β—干扰及其临床应用

本文较全面地综述了β－干扰素国内外的研究现状和临床应用情况。首先介绍了β－干扰纱的来源、理化性质、基因定位、分子结构以及β－干扰素的受体,重点总结了β－干扰素生物学作用及当今国际市场上三种β－干扰素的研发思路和市场情况,同时介绍了几家制造厂家的产品在临床上的应用情况,由此可以看出,β－干扰素是近来开发的广泛用于病毒性感染、恶性肿瘤、多发性硬化症以及神经系统疾病的新型治疗药物。     

重组人干扰素α2a发酵工艺的研究

对干扰素工程菌ＰＢＶ３２０／７１１８－α２ａ型发酵工艺,由批式培养改为反馈式流加培养［１］可显著提高工程菌ＰＢＶ３２０／７１１８－α２ａ在４０Ｌ发酵罐中的菌体产量及干扰素的表达水平。     

细胞凋亡中的关键蛋白酶—Caspase—3

在哺乳动物细胞凋亡执行阶段起重作用的一系列半胱氨酸蛋白酶基因相继被克隆。Ｃａｓｐａｓｅ－３（又称ＣＰＰ３２,Ｙａｍａ,ａｐｏｐａｉｎ）被认为是各种凋亡刺激因子激活的ｃａｓｐａｓｅ家族中的关键蛋白酶,活性ｃａｓｐａｓｅ－３可作用于一些其他ｃａｓｐａｓｅ成员,并降解凋亡细胞中的某些蛋白质。Ｃａｓｅｐａｓｅ－３抑制物是细胞凋亡抑制剂,有希望成为治疗因细胞过度死亡所致相关疾病的重要分子。     

干扰素—α和—γ对灌流假孕大鼠卵巢黄体的作用

利用假孕大鼠卵巢体外灌流方法研究了干扰素－α和－γ对黄体分泌孕酮和前列腺素Ｆ－２α作用,并测定灌流后卵巢中３β－羟甾脱氢酶和２０α－羟甾脱氢酶的活性。观察灌汉假孕第８天大鼠卵巢结果表明,三种不同剂量的干扰素α－和－γ均能抑制孕酮的分泌,但干扰素－α的抑制作用仅在短时间内发生,干扰素－α和－γ均有抑制ｈＣＧ诱导孕酮分泌的作用,但剂量和作用时间差异。     

Ca^2＋与CaM对大白鼠离体叶圆片Ca^2＋—ATPase和β—1,3—葡聚糖？…

经Ｃａ＾２＋与ＣａＭ促进剂和抑制剂处理的大白菜离体叶圆片,其细胞膜Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性同进受Ｃａ＾２＋与ＣａＭ的调节,而β－１,３－葡聚糖合成酶活性仅受Ｃａ＾２＋的调节,与ＣａＭ无关。     

γ—干扰素诱导因子

γ┐干扰素诱导因子孙文长陈诗书（上海第二医科大学人类基因治疗研究中心,上海２０００２５）关键词ＩＦＮ－γ诱导因子研究表明,小鼠腹腔注射热灭活的痤疮丙酸杆菌一周后,再静脉注射Ｔ细胞有丝分裂原,小鼠循环血中可检测到高含量的γ干扰素（ＩＦＮ－γ）,单独注射...     

BIV—1—gp120在重组杆状病毒系统中的表达

将中国株ＨＩＶ－１Ｂ亚型ｇｐ１２０全基因序列克隆到杆状病毒转座载体ｐＦａｓｔＢａｃＩ中多角体启动子下游,构建成重组转座载体ｐＦａｓｔＢａｃＩ－ｇｐ１２０,利用细菌／杆状病毒（Ｂａｃ ｔｏ Ｂａｃ）表达系统筛选重组杆状病毒,在昆虫细胞Ｓｆ９中高效表达了ＨＩＶ－１的外膜糖蛋白ｇｐ１２０,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析结果一致,证明表达了２种糖基化程度不同的ｇｐ１２０。     

α-干扰素治疗慢性病毒性肝炎的现状和展望

长期以来α－干扰素治疗慢性乙型和丙型病毒型肝炎是有效的,临床治疗中已得到承认。但大剂量发现副作用明显,口含天然人α－干扰素无副作用,如果能替代α－干扰素并联合其它药物治疗,对病毒性疾病和恶性肿瘤将提供新的治疗方法．     

应用流式细胞仪研究抗IL——8单抗对IL——8激活人颗粒细胞活力的中和作用

以ＩＬ－８免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞与Ｓｐ２／０或６５３小鼠骨髓瘤细胞融合构建了淋巴细胞杂交瘤克隆Ｉ８－Ｓ２和Ｉ８－６３。ＥＬＩＳＡ叠加试验（ＥＬＩＳＡ Ａｄｄｉｔｉｖｉｔｙ Ｔｅｓｔ）表明这两杂交瘤克隆分泌的单抗分别识别ＩＬ－８分子的不同表位。ＩＬ－８能激活人颗粒细胞,引起细胞内Ｃａ＾２＋浓度（「Ｃａ＾２＋」）上升。通过流式细胞仪分析「Ｃａ＾２＋」的变化,发现两个克隆单抗对ＩＬ－８激活细胞的活     

He—Ne激光照射对成纤维细胞内[Ca^2＋]i浓度影响的流式细胞计测定

目的：Ｈｅ－Ｎｅ激光照射治疗的机理不明,激光照射引起细胞内Ｃａ＾２＋水平变化,为治疗机理提供理论依据。方法：Ｈｅ－Ｎｅ激光照射引起鼠成纤维细胞Ｌ９２９内［Ｃａ＾２＋］ｉ的变化,用ＨＯ３４２对细胞ＤＮＡ活性染色,Ｆｌｕｏ－３ＡＭ对细胞内Ｃａ＾２＋染色,利用ＦＣＭ同时定量分析细胞ＤＮＡ和细胞内Ｃａ＾２＋的变化。结果：激光照射１５ｍｉｎ（光剂量１１．８１Ｊ／ｃｍ＾２后,ＦＣＭ分析可见ＤＮＡ分布直方图右移     

鸡胚胎巨噬细胞激活与胞内游离钙含量的变化

胚胎巨噬细胞在其来源、生长和发育环境以及功能等方面均与成体巨噬细胞有所不同［１］。本文用激光扫描共聚焦显微镜观察不同造血发育阶段鸡胚胎巨噬细胞在激活剂ＩＦＮ－γ（干扰素－γ）和ＬＰＳ（脂多糖）作用下细胞内Ｃａ２＋含量的变化情况,探讨不同发育时期的胚胎巨噬细胞的激活与胞内Ｃａ２＋含量变化的演变规律。     

CaM BP—10对NAD激酶的抑制效应

ＮＡＤ激酶在光合作用等植物生理过程中起重要作用。ＮＡＤ激酶的激活依赖于钙离子和钙调素（ＣａＭ）。从植物中分离得到的一种新的ＣａＭ结合蛋白ＣａＭ ＢＰ－１０（ＢＰ－１０）明显抑制ＮＡＤ激酶的激活活性。抑制作用可被ＣａＭ所克服。动力学研究表明,抑制效应是ＢＰ－１０与ＣａＭ之间特异性相互作用的结果。实验证实ＢＰ－１０对ＮＡＤ激酶活性起着重要调节作用。     

锌7—金属硫蛋白与镉7—金属硫蛋白抗羟自由基保护线粒 …

制备了Ｚｎ７－与Ｃｄ７－金属硫蛋白。分离出大鼠心肌线粒体。用电子自旋共振自旋标记方法测定线粒体膜脂流动性及膜蛋白构象,运动性,分析了线粒体Ｃａ＾２＋－Ｍｇ６２＋－ＭＡＴＰ酶活性及＾４５Ｃａ摄入。羟自由基损伤使线粒体膜脂流动性下降,膜蛋白构象改变及运动性降低,线粒体Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋ＡＴＰ酶活性降低及＾４５Ｃａ的摄入活性下降。     

2—酮—L—古龙酸还原酶分离纯化及其理化,酶学性质的研究

从发酵Ｌ－山梨糖的Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｏｘｙｄａｎｓ和Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ２９８０混和菌株的无细胞抽提液中分离到了２－酮－Ｌ－古龙酸还原酶（ＫＧＲ）,测得其分子量为９０ｋＤａ。动力学性质研究表明它为一个典型的Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ－Ｍｅｎｔｅｎ氏酶,对２－酮－Ｌ－古龙酸作用的Ｋｍ值为３．４２×１０＾－３ｍｏｌ,最适作用ｐＨ为６．５,最适作用温度为３０℃。２－酮－Ｌ－古龙酸还原     

跨膜Ca^2＋梯度对肌质网Ca^2＋—ATP酶调节的特异性

我们曾报道跨膜Ｃａ＾２＋梯度可通过膜脂影响肌质网Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶的构象和活性。本文就跨膜Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶的构象和活性。本文就跨膜Ｃａ＾２＋梯度对肌质网Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶的调节是否具有特异性作进一步研究。结果表明这种特异性表现在两方面：一是跨膜Ｃａ＾２＋梯度对肌质网Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶功能的调节不能归结于跨膜Ｃａ＾２＋深度梯度所导致的膜电位的作用,离子载体ＦＣＣＰ可消除跨膜电位但并不影响肌     

IFN—α治疗慢性乙肝抗病毒疗效与细胞因子变化关系分析

观察一乙型病毒性肝炎（ＣＨＢ）患者（２５例）经α－干扰素（ＩＦＮ－α）抗病毒治疗前后血清中细胞因子和受体水平的变化与乙肝病毒消长之间的关系。收集治疗前后血清标本ＥＬＩＳＡ法同步检测,根据治疗后乙肝病毒复制指标（ＨＢＶ－ＤＮＡ）阴转分应答组（１０例）与无应答组（１５例）进行统计学分析。治疗后两组血清中ＩＬ－６水平下降,尤其答应组下降明显;治疗后应答组ＩＬ－２水平明显升高（Ｐ〈０．０１）,ｓＩＬ－２Ｒ     

猪生殖—呼吸道综合征病毒（PRRSV）CH—1a株糖蛋白基因的遗传变异分析

新近发现的猪生殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）是单股ＲＮＡ病毒,属于不久前成立的动脉炎病毒科,为了比较国内分离的ＣＨ－１ａ株与国外毒株的分子遗传学关系,扩增并克隆了ＰＲＲＳＶ ＣＨ－１ａ株糖蛋白基因ＯＲＦ２￣５,测定了其核苷酸序列。用序列分析软件分析了其编码产物的分子量、等电点、疏水性、抗原性和有关位点,并与国外毒株进行了序列比较和系统发育进化分析。结果表明：ＣＨ－１ａ株与ＶＲ－２３３２株尽管密     

大鼠TCF—a修饰16肽的溶液构象

已知大鼠ＴＧＦ－ａ的抗原部位于Ｃ环,且大鼠的ＴＧＦ－ａ（３４－４３）和ＴＧＦａ（４４－５０）均有较强的活性以转化正常细胞。为了提示其结构与功能关系,合成了大鼠ＴＧＦ－ａ修饰１６肽。在前文用二维核磁共振技术归属质子谱并验证其一级结构的基础上,本文测定了不同混合时间的二维ＮＯＥＳＹ谱。根据所得的数据原始斜率法求出距离约束。通过约束分子动力学计算定出该分子溶液构象。其中还用ＤＱＦ－ＣＯＳＹ的数据求出二面     

黑曲霉（Aspergillus niger）纤维素酶系中内切β—葡聚糖酶性质的研究

对黑曲霉菌株Ｗ２５纤维素酶系中内切β－萄聚糖酶组分的性质进行了研究。Ⅰ－２ａ,Ⅰ－２ｂ,Ⅰ－２ｃ,Ⅰ－２ｄ,Ⅱａ,Ⅱｂ,和Ⅲａ的最适ｐＨ分别为５．５,５．５,５．０,５．５,５．０,５．５和５．５;均在ｐＨ２．０－７．０之间稳定,最适温度分别为５０,５０,５５,５５,５５和６０℃;保温１小时的半失活温度ｔ１／２分别为４９、６１、６３、５２、５７、４７和６７℃。ＳＤＳ－凝胶电脉法测得Ⅰ－２ａ,Ⅰ－２     

培养大鼠心肌细胞缺氧与复氧时H~＋－Ca~（2＋）交换的研究

大量研究表明：心肌细胞缺氧后再复氧，可因氧反常和ｐＨ反常造成细胞内Ｃａ２＋超载。通常认为，在心肌细胞发生ｐＨ反常后，Ｈ＋－Ｎａ＋和Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换加强是细胞内Ｃａ２＋超载的重要机制。本实验结果表明：阻断了Ｈ＋－Ｎａ＋和Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换后，仍有部分Ｃａ２＋进入细胞，Ｃａ２＋内流量与缺氧时间成正比关系。在无Ｎａ＋溶液中也得到了同样结果，表明此时Ｃａ２＋内流是通过与Ｎａ＋无关的通路进入细胞的。进一步实验表明这种Ｃａ２＋内流与细胞膜内外ｐＨ梯度差密切相关。当胞外ｐＨ升高即胞内相对Ｈ＋浓度增加时，Ｃａ２＋内流量也增加。故推测：ｐＨ反常所致细胞内Ｃａ２＋超载的原因，除Ｈ＋－Ｎａ＋和Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换外，尚有Ｈ＋－Ｃａ２＋交换机制。