青杄愈伤组织在继代培养中的分化能力及染色体稳定性研究

青杄（Ｐｉｃｅａ ｗ ｉｌｓｏｎｉｉＭａｓｔ．）胚性愈伤组织在改良５９ 附加２, ４－Ｄ及Ｋｔ各１ ｐｐｍ 的培养基上继代３ 年（每月继代１ 次）,仍具有旺盛的增殖能力。在胚性愈伤组织转入１／２改良５９ 并附加ＡＢＡ １ ｐｐｍ 的分化培养基上,约３ 个月左右可分化出大量体细胞胚。体细胞胚分化率达９０％ 以上。经继代３ 年的胚性愈伤组织细胞的染色体倍性十分稳定,其染色体数及核型为２ｎ＝ ２４＝ １６ｍ （６ｓｃ）＋ ８ｓｍ ＋ ２Ｂ。这一结果与由实生苗根尖压片所得结果基本一致     

白Qian胚性愈伤组织长期继代培养中的分化能力及染色体稳定性 …

白Ｑｉａｎ（Ｐｉｃｅａ ｍｅｙｅｒｉ Ｒｅｈｄ．ｅｔ．Ｗｉｌｓ．）的胚性愈伤组织ＭＳ＋２,４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ１ｍｇ／Ｌ的培养基上继代３年,增殖能力和分化潜力仍保持在原来的水平,没有明显降低的趋势。但随着继代时间的增长,胚性愈伤组织内有细胞的染色体数目发生了无规律的变化,而再生植株根尖细胞染色体数目比较稳定（２ｎ＝２８）。     

青扦胚性细胞悬浮培养中影响体细胞胚发生因素的研究

试验以青扦（Ｐｉｃｅａｗｉｌｓｏｎｉ）的胚性愈伤组织为材料,以改良５９基本成分附加２４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ及ＫＴ１ｍｇ／Ｌ为培养介质,比较了液体悬浮与半固体二种培养方式对胚性愈伤组织增殖和体细胞发生的影响,研究了液体悬浮培养过程中影响体细胞胚发生的因素。结果表明：液体悬浮培养好于半固体培养,它的胚性愈伤组织的生长率为２６８％,是半固体培养的１２４倍;体细胞胚的分化率为９３％,是半固体培养的２２倍;悬浮培养较佳的培养条件为：初始细胞密度为２％（鲜重）,蔗糖浓度为２０ｇ／Ｌ,摇床转速为１００ｒ／ｍｉｎ,ｐＨ为５８。经过两个月悬浮培养,将培养物转至１／２改良５９附加ＡＢＡ１ｍｇ／Ｌ的分化培养基上,３个月后每ｇ培养物上可获得２８５个正常的子叶期体细胞胚。     

一品红离体培养诱导体细胞胚的研究（简报）

一品红的嫩茎离体培养在附加不同浓度的２,４－Ｄ和６－ＢＡ的ＭＳ培养基上,２．４Ｄ浓度为１．０～２．０ ｍｇ· Ｌ~（－１）的愈伤组织生长量最大。这些愈伤组织转移到ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ ｍｇ·Ｌ~（－１）＋ＮＡＡ０．１ ｍｇ·Ｌ~（－１）的分化培养基上后,产生了胚性愈伤组织,观察到大量不同时期体细胞胚。带有体细胞胚的愈伤组织进一步转移到无激素 ＭＳ培养基上,便发育成小植株。     

白皮松和油松雌配子体愈伤组织的诱导和分化

以白皮松（Ｐｉｎｕｓ ｂｕｎｇｅａｎａ Ｚｕｃｃ．）和油松（Ｐ．ｔａｂｕｌａｅｆｏｒｍ ｉｓ Ｃａｒｒ．）的未成熟胚乳,即雌配子体为外植体进行培养,将雌配子体分别接种在添加不同激素种类和不同浓度配比的改良ＭＳ培养基上诱导愈伤组织。经过２０多天的培养,在含有１—６ ｍ ｇ／Ｌ 萘氧乙酸（ＮＯＡ）和０．５ｍ ｇ／Ｌ６－ＢＡＰ及３％ 蔗糖浓度的培养基上诱导产生了愈伤组织,愈伤组织的诱导频率最高为２５％ 。经细胞学观察证明：愈伤组织细胞确为单倍性的,染色体数目为ｎ＝ １２,正常的体细胞染色体数目为２ｎ＝ ２４,并在含有ＡＢＡ 的原诱导愈伤组织培养基上分化出绿色小芽     

黄槐叶片培养过程中器官发生的研究

以黄槐（ＣａｓｓｉａｓｕｒａｔｔｅｎｓｉｓＢｕｒｍ．ｆ．）幼嫩叶片为材料,接种于ＭＳ＋ＮＡＡ１ｐｐｍ＋２,４－Ｄ１ｐｐｍ＋６－ＢＡ２ｐｐｍ的培养基上,诱导形成两种形态的愈伤组织,即致密愈伤组织与雪花状愈伤组织．将愈伤组织转移到ＭＳ＋ＮＡＡ：１ｐｐｍ＋６－ＢＡ２ｐｐｍ的分化培养基上．仅致密型愈伤组织经过球状体至不定芽途径形成大量再生植株。扫描电镜及组织细胞学观察表明,致密愈伤组织表层细胞排列紧密,有许多分生细胞团,而雪花状愈伤组织表层细胞薄壁化,分裂能力很低。球状体起源于致密愈伤组织表层的分生细胞团,其细胞有极强的分生能力,顶端可以分化发育成不定芽原基,最后形成不定芽并发育成小植株。球状体可以看成是具有形成不定芽能力的繁殖单位．     

红江橙体胚发生及影响因素的研究

红江橙花后４周的幼果,直径约１ｃｍ左右,这时期的胚珠最适于胚性愈伤组织的诱导。以ＭＴ为基本培养基,加上适当浓度的ＩＡＡ、ＢＡ和ＭＥ可显著提高胚性愈伤组织诱导率。体胚发生,以ＭＴ＋ＩＡＡ０．１ｍｇ１－１＋ＢＡ（ＺＴ）１ｍｇ１－１培养基较好,能诱导产生正常体胚,且频率较高。胚性愈伤组织继代次数对体胚发生也有一定的影响,继代６次以内,胚性愈伤组织具有旺盛产生体胚能力;继代至第９次时,产生体胚的能力明显下降;至第１２代时,不能产生胚状体。成熟胚转换成小植株,以ＭＴ＋ＧＡ２ｍｇ１－１＋ＮＡＡ０．１ｍｇ１－１培养基成苗率最高。     

玉米胚性愈伤组织的长期继代及其染色体分析

对５种基因型幼胚诱导的愈伤组织继代培养表明,玉米胚性愈伤组织的长期继代受基因型,培养基成分,激素,培养条件的影响。适时继代,逐代筛选对胚性保持起重要作用。适当降低培养温度（１２±２℃）有利于愈伤组织的保存和胚性保持,可以减少愈伤组织长期继代所需的物质和工作量。长期继代培养的胚性愈伤组织,胚状体发生能力和植株再生率无显著变化,但正常苗的再生频率显著下降。观察愈伤组织细胞染色体发现：（１）基因型对不同倍性细胞的比例有明显影响。（２）随着继代时间的延长,二倍体细胞下降,四倍体和非二倍体细胞增多。（３）愈伤组织中出现多种染色体结构变异,这些结构变异有可能导致非整倍体细胞的形成。     

红江橙胚发生及影响因素的研究

红江橙花后４周的幼果,直径约１ｃｍ左右,这时期的胚珠最适于胚性愈伤组织的诱导。以ＭＴ为基本培养基,加上适当浓度的ＩＡＡ、ＢＡ和ＭＦ可显著提高胚性愈伤组织诱导率。体胚发生,以ＭＴ＋ＩＡＡ０．１ｍｇ１＾－１＋ＢＡ（ＺＴ）１ｍｇ１＾－１培养基较好,涌诱导产生正常体胚,且频率较高。胚性愈伤组织继代次数对体胚发生也有一定的影响,继代６次以内,胚性愈伤组织具有旺盛产生体胚能力;继代至第９次时,产生体胚的能力明     

3种北美冷杉的核型研究

本文首次报道３种北美冷杉Ａｂｉｅｓ ａｍａｂｉｌｉｓ、Ａ．ｇｒａｎｄｉｓ和Ａ．ｌａｓｉｏｃａｒｐａ的根尖体细胞核型、染色体参数及核型模式图。核型公式分别是Ｋ（２ｎ）＝２４＝１６ｍ（４ＳＣ）＋８ｓｍ、１４ｍ（２ＳＣ）＋１０ｓｍ和１８ｍ（４ＳＣ）＋６ｓｍ,染色体相对长度组成为２ｎ＝２４＝２Ｌ＋１２Ｍ２＋６Ｍ１＋４Ｓ、２Ｌ＋１２Ｍ２＋８Ｍ１＋２Ｓ和２Ｌ＋８Ｍ２＋１２Ｍ１＋２Ｓ。均为２Ａ核型类型。文中还讨     

山东10种植物的核型分析

对山东１０ 种植物进行了核型分析。茴茴蒜（ Ｒａｎｕｎｃｕｌｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｂｇｅ－） 染色体数目２ｎ ＝１６ , 核型公式Ｋ（２ｎ） ＝ ２ｘ ＝ １６ ＝ ２ Ｍ ＋ ２ｍ ＋ ２ｓｍ ＋ １０ｓｔ, “３Ａ”类型; 五脉地椒（ Ｔｈｙｍｕｓｑｕｉｎｑｕｅｃｏｓｔａｔｕｓ Ｃｅｌａｋ－） 染色体数目２ｎ＝ ２６ , 核型公式Ｋ （２ｎ） ＝ ２ｘ＝ ２６ ＝ ８ Ｍ ＋ １８ｍ , “１Ａ”类型; 蛇床（ Ｃｎｉｄｉｕｍ ｍｏｎｎｉｅｒｉ（Ｌ－） Ｃｕｓｓ－） 染色体数目２ｎ＝ ２０ , 核型公式Ｋ （２ｎ） ＝ ２ｘ＝ ２０ ＝ ２Ｍ＋ １６ｍ ＋ ２ｓｍ , “２Ｂ”类型; 波斯菊（ Ｃｏｓｍｏｓ ｂｉｐｉｎｎａｔｕｓ Ｃａｖ－） 染色体数目２ｎ ＝ ２４ , 核型公式Ｋ（２ｎ） ＝ ２ｘ ＝ ２４ ＝ １６ｍ ＋ ２ｍ （ｓａｔ） ＋ ６ｓｍ , “２Ａ”类型; 白车轴草（ Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ ｒｅｐｅｎｓ Ｌ－） 染色体数目２ｎ＝ ３２ , 核型公式Ｋ （２ｎ） ＝ ４ｘ ＝ ３２ ＝ ３２ｍ , “１Ａ”类型; 铁苋菜（ Ａｃａｌｙｐｈａ ａｕｓｔｒａｌｉｓ Ｌ－）染色体数目２ｎ ＝ ３２ , 核型公式Ｋ （２ｎ） ＝ ２ｘ＝ ３２ ＝ ３２ｍ , “１Ｂ”类型; 地构叶（ Ｓｐｅｒａｎｓｋｉａ ｔ?     

激素对枸杞体细胞胚发生及可溶性蛋白质含量和组分的影响

以宁夏枸杞无菌苗叶片为材料,对体细胞胚发生过程中激素作用、可溶性蛋白质变化及体细胞胚发生频率进行了研究。发现不同激素处理、可溶性蛋白质含量、组分和体细胞胚发生频率均有一定的差异,三者之间存在着相关性。结果如下：（１）ＭＳ＿１、ＭＳ＿２和ＭＳ＿３三种培养基上继代的愈伤组织难以诱导形成体细胞胚,为非胚性愈伤组织;而从ＭＳ＿１、ＭＳ＿２和ＭＳ＿３分别转到ＭＳ＿０和ＭＳ＿４培养基上的愈伤组织体细胞胚发生频率高,属于胚性愈伤组织。其中以ＭＳ＿３转至ＭＳ＿０后的体细胞胚发生频率最高。（２）可溶性蛋白质ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明：非胚性愈伤组织有特异性蛋白质６７ｋＤ,胚性愈伤组织有特异性蛋白质３５ｋＤ和４４ｋＤ;蛋白质３３ｋＤ和６７ｋＤ受２,４－Ｄ调控,蛋白质４９ｋＤ、５７ｋＤ受６ＢＡ调控,而蛋白质３７ｋＤ、５１ｋＤ受２,４－Ｄ和６ＢＡ协同调控。     

青海南部太白韭4居群的核型研究

研究了葱属太白韭青海４个居群的染色体数目和核型。结果如下,居群１：２ｎ＝２ｘ＝１６＝１２ｍ＋２ｓｍ＋２ｓｔ（２ＳＡＴ）,居群２：２ｎ＝２ｘ＝１６＝１４ｍ＋２ｓｔ（２ＳＡＴ）;居群３：２ｎ＝４ｘ＝３２＝２４ｍ＋４ｓｍ＋４ｓｔ（４ＳＡＴ）,居群４：２ｎ＝２ｘ＝１６＝１４ｍ＋２ｓｔ（２ＳＡＴ）＋Ｂｓ（０－２）。并讨论了多倍体和Ｂ染色体形成与分析。     

国产沙参属五个种的核型研究

首次报道了５种国产沙参属（Ａｄｅｎｏｐｈｏｒａ）植物的染色体数目和核型。北方沙参Ａ．ｂｏｒｅａｌｉｓＨｏｎｇｅｔＹ．Ｚ．Ｚｈａｏ的核型公式为２ｎ＝３４＝２８ｍ＋４ｓｍ（２ｓａｔ）＋２ｓｔ（２ｓａｔ）;雾灵沙参Ａ．ｗｕｌｉｎｇｓｈａｎｉｃａＨｏｎｇ的核型公式为２ｎ＝３４＝２６ｍ（４ｓａｔ）＋６ｓｍ＋２ｓｔ或２ｎ＝３４＋１Ｂ＝２６ｍ（４ｓａｔ）＋６ｓｍ＋２ｓｔ＋１Ｂ;秦岭沙参Ａ．ｐｅｔｉｏｌａｔａＰａｘｅｔＨｏｆｍ．的核型公式为２ｎ＝３４＝２６ｍ（２ｓａｔ）＋６ｓｍ＋２ｓｔ或２ｎ＝３４＋１Ｂ＝２６ｍ（２ｓａｔ）＋６ｓｍ＋２ｓｔ＋１Ｂ;裂叶沙参Ａ．ｌｏｂｏｐｈｙｌａＨｏｎｇ的核型公式为２ｎ＝３４＝２６ｍ＋４ｓｍ（２ｓａｔ）＋４ｓｔ或２ｎ＝３４＋２Ｂ＝２６ｍ＋４ｓｍ（２ｓａｔ）＋４ｓｔ＋２Ｂ。泡沙参Ａ．ｐｏｔａｎｉｎｉＫｏｒｓｈ的核型公式为２ｎ＝３４＝２８ｍ（２ｓａｔ）＋４ｓｍ＋２ｓｔ。它们同以往报道的其它种的核型相似：以中部着丝点染色体（ｍ）为主,至少具一对近端着丝点染色体（ｓｔ）和一对随体染色体,核型的对称程度较高,着丝点端化值（Ｔ．Ｃ）为５８．４％～６２．０％。结合其它性状,讨论了裂叶沙参的特殊性     

稀莶属三种植物的核形态学研究

研究了稀莶属３种植物的染色体核形态结构,除稀莶的染色体数目曾有报道外,毛梗稀莶、腺梗稀莶还未有报道,３种植物的核型为首次报道。它们的静止核均属于复杂染色中心微粒型,分裂前期染色体均属于渐变型。中期体细胞染色体数目都为２ｎ＝３０,本属的染色体基数为ｘ＝１５,核型分别为：（１）腺梗稀莶２ｎ＝３０＝２９ｍ＋１ｓｍ,属于１Ｂ型;（２）毛梗稀莶２ｎ＝３０＝２８ｍ＋２ｓｍ,属于１Ｂ型;（３）稀莶２ｎ＝３０＝２     

土人参原生质体培养再生植株

分别由土人参（Ｔａｌｉｎｕｍ ｐａｎｉｃｕｌａｔｕｍ （Ｊａｅｑ．） Ｇａｅｒｔｎ．）组织培养再生苗的叶片和幼茎诱导的愈伤组织游离出原生质体．叶肉原生质体在培养中未能进行正常分裂,存活不过１ 周．愈伤组织原生质体在Ｐ４ 培养基中（Ｋ８ｐ＋ ２,４－Ｄ ０．２ ｍ ｇ／Ｌ＋ ＮＡＡ １．０ ｍ ｇ／Ｌ＋ ＺＴ ０．５ ｍ ｇ／Ｌ＋椰乳５０ ｍ Ｌ／Ｌ＋ 葡萄糖０．５ ｍ ｏｌ／Ｌ）培养３ ｄ 开始第一次分裂,培养７ ｄ 时分裂频率为３６．７％ ． 愈伤组织再生率在液体培养中为０．３１％ ,在双层培养中为０．３４％ ． 愈伤组织在含有较低浓度的６－ＢＡ 的分化培养基上分化出不定芽． 幼苗生根后移栽到花盆中继续生长,２～３个月后开花结实,长出粗壮的肉质根． 再生小植株在试管中继代培养２～３ 个月开花结实． 研究结果还表明∶（１）愈伤组织在液体培养基或增殖培养基中培养时间过长,或继代次数过多均不利于分化．（２）较低浓度的６－ＢＡ （０．５～０．７ ｍ ｇ／Ｌ）对愈伤组织的分化是合适的．（３）ＧＡ３ 对幼苗的发育有促进作用． （４）多效唑（ＭＥＴ）对土人参试管苗有明显的壮苗和壮根作用     

硬粒小麦单倍体原生质体培养及植株再生

由硬粒小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ｄｕｒｕｍ Ｄｅｓｆ．）×玉米（Ｚｅａ ｍａｙｓＬ．）建立的单倍性胚性愈伤组织,在继代培养４ 个月后置于含２．０ ｍ ｇ／Ｌ２,４－Ｄ、３％ 蔗糖、２００ ｍ ｇ／Ｌ水解酪蛋白、１４６ ｍ ｇ／Ｌ谷氨酰胺和３００ ｍ ｇ／Ｌ天冬氨酸的ＭＳ液体培养基中进行悬浮培养,４ 个月后形成了生长迅速、由大小不同（０．５ ～５ ｍ ｍ ）的愈伤组织块组成的愈伤组织悬浮系。酶解试验表明,２．０％ 纤维素酶ＲＳ和０．５％ 的离析酶效果最好,而液体悬浮培养物和固体培养的愈伤组织（在酶解时用锋利的解剖刀片切成１ ｍ ｍ 左右的小块）都能释放出大量原生质体,但悬浮培养物释放出的原生质体状态较好,胞质更浓厚,用ＫＭ８ｐ 培养基以琼脂糖包埋培养方式培养时分裂频率可达５％ 左右。由原生质体再生的小愈伤组织经增殖、筛选后可获得胚性愈伤组织,将其转移至分化培养基Ⅰ（０．２ ｍ ｇ／Ｌ ２,４－Ｄ、１．０ ｍ ｇ／Ｌ ＢＡＰ、０．１ ｍ ｇ／ＬＮＡＡ、３％ 蔗糖、２００ ｍ ｇ／Ｌ 水解酪蛋白、１４６ ｍ ｇ／Ｌ谷氨酰胺和３００ ｍ ｇ／Ｌ天冬氨酸的ＭＳ固体培养基）和Ⅱ（不含２,４－Ｄ,其它成分同Ⅰ）上进行分步分化培养可再生出完整植株,分化频率约为２０％     

辽宁地区产6种乌头的细胞分类学研究

对我国辽宁地区毛莨科乌头属６个种的染色体的数目和形态进行了研究,并进行了核型分析。其染色体基数为Ｘ＝８,核型公式为：两色乌头：２ｎ＝２ｘ＝２ｍ＋１０ｓｍ＋４ｓｔ;蛇岛乌头为：２ｎ＝４ｘ＝１０ｍ＋２０ｓｍ（ＳＡＴ）＋２ｓｔ＋２Ｂ;黄花乌头为：２ｎ＝４ｘ＝４ｍ＋１２ｓｍ（ＳＡＴ）＋８ｓｔ＋１Ｂ;北乌头三倍体为：２ｎ＝３ｘ＝２Ｍ＋４ｍ＋１８ｓｍ;北乌头４倍体为２ｎ＝４ｘ＝４ｍ＋２８ｓｍ。同时,对乌头属下     

七种药用植物的染色体研究

对山东７种药用植物的染色体进行了研究。结果表明：田旋花（ＣｏｎｖｏｌｖｕｌｕｓａｒｖｅｎｓｉｓＬ）的染色体数目为２ｎ＝７８;蜜柑草（ＰｈｙｌａｎｔｈｕｓｍａｔｓｕｍｕｒａｅＨａｖａｔａ）的染色体数目为ｎ＝８８;挂红灯（ＰｈｙｓａｌｉｓａｌｋｅｋｅｎｇｉＬｖａｒｆｒａｎｃｈｅｔｉ（Ｍａｓｔ）Ｍａｋｉｎｏ）的染色体数目为２ｎ＝２４,核型公式为Ｋ（２ｎ）＝２４＝２ｍ＋１８ｓｍ＋２ｓｔ＋２ｓｔ（ｓａｔ）,核型“２Ａ”型;无剌曼陀罗（ＤａｔｕｒａｓｔｒａｍｏｎｉｕｍＬｖａｒｉｎｅｒｍｉｓ（Ｊａｃｑ）ＳｃｈｉｎｚｅｔＴｈｅｌ）的染色体数目为２ｎ＝２４,核型公式为Ｋ（２ｎ）＝２４＝２０ｍ＋４ｓｍ,核型“１Ｂ”型;决明（ＣａｓｉａｔｏｒａＬ）的染色体数目为２ｎ＝２６,核型公式为Ｋ（２ｎ）＝２６＝２４ｍ＋２ｓｍ,核型“１Ａ”型;荔枝草（ＳａｌｖｉａｐｌｅｂｅｉａＲＢｒ）的染色体数目为２ｎ＝１６,核型公式为Ｋ（２ｎ）＝１６＝６ｍ＋１０ｓｍ,核型“２Ａ”型;车前（ＰｌａｎｔａｇｏａｓｉａｔｉｃａＬ）的染色体数目为２ｎ＝３６,核型公式为Ｋ（２ｎ）＝３６＝３２ｍ＋４ｓｍ,核型“１Ａ”型。     

二棱大麦体细胞胚性无性系的建立

对１２个品种的二棱大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍｄｉｓｔｉｃｈｕｍ２ｎ＝２４）幼穗和６个品种的幼胚在附加５００ｍｇ／Ｌ酪蛋白,１５０ｍｇ／Ｌ天门冬素和２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ的ＭＳ培养基（Ｍ＿（３２０））中进行了离体培养,并诱导产生出了愈伤组织。把由Ｄ＿１幼胚所获得的愈伤组织转移到含２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ（Ｍ＿（３０５））培养基中后诱导产生出了体细胞胚性愈伤组织,幼苗和根。筛选出了体细胞胚性无性系。在长达二年的继代培养中,该细胞系仍保持旺盛的再生和分化成苗能力。