结直肠癌PTEN基因表达及与p-ERK相关性研究

目的 研究结直肠癌中的PTEN、p-ERK蛋白的表达及相互关系,初步探讨它们在结直肠癌的发生发展中的生物学意义.方法 应用免疫组织化学染色快捷法,检测40例结直肠癌组织、18例结直肠腺瘤、13例结直肠正常黏膜中PTEN蛋白、和p-ERK蛋白的表达情况,比较PTEN蛋白表达与临床病理指标的关系,及其与p-ERK蛋白表达的相关性.结果 1.结直肠癌癌组织PTEN蛋白表达的阳性率(57.5％)明显弱于腺瘤(72.2％)及正常组织(100％),组间比较差异有显著性(P＜0.05),其表达水平与结直肠癌的分化程度、淋巴结转移、浸润深度、Dukes分期有关,与患者的性别、年龄,肿瘤大小及位置无关(P＞0.05)2.结直肠癌组织p-ERK蛋白表达的阳性率(72.5％)明显高于正常结直肠黏膜组(0.00％)及腺瘤组(66.6％),组间比较差异有显著性(P＜0.01),其表达随结直肠癌侵润深度增加、淋巴结转移、Duke分期的进展而增高.3.PTEN蛋白表达强度与p-ERK蛋白表达强度之间呈负相关(r=-0.452,P＜0.05).结论 提示抑癌基因PTEN的表达与结直肠癌生物学行为密切相关;在结直肠癌发生、发展过程中,可能由于PTEN蛋白的低表达或失表达不能有效抑制ERK磷酸化,使细胞发生癌变,并促进癌变细胞的浸润、转移.     

结直肠癌mP53 和PCNA 表达的相关性及临床意义

目的:探讨结直肠癌中突变型P53基因(mP53)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的相关性及临床意义。方法:应用免疫组化二步法,检测60例结直肠癌组织及20例正常肠粘膜中mP53、PCNA的表达,结合临床病理资料进行统计分析。结果:60例结直肠癌中mP53阳性表达率65.0%,PCNA阳性表达率78.3%,20例正常肠粘膜中mP53、PCNA表达均为阴性(P<0.05)。mP53和PCNA阳性表达率在低分化组、浆膜层浸润组、淋巴结转移组均较高(P均<0.05)。mP53和PCNA表达呈正相关(r=0.58,P<0.05)。结论:mP53和PCNA在结直肠癌中表达均增高,二者与结直肠癌病理学分级、浸润深度和淋巴结转移有关,可作为判断结直肠癌预后的参考指标。     

HSP70 和P53 蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达 及其与临床病理特征的关系

目的:探讨热休克蛋白70(HSP70)和P53蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:应用免疫组织化学Envision法检测35例甲状腺乳头状癌组织、15例甲状腺良性病变组织及15例正常甲状腺组织中HSP70和P53蛋白的表达,分析HSP70和P53蛋白的表达与甲状腺乳头状癌临床病理学特征的关系。结果:甲状腺乳头状癌组织中HSP7O和P53阳性表达率明显高于甲状腺良性病变组织及正常甲状腺组织(P<0.01)。HSP7O在甲状腺乳头状癌组织中的表达与是否有颈部淋巴结转移、浸润深度以及AJCC分期密切相关(P<0.01),而与年龄、性别、肿瘤的大小以及分化程度无关(P>0.05)。P53在PTC组织中的表达与组织分化程度、是否有淋巴结转移、浸润深度以及AJCC分期密切相关(P<0.01),而与年龄、性别、肿瘤的大小无关(P>0.05)。HSP70和P53蛋白在PTC组织中的表达呈正相关性(r=0.679,P<0.01)。结论:HSP70和p53蛋白在PTC中均呈高表达,并有协同作用,两者可作为预测PTC的生物学行为和预后的参考指标。     

RCN2和PEAK1在结直肠癌中的表达与临床病理特征及预后的关系

目的:检测网织钙结合蛋白2(RCN2)和伪足富集的非典型激酶1(PEAK1)蛋白在结直肠癌组织中的表达情况,分析RCN2和PEAK1表达与患者临床病理特征和预后的关系。方法:免疫组织化学法检测90例结直肠癌组织及其癌旁正常组织中RCN2和PEAK1蛋白表达情况,分析结直肠癌组织RCN2和PEAK1表达与患者临床病理特征的关系,Kaplan-Meier生存曲线分析RCN2和PEAK1表达对患者预后的影响,Spearman等级相关检验结直肠癌组织RCN2和PEAK1表达的相关性。结果:RCN2和PEAK1蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率均明显高于癌旁正常组织(P0.05)。结直肠癌组织RCN2表达与肿瘤直径、浸润深度和TNM分期均有关(P0.05),PEAK1表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移和TNM分期均有关(P0.05)。Log Rank检验结果显示,RCN2阳性表达组和PEAK1阳性表达组患者的术后5年总生存率均分别低于RCN2阴性表达组和PEAK1阴性表达组患者(P0.05)。结直肠癌组织RCN2和PEAK1表达呈正相关性(r=0.586,P=0.000)。结论:RCN2和PEAK1蛋白在结直肠癌组织中呈高表达,且均与肿瘤恶性进展和不良预后关系密切。RCN2和PEAK1可作为结直肠癌治疗靶标的候选分子。     

CCNB2在结直肠癌中的表达及临床意义

目的:探讨细胞周期蛋白B2(Cyclin B2,CCNB2)在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法:选择45对结直肠癌组织及癌旁正常结直肠组织样本,分别采用实时定量PCR(qRT-PCR)方法和免疫组织化学技术检测CCNB2的mRNA和蛋白表达,并进一步分析CCNB2的表达与结直肠癌临床病理特征之间的关系。结果:结直肠癌组织中CCNB2 mRNA的表达显著高于癌旁正常结直肠组织,差异有统计学意义(P0.001),且CCNB2的mRNA表达与结直肠癌的肿瘤大小、浸润深度及TNM分期显著相关(P0.05),与年龄、性别、肿瘤位置、分化程度、脉管神经浸润、淋巴结转移和远处转移均无关(P0.05)。45例结直肠癌标本中39例表达(+~+++),6例表达(-)。CCNB2蛋白主要表达于结直肠癌细胞质中,少量见于细胞核。结直肠癌组织中CCNB2蛋白的阳性表达率为86.7%,显著高于癌旁正常结直肠组织,并与患者的性别、年龄、分化程度和肿瘤转移均无显著相关性(P0.05),但与肿瘤分期、浸润程度均显著相关(P0.05)。结论:CCNB2在结直肠癌中呈异常高表达,且与结直肠癌的发生发展相关,有望作为结直肠癌的诊断和预后预测参考指标。     

结直肠癌组织RSK4、p53蛋白的表达及临床病理意义

目的:探讨结直肠癌组织中P90核糖体S6激酶4(RSK4)蛋白、p53蛋白的表达及其临床病理意义。方法:选取我院病理科2014年1月~2016年5月既往收集的结直肠癌手术后标本70例及同期结直肠癌癌旁组织30例,采用免疫组化染色检测两组标本中RSK4蛋白、p53蛋白的表达情况,并分析其与结肠癌患者临床病理特征的相关性。结果:结直肠癌组织中RSK4蛋白、p53蛋白的阳性表达率分别为20.00%、55.71%,而癌旁组织中RSK4蛋白、p53蛋白阳性表达率分别为53.33%、10.00%,两组比较差异均具有统计学意义(P0.05)。Ⅰ期+Ⅱ期、高分化和中分化结直肠癌组织RSK4蛋白的阳性表达率显著高于Ⅲ期、低分化结直肠癌(P0.05);Ⅰ期+Ⅱ期、浸润深度(T1、T2)、未发生淋巴结转移的结直肠癌组织中p53蛋白阳性表达率显著的低于Ⅲ期、浸润深度(T3、T4)、发生淋巴结转移的结肠癌组织(P0.05)。结论:结直肠癌组织中RSK4蛋白表达下调、p53蛋白表达上调,二者可能与结直肠癌的发生和发展有关,并可能作为结肠癌诊断和预后评估的参考指标。     

直结肠癌BUBR1的过度表达与TP53突变及微卫星状态关系提示其过度表达与染色体不稳定表型有关

在有丝分裂过程中BUBR1监视微管与着丝点的结合,是保证染色体均等分离的重要分子机制之一.BUBIB变异家谱研究及其敲除模型的研究表明,BUBR1缺陷与染色体不稳定性及肿瘤的发生直接相关.近来在数种人类肿瘤,对BUBR1蛋白过度表达有所报道.但在直结肠癌,BUBR1的过度表达是否与染色体不稳定性的发生有关目前仍无定论.在人类结直肠癌的遗传不稳定性主要表现为两种类型,染色体不稳定性及微卫星不稳定性,它们提示了两条独立的肿瘤发生路径.一般认为不存在高频度微卫星不稳定性表型的肿瘤通过染色体不稳定途径癌变.P53蛋白通过多种机制对维护遗传稳定性起到重要的作用,TP53基因突变经常与染色体不稳定现象并存.DNA倍体情况也是染色体不稳定研究不可缺少的指标.本研究采用免疫组织化学法检测了一组93例进展期散发结直肠癌BUBR1蛋白的表达情况,直接测序法检测TP53变异.高分辨率荧光标记微卫星不稳定检测技术检测微卫星状态,固相激光扫描细胞仪技术检测DNA倍体情况.我们分析了BUBR1表达与三种反映遗传背景的因子的关系.BUBR1蛋白过度表达在人结直肠癌较为常见.在非高频度微卫星不稳定的结直肠癌,BUBR1蛋白过度表达率明显为高(P＜0.01),在TP53基因突变的病例其过度表达率亦较高(P＜0.05).BUBR1蛋白的过度表达与DNA异倍体无统计学相关,但DNA异倍体病例的BuBRl过度表达有偏高倾向.BuBRl表达情况与常用的临床病理学指标无统计学相关.BuBRl过度表达同微卫星状态及TP53突变的关系明确的提示,在人类散发结直肠癌,BUBR1蛋白过度表达与染色体不稳定状态有关.BUBR1过度表达作为一种常见的分子异常,对于肿瘤的早诊预防提供新的标志物.并可能成为治疗的新靶点.     

氨肽酶N在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的:检测结直肠癌中氨肽酶N(APN)的表达,并通过分析其与血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的关系,探讨APN在结直肠癌发生、发展过程中的作用及其临床意义。方法:应用免疫组织化学技术,检测40例结直肠癌组织及40例癌旁正常直肠组织中APN、VEGF和bFGF的表达,并结合临床病例特征进行分析。结果:40例结肠癌组织中APN的阳性率达52.5%(21/40),15例转移淋巴组织中达66.67%(10/15),在结直肠癌组织和转移淋巴结组织中的阳性表达率均明显高于癌旁正常直肠组织,差异有统计学意义(P0.05)。APN、VEGF与bFGF在结直肠癌中的阳性表达均与患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤位置、分化程度无关(P0.05),而与肿瘤的分期和有无转移显著相关(P0.05)。结直肠癌组织中APN与VEGF、bFGF的表达间均呈显著正相关性(P0.05)。结论:APN在结直肠癌组织中呈高表达,与VEGF、bFGF可能具有协同作用,共同参与调节结直肠癌的发展,对于评估结直肠癌的生物学行为和预测患者的预后可能具有重要价值。     

结直肠癌组织BCL9和VEGF的表达与临床意义

探讨结直肠癌中B细胞淋巴瘤因子9(B-cell lymphoma 9,BCL9)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达与临床病理的关系及其临床意义.采用免疫组织化学SABC染色法,检测83例结直肠癌组织和10例癌旁正常组织中BCL9及VEGF蛋白的表达情况,并且分析其与临床病理特征的关系.BCL9和VEGF在癌组织中表达率分别为67.47%(56/83)和69.88%(58/83),而癌旁正常组织中均不表达.BCL9在结直肠癌中的表达与肿瘤分化程度、浸润深度、Dukes分期、有无淋巴结转移相关(P0.05).VEGF在结直肠癌中的表达与肿瘤分化程度、浸润深度无关,而与肿瘤Dukes分期、有无淋巴结转移密切相关(P0.01).结直肠癌中VEGF的表达随BCL9表达的升高而升高(P0.01).BCL9、VEGF可能在结肠癌的发生发展过程中起重要作用.BCL9可能通过上调VEGF的表达,促进肿瘤浸润和转移.     

β-catenin和E-cadherin在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨β连环蛋白(β-catenin)和E-钙粘蛋白(E-cadherin)在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学染色技术(Elivision)检测β-catenin和E-cadherin蛋白在这60例结直肠癌及癌旁正常黏膜中的表达情况及其与临床病理特征的关系。结果 60例结直肠癌组织中,β-catenin、E-cadherin蛋白的异常表达率分别为75.00%、58.33%,显著高于癌旁正常结直肠黏膜组织1.67%、6.67%(P<0.01)。β-catenin与E-cadherin蛋白的异常表达呈正相关(r=0.683,P<0.01)。β-catenin和E-cadherin蛋白异常表达均与肿瘤的分化程度、淋巴结转移和Dukes分期有关(P<0.05)。此外,E-cadherin蛋白表达还与肿瘤的组织学类型有关(P<0.05)。结论β-catenin和E-cadherin在结直肠癌中均有异常表达,E-cadherin可通过对β-catenin的调节,间接地影响Wnt信号通路传导。两者联合检测可能为结直肠癌的预防、早期诊断、新靶点治疗提供新思路和分子依据。     

人肝癌细胞基因组中HBV DNA的整合与c-fos、p53基因表达之间的关系

为了探讨HBVDNA、c-fos和p53在肝癌发生中的作用及其关系。利用PCR技术和免疫组化ABC法,检测了肝癌基因组中HBVDNA的整合、c-fos和突变p53的表达。HBVDNA整合率为67%,C-FOS蛋白阳性率为67%,突变P53蛋白阳性率为58%。HBVDNA整合与c-fos激活、p53突变有显著的一致性(P＞0.05;P＞0.05),c-fos激活与p53突变之间呈负相关,但无显著意义(r=-0.2816,P＞0.05)。HBVDNA的整合可能引起c-fos的激活和/或p53的突变,从而导致肝癌的发生。     

P21过表达和P53蛋白蓄积在判断肺癌恶性度与预后的应用研究

应用Ha-ras P21和P53单克隆抗体,采用S-P免疫组织化学方法对86例原发性肺癌进行了研究,前者总阳性率为79.07%,后者为53.48%.细支气管肺泡癌的P21强阳性(++)率明显高于腺泡状腺癌和大细胞癌(P<0.05),分化程度越高,染色越强.阴性(-)和中等阳性(+)的5年存活率明显高于强阳性(++)者.P53蛋白蓄积与肺癌的分型、分化、TNM分期无关,但P53阳性与阴性患者的术后平均存活月数间有着显著的差异(P<0.05),P53染色越强则术后存活月数越短.提示P53蛋白蓄积是判定肺癌预后的指标之一.     

散发性大肠癌组织及粪便脱落细胞p53蛋白的检测

为了解大肠癌组织及粪便脱落细胞中 p5 3蛋白表达对大肠癌诊断的临床意义 ,采用 S- P法对 38例大肠癌患者的癌组织及其中的 30例患者的粪便脱落细胞 p5 3蛋白进行检测。大肠癌组织中 p5 3蛋白阳性表达率为 39.47% (15 / 38) ,p5 3蛋白阳性与癌组织的分化程度及是否存在淋巴结转移均无相关性 (P>0 .0 5 )。粪便脱落细胞 p5 3蛋白阳性表达率为 36 .6 7%(11/ 30 ) ,脱落细胞与相应患者的癌组织中的 p5 3表达一致率为 83.33% (2 5 / 30 )。表明粪便中脱落细胞 p5 3蛋白的表达忠实反映了相应癌组织的 p5 3突变情况 ,对其检测有望成为大肠癌诊断及筛查的无创分子途径。同时表明粪便中脱落细胞核保持了肿瘤抗原决定簇的主要结构及生物特征 ,进行免疫细胞化学检测是可行的 ,为进行脱落细胞核其它肿瘤标志物或其它生物研究奠定了可行性的基础     

乳腺癌中癌胚抗原（CEA）与p53、nm23—H1蛋白表达和部分病理指标的相关性研究

利用免疫组织化学方法检测了乳腺癌CEA与p53和nm23－H1蛋白的表达,对其相关性进行了研究,同时与其它病理指标亦进行了比较。结果：82 例乳腺癌中,CEA阳性67例（82％）,与p53蛋白的表达呈显的负相关（P＜0.05）,而与nm23-H1蛋白的表达则呈显的正相关（P＜0.05）;同时,CEA的表达与肿瘤的病理分级和体积显相关（P＜0.05）,即分级越高或肿瘤越大,CEA阳性表达率越低;而与患年龄、淋巴结转移和肿瘤坏死程度无关（P＞0.05）。综合分析推测：CEA可能是乳腺癌一种高分化肿瘤标志,并与肿瘤的浸润转移潜能有一定的关系,与其它指标联合应用在判断乳腺癌预后有一定的价值。     

Prognostic significance of proliferative activity, DNA-ploidy, p53 and Ki-ras point mutations in colorectal liver metastases

Abstract. Paired colorectal liver metastases (CLM) and normal tissue samples from a consecutive series of 36 patients were studied prospectively. MIB-1 expression was studied by immunohistochemistry on paraffin-embedded sections. DNA ploidy and S-phase fraction (SPF) measurements were performed by flow cytometry on frozen tissues. Mutations within the p53 (exons 5-8) and c-Ki-ras (codons 12 and 13) genes were detected by PCR single-strand conformation polymorphism analysis followed by sequencing. A high correlation was observed between the MIB-1 LI and SPF value (rho=0·81; P<0·01). Moreover, p53 gene mutations were associated with either high MIB-1 LI and high SPF. In univariate analysis, SPF and MIB-1 levels were related to risk of death. The association between overall survival and DNA-ploidy or p53 mutations did not reach statistical significance, but a slightly better survival was observed for patients either with DNA-diploid tumours or without mutations ( P =0·05 and P =0.06, respectively). SPF was shown by multivariate Cox model analysis to be an independent prognostic variable and thus it might be a useful prognostic factor in patients with CLM.     

Secreted recombinant P53 protein from Pichia pastoris is a useful antigen for detection of serum p53: autoantibody in patients with advanced colorectal adenocarcinoma

The detection of P53 alteration by serological method is easier to perform, does not require tumor tissues and is of interest for patients monitoring. In this study, we described the development of a home made ELISA test based on recombinant human P53 protein produced in Pichia pastoris and used as antigen for the detection of serum p53-Abs in colorectal carcinoma patients. The human P53 was secreted as a His-tagged protein by recombinant KM71 strain (Kα21) via the peptide signal α of the Saccharomyces cerevisiae mating type gene. The recombinant P53-His was able to detect p53-Abs in 23.4 % of patients. Serum p53-Abs correlated significantly with surgical treatment (P = 0.007), relapse during follow-up (P = 0.036), depth of invasion (P = 0.036) and the level of CA19-9 (P = 0.034). Survival analysis showed that patients negative for serum p53-Abs exhibited a prolonged disease free survival period (P log rank = 0.012). In conclusion, the secreted recombinant human P53-His produced in P. pastoris seems to be a useful antigen for detection of serum p53 Abs in patients with colorectal carcinoma.     

p53和c-myc异常表达与胃癌细胞多药耐药性关系的研究

应用ＳＡＢＣ免疫组织化学方法研究６７例胃标本中ｐ５３和ｃ－ｍｙｃ的表达与多药耐药性（ＭＤＲ）的关系。结果显示本组胃癌中ｐ５３阳性３２例,阳性率４７．８％;ｃ－ｍｙｃ阳性３７例,阳性率５５．２％;Ｐ－ｇｐ阳性３９例,阳性率５８．２％。ｐ５３的异常表达与ｍｄｒ－１基因表达呈显著正相关（ｒ＝０．６３,Ｐ＜０．０５）,而ｃ－ｍｙｃ和ｍｄｒ－１的表达无明显相关。提示ｐ５３异常表达可增加ｍｄｒ－１基因的表达,从而使胃癌细胞获得ＭＤＲ表型     

大肠癌P21,P53蛋白表达和k—ras基因,P53基因突变研究

用免疫组化技术和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术对高、中、低分化大肠腺癌、癌旁粘膜、正常粘膜及大肠腺癌型息肉的Ｐ２１、Ｐ５３蛋白表达和ｋ－ｒａｓ基因、Ｐ５３基因突变进行检测。结果,大肠腺癌Ｐ２１、Ｐ５３蛋白表达比大肠腺瘤增多,但增加不显著（Ｐ〉０．０５）,二组均比癌旁粘膜和正常粘膜Ｐ２１、Ｐ５３蛋白表达阳性率高（Ｐ〈０．０１）,大肠腺癌ｋ－ｒａｓ基因和Ｐ５３基因突变率比大肠腺瘤、癌旁粘膜和正常粘膜组显著增加