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手性拆分环氧氯丙烷菌株的筛选、鉴定及产酶条件研究 总被引:2,自引:0,他引:2
从土壤中筛选到5株环氧化物水解酶生产菌,并通过ITS序列鉴定了其中的C375菌,结果为黑曲霉(Aspergillus nigerZJB-09103)。考察了培养基不同碳源、氮源、金属离子和pH等对产酶的影响,得到了较佳的培养基条件:淀粉16g/L,豆饼粉3g/L,蛋白胨3g/L,KH2PO4 0.4g/L,K2HPO4 0.8g/L,MgSO4 0.2g/L,ZnSO4 0.03g/L,pH6.5。采用优化后的培养基条件,酶活力达到156.1U/L,比优化前初始发酵培养条件下的酶活提高了252%,当环氧化物水解酶催化时间为10h时,(s)-环氧氯丙烷的对映体过量值(e.e.)可达99.0%。产率为18.6%。 相似文献
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白腐菌产锰过氧化物酶培养基的优化 总被引:12,自引:0,他引:12
黄孢原毛平革菌(Phanerochaete Chrysosporium)5.776在初始发酵培养基中产胞外锰过氧化物酶活力极低。为了显著提高锰过氧化物酶活力,对初始发酵培养基进行优化。通过调整培养基中碳源、氮源种类和含量,吐温80添加量,Mn^2 终浓度,静置培养温度、时间,采用分光光度计法测定酶活力,发现黄孢原毛平革菌在限氮高锰培养基中产生较高的锰过氧化物酶。静置液体培养的优化条件是:葡萄糖10g/L;酒石酸铵2mmol/L;吐温80 lg/L;Mn^2 9.9μg/L;于34℃静置培养5d;产MnP活力达1200U/L,比优化前提高了近17倍。 相似文献
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采用响应面分析方法,对阿萨希丝孢酵母(Trichosporon asahii)ZZB-1产酰胺酶的发酵培养基进行了优化。运用单N子试验筛选出麦芽糖和酵母浸膏为最适碳源、氮源,金属离子Ca^2+、Mn^2+可提高发酵酰胺酶产量;通过最陡爬坡实验逼近以上4个因子的最大响应区域后,采用Box—Behnken响应面分析法,确定产酰胺酶最佳发酵培养基为麦芽糖18.84g/L、酵母浸膏9.55g/L、NaC15g/L、KH2PO41g/L、MgSO4·7H2O0.2g/L、FeS040.001g/L、CaC0370.84μmol/L、MnS0465.39肚mo[/L(1%丙烯酸诱导),NH4·H2O调节pH至7.0。培养基优化后酰胺酶产量由初始2554U/L提高到4156U/L,为原始发酵培养基配方酶活产量的1.63倍。 相似文献
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黑曲霉固态发酵生产单宁酶的条件优化 总被引:1,自引:0,他引:1
研究采用响应面法优化黑曲霉固态发酵生产单宁酶的培养条件。应用Plackett—Burman试验筛选出重要影响因子:五倍子粉含量、(NH4)2SO4浓度以及接种孢子量,最陡爬坡试验逼近最大响应区域。应用Box.Behnken响应面试验对重要影响因子进一步优化。得到最佳培养条件:每250mL三角瓶中装入1.0g五倍子粉、4.4g稻壳和0.5g麸皮、液固比(mL/g)2:1且营养盐溶液组成为(NH4)2s0421g/L、MgSO4·7H2O1g/L、NaCl1g/L,培养基pH自然,接种5.7×10^7个孢子后在30℃温度下培养4d。在此条件下,单宁酶产量从40U/g提高到114U/g,3次重复验证性试验平均值为115U/g,验证了模型的可靠性。 相似文献
6.
以蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus WQ9—2为产耐有机溶剂蛋白酶的出发菌株,对其产酶条件进行优化并初步研究了其酶学性质。在单因素实验基础上,通过中心复合实验确定了产酶的最佳发酵条件为酵母粉8g/L,葡萄糖17g/L,KH2P040.5g/L,无水MgS040.3g/L,CaCl20.5g/L,NaCl1.0g/L;pH7.5。实验中发现采用低温发酵能大大缩短菌体产酶周期;通过优化发酵时间由最初84h缩短到48h,最高比酶活为3921U/mL。金属离子螯合剂1,10菲罗啉(1,10-phenanthroline)、乙二胺四乙酸(EDTA)对该酶有较强的抑制作用,表明该酶可能为金属蛋白酶;Ca2+对该酶的活力及热稳定性有显著提高作用。 相似文献
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利用重组大肠杆菌生产α-环糊精葡萄糖基转移酶 总被引:2,自引:0,他引:2
将来源于软化类芽孢杆菌(Paenibacillus macerans)的α-环糊精葡萄糖基转移酶(α-CGT)基因插入含pelB信号肽的质粒pET-20b(+)中,构建了表达载体pET-20b(+)/cgt,并将其转化表达宿主E.coli BL21(DE3)。对重组菌E.coli BL21/pET-cgt进行摇瓶发酵条件的优化,确定了其胞外表达α-CGT酶的最适条件:葡萄糖8g/L,乳糖0.5g/L,蛋白胨12g/L,酵母膏24g/L,K2HPO472mmol/L,KH2PO417mmol/L,CaCl2 2.5mmol/L;初始pH为7.0,诱导温度为25℃。在该条件下培养90h后最终α-CGT酶的胞外比活达到22.1u/mL,与来源菌Pmacerans所产天然酶比活相比提高了42倍,实现了α-CGT酶的高效生产。将基因工程菌在上述条件下于3L发酵罐中发酵,90h后胞外酶比活达到22.6U/mL,证实了工业化放大的可能性。 相似文献
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采用响应面分析法(RSM)对R-酰胺酶产生菌Brevibacterium epidermidis ZJB-07021的发酵培养基进行了优化.首先运用了单因子试验筛选出了发酵培养的最佳pH与温度,在此基础上采用Plackett-Burman(PB)设计法,对 8 种影响产酶的因素进行评价,实验结果表明,葡萄糖、酵母粉与乙酰胺含量对菌株产酰胺酶的活力具有显著的影响.通过旋转中心组合实验考察了葡萄糖、酵母粉和乙酰胺这三个主要因素对菌株所产酰胺酶活力的影响.发酵培养基优化结果为葡萄糖 17.00 g/L,酵母粉 15.74 g/L,乙酰胺 7.05 g/L,采用优化后的发酵培养条件进行摇瓶发酵培养,酰胺酶的酶活达到 72.14 U/L,比优化前的初始发酵培养条件下的酶活提高了73.3%. 相似文献
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pH控制下绿色木霉(Trichoderma viride)流加发酵生产纤维素酶 总被引:1,自引:0,他引:1
绿色木霉(Trichodermaviride)在pH控制发酵条件下,采用流加葡萄糖发酵策略,可显著提高综合滤纸酶活力(FPA)和内切酶(endo—β—1,4-glucanase,EG)、外切酶exo—β-1,4-glucanase,CBH)、纤维二糖酶(cellobiase,CB)酶活。在5L发酵罐中采用pH控制和流加葡萄糖工艺,可提高CB酶含量,改变酶组分之间的比例,使得FPA、EG、CB和CBH酶活分别达到50.0U/mL,210.0U/mL,4.0U/mL和2.5U/mL,比摇瓶发酵分别提高了6.7.4.2、19、2.5倍。 相似文献