致的冠状动脉供血不全、心绞痛、心肌梗塞、脑血栓、脑血管痉挛等症[1] 。其活性成分主要是黄酮类和萜内酯[2 ] 。银杏叶黄酮类成分的测定方法 ,有紫外分光光度法和高效液相色谱法 ,因前者专属性较差 ,现多数厂家均采用后者。高效液相色谱法测定总黄酮甙的含量时 ,在对照品的使用上 ,既有单用槲皮素 (ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ)为对照品的测定方法[3 ] ,…     

三七地下部分皂甙成分的HPLC比较研究

应用HPLC定量分析方法,对三七(Panax notoginseng)地下部位的皂甙成分进行分析,通过比较人参皂甙Rg1,Rb1,Re,Rd和三七皂甙R1等5种主要皂甙成分和总皂甙的含量变化,探讨不同部位和组织中皂甙成分的分布规律。结果表明在三七药材的不同商品等级中,人参皂甙Rg1和Rb1的含量以主根60头为最高,5个主要皂甙的总含量也明显高于其他的等级;根茎的生物产量只为全根的18%,皂甙含量占25%以上;主根和根茎中韧皮部的生物产量和总皂甙的含量均高于木质部;二年生三七的生物产量及皂甙含量均较三年生三七低得多。不同表型三七的皂甙组成也有区别。     

文山三七

三七自古就是名贵的中药材,如《本草纲目》记载：“此药近时始出,南人军中用为金疮要药,云有奇功。又云：凡杖扑伤损,瘀血淋漓者,随即嚼烂,罨之即止,青肿者即消散。……故能治一切血病……”在我国古代,三七的主要用途为跌打损伤的外用圣药。现代研究发现,三七对心脑系统疾病有广泛的治疗作用。目前,已从三七中分离得到ＺＩ种单体皂甙及黄酮类物质（００３８％）、三七素（０．９０％）、活性多糖（０．２８％）等主要药用有效成分。三七中尚含有１７种以上氨基酸（总氨基酸平均含量为７．７３％）,７３种挥发油成分（０．４０％…     

反相高效液相色谱法测定烟叶中的游离氨基酸

用不同浓度的乙醇溶液提取烟样中的游离氨基酸 ,结果显示 ,存在最佳的乙醇溶液浓度 ,使烟样中被提取的游离氨基酸总量最大 ;对比了活性炭、乙醚、5 %磺基水杨酸、阳离子交换柱的纯化效果 ,发现阳离子交换柱的纯化效果较其它三种试剂要好。在提取和纯化之后 ,采用OPA、FMOC联合在线衍生反相高效液相色谱法测定了烟样中的游离氨基酸 ,该方法使烟样中的氨基酸和亚氨基酸能被同时测定 ,并且分析方法的重现性和回收率均令人满意。最后用该方法对云南B2 F98(上部、橘黄、二等烟叶 ,98年产 )烟叶中的游离氨基酸进行了测定 ,有 15种氨基酸被测出 ,其中Pro含量最高 ,约占总量的 2 5 % ,Thr含量最低 ,约占总量的 1%。     

三七叶、人参叶和西洋参叶皂苷类成分的研究(英文)

三七叶、人参叶和西洋参叶其皂苷类成分相近,但专属性成分各异,皂苷类成分的分布比例也各不相同。本文建立了HPLC-UV法测定上述皂苷成分的方法,经过方法学考察,各种皂苷成分精密度好、加样回收率高,方法可靠。11种皂苷成分总含量顺序为:西洋参叶>人参叶>三七叶;二醇组皂苷成分含量:西洋参叶>三七叶>人参叶;三醇组皂苷成分含量:人参叶>西洋参叶>三七叶。西洋参叶中二醇组皂苷和人参叶中三醇组皂苷含量明显高于其他。西洋参叶中人参皂苷Rb3和Rd的含量之和占11种皂苷成分的60%以上。鉴于其中人参皂苷的高含量,三七叶、人参叶和西洋参叶应该作为皂苷来源得到充分利用;不同的皂苷成分有不同的药理活性,应基于它们的皂苷组成和比例选择性进行研究和开发。     

几种中药DNA提取方法的比较研究

以丹参、绞股蓝、三七为材料,分别采取CTAB法和SDS法提取基因组DNA,并通过紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳对所提取的DNA样品进行检测,将它们在DNA产量、质量等方面的优缺点进行总结。结果表明,CTAB法能从丹参、绞股蓝中提取高质量的DNA,而三七的DNA更适合用SDS法提取。     

基于UPLC法测定离体大鼠及人源肠道菌对三七中人参皂苷代谢的差异

为探究人与大鼠肠道菌群对三七水煎液中三醇型人参皂苷Rg1、Re及二醇型人参皂苷Rb1、Rd体外代谢的差异性及发现其代谢产物原人参二醇PPD与原人参三醇PPT,实验利用UPLC方法测定三七水煎液分别与人、大鼠肠道菌群在厌氧条件下共培养24h后的孵育液中4种皂苷的含量及代谢产物PPD与PPT的含量。结果表明三七中含有三醇型人参皂苷Rg19.4500mg/g、Re1.8872mg/g,二醇型人参皂苷Rb18.5816mg/g、Rd1.9456mg/g。与人源肠道菌共培养后,三七中含有的二醇型、三醇型人参皂苷含量显著降低,重要的是,在培养液中检测到代谢产物PPD和PPT的存在,含量分别为0.2136mg/g及0.0344mg/g,与大鼠肠道菌共培养后,三七中含有的二醇型皂苷含量有轻微降低,而三醇型皂苷含量未见明显变化,但有少量PPT(0.0184mg/g)的生成。由此可见:在体外条件下,三七水煎液中人参皂苷会被人肠道菌群降解生成代谢产物PPD和PPT,而大鼠肠道菌群的降解产物却仅有PPT生成,二者存在种属差异。     

三七生物资源研究与利用进展

三七为五加科人参属植物,因其在抗血栓、抗高血压、保肝、活血化瘀等方面具有显著疗效而闻名中外,是我国独具特色的生物资源,具有十分广阔的产业化前景。本文从三七的植物化学与药理学、基因组学研究和遗传改良等方面综述了目前的研究现状,分析了三七生物资源利用过程中存在的问题,浅谈了未来的研究与利用展望。     

Isolation of a novel thermolabile heterodimeric ribonuclease with antifungal and antiproliferative activities from roots of the sanchi ginseng Panax notoginseng.

An isolation procedure, consisting of ion exchange chromatography on CM-Sepharose, affinity chromatography on Affi-gel blue gel, and fast protein liquid chromatography on Mono S, was utilized to purify a base-nonspecific, heterodimeric ribonuclease (RNase) with diverse activities from roots of the sanchi ginseng Panax notoginseng. The RNase is unique in that it consists of two different nonglycoprotein subunits with a molecular weight of 27 and 29 kDa, respectively. The latter subunit is characterized by an N-terminal sequence showing remarkable similarity to that of the bitter gourd RNase. The Panax notoginseng RNase demonstrates potent RNase and translation-inhibitory activities. In addition, it exhibits antiproliferative activity toward leukemia L1210 cells and antifungal activity against Physalospora piricola and Coprinus comatus. Its RNase activity is not heat-resistant, unlike most RNases which are thermostable.     

Identification and differentiation of Panax species using ELISA, RAPD and eastern blotting

Immunochemical and genetic methods have been developed in order to distinguish Panax spp. With the aim of establishing immunochemical methods, two hybridomas (3H4 and 5H8), each secreting a monoclonal antibody (MAb) against proteins of Panax ginseng, were prepared by fusing splenocytes immunized with two kinds of ginseng water-soluble fractions and a hypoxanthine-thymidine-aminopterin-sensitive mouse myeloma cell line, P3-X63-Ag8-U1. MAb 3H4 cross-reacted with four Panax spp., whereas the MAb 5H8 cross-reacted with P. ginseng in the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). ELISA and western blotting methods using a ginseng water-soluble fraction as the solid-phase antigen were developed for the unambiguous authentication of P. ginseng. A combination of random amplified polymorphic DNA (RAPD) and eastern blotting analyses using anti-ginsenoside Rb1 and Rgl monoclonal antibodies was used for the identification of P. notoginseng, P. quinquefolius and P. japonicus. RAPD can be used to differentiate the species of Panax from each other. An important parameter used for differentiating P. notoginseng is the absence of ginsenoside Rc in the extract of P. notoginseng with eastern blotting. The combination of these methods enabled a reliable identification of Panax spp.     

云南文山健康三七种植年限对根际微生物群落的影响

【背景】三七的连作障碍与微生物区系失衡有一定关联,了解种植年限对三七微生物区系的影响,判断根际微生物区系是否失衡,对三七连作障碍的防治具有重要意义。【目的】探究文山不同种植年限健康三七根际土壤细菌和真菌群落结构、多样性差异,以及与种植年限之间的关联,为后续缓解三七连作障碍提供理论依据。【方法】采集一年生、二年生和三年生健康三七根际土壤,采用16S rRNA基因和ITS序列进行高通量测序。对测序结果进行分析,比较一年生、二年生和三年生健康三七根际土壤细菌和真菌的多样性和群落分布规律及与种植年限的关联。【结果】一年生健康三七根际细菌和真菌群落的α指数均显著高于二年生和三年生。通过β多样性分析发现,一年生健康三七根际土壤中真菌群落结构与其他年限的真菌群落结构有较大差异。相关性分析结果表明,真菌的均匀度和香农指数与种植年限呈现显著的负相关性,其余指数不显著相关。三七根际丰富度前三的门和属,除Acidobacteria和Aquicella丰富度随着三七种植年限的增加而显著增加外,其余群落丰度都与种植年限呈负相关。细菌中Bacteroidetes、Proteobacteria和真菌中Ascomycota、Basidiomycota、Chytridiomycota的丰富度随着种植年限增加而降低。在属水平上,细菌中Opitutus和真菌中Mortierella、Clitopilus、Pholiota的丰富度随着三七种植年限的增加而降低。在二年生三七根际土壤中病原真菌Alternaria、Cylindrocarpon、Fusarium和Pestalotiopsis的丰富度低于一年生和三年生,而有益真菌Mucor和Bacillus的丰富度却呈相反趋势。同时,有益细菌Flavobacterium和有益真菌Myxocephala、Aspergillus的丰富度随着种植年限的增加呈下降趋势。【结论】三七种植年限的增加,会引起三七根际微生物区系失衡,增加根际病原真菌属的丰度,同时降低一些有益真菌属的丰度。     

Application of atmospheric pressure chemical ionisation mass spectrometry in the identification and differentiation of Panax species

An HPLC-MS method using an atmospheric pressure chemical ionisation (APCI) source has been developed to assist in the differentiation of three ginseng species: Panax quinquefolium (American ginseng), P. ginseng (Chinese ginseng) and P. notoginseng (sanqi) species. The differentiation method relies on the identification of ginsenosides Rf and F11 and notoginsenoside R1. R1 is observed in both P. notoginseng and Chinese ginseng, whilst F1, is found exclusively in the American species. The presence of these compounds permits the definitive identification of the species to be made. The APCI ionisation source has been employed to tackle the matrix interference in analysing Chinese medicinal materials and to minimise the associated matrix effects that are commonly encountered with other ionisation modes. Moreover, the method allows direct interface to conventional HPLC systems. More importantly, chemical reference standards of ginsenosides are not required in this method. This technique provides an alternative approach to analysing high molecular weight polar compounds that typically encountered in complex matrices of Chinese medicinal materials.