PTEN和Fas在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的探讨PTEN和Fas的表达在骨肉瘤发生中的可能作用及其临床意义.方法用SP免疫组化方法检测PTEN和Fas在38例骨肉瘤及20例骨软骨瘤中的表达.结果 PTEN在骨肉瘤中表达阳性率为55.3%,在骨软骨瘤中为90.0%,二者相比差异有非常显著意义(P<0.01).Fas在骨肉瘤中表达阳性率为73.7%,在骨软骨瘤中为95.0%,二者相比差异有显著意义(P<0.05).骨肉瘤中PTEN和Fas的表达呈显著正相关(r=0.39,P<0.01).PTEN的低表达与分化程度无关,与肺转移有关,Fas的低表达与分化程度及肺转移有关.结论 PTEN和Fas与骨肉瘤的发生有关,且呈正相关,联合检测PTEN和Fas的表达将对骨肉瘤的早期诊断,判定恶性程度及预后具有指导意义.     

凋亡相关蛋白Livin及Fas在骨肉瘤中的表达

目的:研究凋亡相关蛋白Livin、Fas在骨肉瘤表达及其临床意义.方法:用免疫组化S-P法,研究45例骨肉瘤及15例骨软骨瘤中Livin、Fas的表达情况.结果:Livin在骨肉瘤组织中阳性表达率为62.2%而在骨软骨瘤中不表达,两者比较有统计学差异(p＜0.01),Livin在骨肉瘤组织中的表达与分化程度、转移有关(p＜0.05,p＜0.01);Fas在骨肉瘤及骨软骨瘤中阳性率分别为22.2%和53.3%,两者比较也有统计学差异(p＜0.01);Fas在骨肉瘤组织中的表达与转移有关(p＜0.05);Livin与Caspase-3之间呈负相关(p＜0.05).结论:在骨肉瘤中Livin的高表达和Fas的低表达可能共同参与骨肉瘤的发生及转移.     

WNT6基因在原发性骨肉瘤组织中的表达及其临床意义

目的:骨肉瘤是最常见的恶性骨肿瘤之一,好发于青少年,致残致死率高.因此,骨肉瘤的早期诊断、治疗及其发病原因和机制已成为现阶段骨肉瘤研究领域的主要方向之一.通过观察WNT6在骨肉瘤组织中的表达,探讨其在原发性骨肉瘤发生发展中的可能作用机制,为以WNT6为指标对原发性骨肉瘤的诊断和以WNT6为靶点进行原发性骨肉瘤生物学治疗提供理论依据.方法:收集70例原发性骨肉瘤、28例骨样骨瘤和25例骨软骨瘤标本的存档蜡块,应用SP免疫组织化学染色法检测组织中WNT6蛋白的表达情况,并应用统计学处理数据分析其与骨肉瘤临床病理参数及预后的关系.结果:WNT6在原发性骨肉瘤、骨样骨瘤和骨软骨瘤组织中的阳性表达率分别为90.00 ％(63/70)、14.29 ％(4/28)和12.00 ％(3/25).骨样骨瘤组织WNT6阳性表达率与骨软骨瘤组织相比差异无统计学意义(P＞0.05);原发性骨肉瘤组织WNT6阳性表达率明显高于骨样骨瘤组织和骨软骨瘤组织,差异均有统计学意义(均P＜0.05).WNT6在骨肉瘤组织中的表达与Enneking分期、肺转移和预后呈正相关关系.结论:WNT6在原发性骨肉瘤中的表达明显上调,WNT6表达与骨肉瘤的Enneking分期、年龄、肺转移等相关,同时WNT6高表达患者生存率降低,对骨肉瘤的诊断和预后评估具有重要价值,并在临床可能成为一个诊断原发性骨肉瘤的检测指标,为骨肉瘤的生物学治疗提供新的靶点.     

ROR2在骨肉瘤细胞和组织中的表达及其意义

目的：研究ROR2在骨肉瘤细胞及组织中的表达情况,探讨其表达的临床意义。方法：使用Western-blotting实验方法检测骨肉瘤及骨软骨瘤新鲜原发灶标本中ROR2表达情况;使用免疫组化方法检测骨肉瘤及骨软骨瘤原发灶标本中ROR2表达情况并结合临床资料了解其临床意义;使用RT-PCR实验方法检验SaoS-2骨肉瘤细胞中ROR2mRNA表达情况。结果：①通过免疫组织化学的方法检测骨肉瘤标本ROR2阳性表达率为70.91%,骨软骨瘤标本ROR2阳性表达率为20.00%,两者阳性表达率有显著性差异（x2=12.73 P〈0.05）。②Western-blotting实验检测新鲜骨软骨瘤和新鲜骨肉瘤组织中ROR2蛋白表达有显著性差异（P〈0.05）。③RT-PCR实验检测SaoS-2骨肉瘤细胞株中ROR2基因表达阳性。④检测在有转移的骨肉瘤患者标本中ROR2的阳性表达率为100.00%,在无肿瘤转移患者标本中阳性表达率为61.91%,两者表达阳性率有显著性差异（x2=5.26 P〈0.05）。⑤ROR2在骨肉瘤Enneking分期Ⅰ期表达阳性率为22.22%（2/9）,Ⅱ期表达阳性率为72.73%（24/33）,Ⅲ期表达阳性率为100.00%（13/13）。Ⅰ期与Ⅱ期间有显著性差异（x2=5.66 P〈0.05）,Ⅰ期与Ⅲ期间有显著性差异（x2=11.46 P〈0.05）,而Ⅱ期与Ⅲ期间无显著性差异（x2=2.85 P〉0.05）。结论：ROR2蛋白和基因在骨肉瘤组织及细胞中有较强表达。鉴于ROR2对于骨骼发育的影响及其通过WNT信号通路调节成骨细胞增殖及分化的生物学特点使得我们怀疑ROR2可能在骨肉瘤的发生发展过程中具有一定的作用,其可能促进了骨肉瘤的发生发展及恶性生物学行为。     

大肠肿瘤中PTEN和TGF-β1表达及意义

目的 检测大肠癌及大肠腺瘤中PTEN和TGF-β1蛋白的表达,了解大肠癌临床病理的相关因素.方法 采用SP免疫组化法,检测PTEN和TGF-β1蛋白在大肠组织中的表达及意义.结果 PTEN在正常黏膜、大肠腺瘤、大肠癌组织中的阳性表达率分别为100%、70%和51.61%;而癌旁组织的阳性表达率60.87%,与癌组织相似,两者有明显的同步表达性.大肠癌中PTEN蛋白的阳性表达率明显低于非癌组(P< 0.05).TGF-β1在正常黏膜、大肠腺瘤及大肠癌中的阳性表达率分别为0%、40%、83.87%,癌旁组织为67.39%.正常黏膜组织TGF-β1的表达低于癌旁组织、大肠腺瘤和大肠癌(P< 0.05).PTEN表达随肿瘤分化程度的降低、临床分期提高而降低(P< 0.05),TGF-β1的表达与肿瘤分化程度、临床分期有关(P< 0.05);PTEN与TGF-β1的表达呈负相关.结论 PTEN表达降低和TGF-β1表达升高可能与大肠癌的发生发展密切相关,且可能与大肠癌生物学行为及预后有关.     

HBV感染对肝癌组织MMP-2和PTEN表达的影响

目的探讨肝癌组织MMP-2(基质金属蛋白酶-2)和PTEN(张力蛋白和辅助蛋白同源、第10号染色体丢失的磷酸酶基因)蛋白表达与临床病理参数的关系以及HBV感染对两者表达的影响。方法用免疫组织化学(S-P)链霉菌抗生物素过氧化物酶法检测21例肝癌组织和10例癌旁组织MMP-2和PTEN蛋白表达。结果MMP-2在肝癌组织阳性表达率为69.0%,明显高于癌旁组织的40.0%(P<0.05),在高中分化和低分化组分别为31.6%和50.0%(P>0.05),门脉癌栓转移和未转移组分别为100%和21.1%(P<0.01)。在血清HBsAg阳性和阴性组MMP-2表达阳性率分别为66.7%和33.3%(P<0.05);PTEN蛋白在肝癌组织表达缺失率为32.5%,明显高于癌旁组织的10.0%(P<0.05),在高中分化和低分化组缺失率分别为47.4%和50.0%(P>0.05),门脉癌栓转移与未转移组分别为50.0%和26.3%(P<0.05),在血清HBsAg阳性和阴性组PTEN表达缺失率分别为11.1%和0(P>0.05)。结论HBV感染对肝癌细胞基质金属蛋白酶的分泌起上调作用,有利于癌细胞的浸润和转移;HBV感染能使PTEN蛋白表达缺失增加。     

FZD10在骨肉瘤组织中的表达及临床意义

目的：探讨骨肉瘤组织中FZD10的表达及其临床意义。方法：用S-P免疫组织化学染色法对69例骨肉瘤及35例骨软骨瘤中FZD10蛋白的表达进行检测,并对其与骨肉瘤临床病理及预后的关系进行统计学分析。结果：FZD10在骨肉瘤和骨软骨瘤组织中阳性表达率分别为89.9%和5.7%,P〈0.01。FZD10蛋白表达与Enneking分期和Price分级呈正相关,与WHO分型和预后相关。结论：骨肉瘤FZD10蛋白的表达与肿瘤恶性程度密切相关,对骨肉瘤诊断和预后评估具有重要价值。     

FZD10 在骨肉瘤组织中的表达及临床意义

目的:探讨骨肉瘤组织中FZD10的表达及其临床意义。方法:用S-P免疫组织化学染色法对69例骨肉瘤及35例骨软骨瘤中FZD10蛋白的表达进行检测,并对其与骨肉瘤临床病理及预后的关系进行统计学分析。结果:FZD10在骨肉瘤和骨软骨瘤组织中阳性表达率分别为89.9%和5.7%,P<0.01。FZD10蛋白表达与Enneking分期和Price分级呈正相关,与WHO分型和预后相关。结论:骨肉瘤FZD10蛋白的表达与肿瘤恶性程度密切相关,对骨肉瘤诊断和预后评估具有重要价值。     

明胶酶及肿瘤抑制基因pten在喉鳞状细胞癌中表达的研究

目的探讨喉鳞癌中明胶酶MMP-2、MMP-9及肿瘤抑制基因PTEN的表达及其相关性.方法应用S-P免疫组化法检测68例喉鳞癌、9例异型增生及15例正常喉粘膜的MMP-2、MMP-9及PTEN蛋白表达.结果(1)MMP-2、MMP-9阳性表达率:喉鳞癌中分别为73.53%、79.41%,均显著高于异型增生表达率(44.44%、22.22%)及正常喉粘膜表达率(13.33%、20.00%),P<0.05;伴淋巴结转移的喉鳞癌组分别为96.88%、100%,显著高于未转移组52.78%、61.11%,P<0.01.T3-T4期MMP-9的表达(100%)高于T1-T2期(53.33%),P<0.01.(2)PTEN在异型增生喉上皮中高表达率66.67%,显著高于正常喉上皮(13.33%)P<0.01,喉鳞癌中高表达率44.12%,阴性表达率为22.06%,总异常率(66.17%)与正常组(13.33%)间差异显著,P<0.05.PTEN高表达率在伴淋巴结转移组(25.00%)低于未转移组(61.11%),P<0.05;与组织学分级负相关(P<0.01).(4)喉鳞癌中MMP-2与MMP-9表达间呈正相关,二者分别与PTEN表达呈负相关.结论MMP-2、MMP-9表达增强及PTEN表达减弱对喉鳞癌的浸润转移起促进作用且相互协同,是喉鳞癌侵袭的重要标志物,其中PTEN异常是一早期事件.     

骨肉瘤中CD133和ALDH1免疫组织化学表达和血管生成增加

目的检测肿瘤干细胞标记物CD133和ALDH1在骨肉瘤(osteosarcoma,OS)中的免疫组织化学表达及其与微血管密度(microvessel density,MVD)的关系,并分析它们与骨肉瘤患者临床病理参数之间的关系。方法通过免疫组织化学Elivision~(TM)plus法检测100例人骨肉瘤标本和20例骨软骨瘤标本(作为对照组)中CD133、ALDH1和CD34蛋白(微血管标志物)的表达。结果在OS组织中CD133和ALDH1的免疫组织化学染色阳性率明显高于骨软骨瘤组织。CD133和ALDH1的阳性表达率与OS患者术后局部复发与否、肺部转移与否、Enneking分期高低均呈正相关;与OS患者的性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤大小及组织学类型等无关。MVD计数与OS患者术后局部复发与否、肺部转移与否及Enneking分期均呈正相关。Spearman相关分析发现,CD133和ALDH1的阳性率及MVD计数之间均呈正相关。结论 CD133和ALDH1的表达升高参与OS的浸润、局部复发与转移过程,并可能促进OS组织中的血管生成。     

干扰素诱导的跨膜蛋白1在宫颈鳞癌中的表达及其生物学作用

目的:探讨干扰素诱导的跨膜蛋白1(IFITM1)在宫颈鳞癌中的表达及其生物学作用。方法:通过免疫组化、RT-PCR和Western blot检测宫颈鳞癌组织和癌旁组织中IFITM1的表达。使用靶向IFITM1的si RNA(si-IFITM1组)和高表达IFITM1基因的重组pcDNA3.1质粒(pcDNA3.1-si-IFITM1组)转染Si Ha细胞下调或上调IFITM1的表达。通过伤口愈合实验、Transwells迁移实验和基质胶侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力。细胞计数试剂盒-8 (CCK-8)检测细胞增殖;流式细胞术测定细胞凋亡。Western blot检测PTEN、PI3K和AKT的表达。通过对BALB/c Nude裸鼠接种Si Ha细胞来考察IFITM1在体外对肿瘤生长的影响。结果:癌组织中IFITM1的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05)。与对照组比较,si-IFITM1组的迁移和侵袭能力明显增强,而pcDNA3.1-si-IFITM1组明显降低(P<0.05)。细胞转染48 h和72 h后,与对照组比较,si-IFITM1组的细胞增殖明显增强,而pcDNA3.1-si-IFITM1组明显减弱(P<0.05)。与对照组比较,si-IFITM1组的细胞凋亡率明显降低,而pcDNA3.1-si-IFITM1组明显升高(P<0.05)。与对照组比较,si-IFITM1组的PTEN被下调,而PI3K和AKT被上调(P<0.05);pcDNA3.1-si-IFITM1组的PTEN的被上调,而PI3K和AKT被下调(P<0.05)。与对照组比较,si-IFITM1组裸鼠的肿瘤体积显著增大,而pcDNA3.1-si-IFITM1组显著减小(P<0.05)。结论:IFITM1过表达抑制人宫颈鳞癌细胞Si Ha的生长和转移能力,并在体外抑制肿瘤的形成,从而发挥抗癌作用。IFITM1可能通过调控PTEN/PI3K/AKT信号通路发挥抗癌作用。     

基因MMP-2、PTEN和Fn的表达与胃癌临床病理因素的关系

为了探讨基因MMP-2、PTEN和FN与胃癌临床病理因素的关系,采用免疫组织化学方法,检测了56例胃癌中MMP-2、PTEN和Fn的表达.结果表明:MMP-2、PTEN的阳性表达和Fn的异常表达分别为58.9%、55.4%和60.7%.低分化癌中MMP-2的表达和Fn的异常高于高分化癌(P<0.05).MMP-2的表达和Fn的异常与胃癌浸润深度、淋巴结转移正相关(P<0.05),PTEN的表达与淋巴结转移负相反(P<0.05).MMP-2和PTEN的表达呈负相关(P<0.05),MMP-2表达和Fn的异常呈正相关(P<0.01),PTEN表达与Fn异常之间无明显相关性(P>0.5).通过该研究发现,检测胃癌组织中MMP-2、PTEN和Fn的表达,有助于了解胃癌的发展和评估胃癌患者的预后.     

过表达MicroRNA-21通过PTEN/PI3K/AKT信号通路调控人退变髓核细胞自噬的研究

目的:探讨过表达mi R-21通过PTEN/PI3K/AKT通路对人退变髓核细胞自噬的影响。方法:构建稳定过表达mi R-21 mimic人退变髓核细胞,转染无意义序列作为mi R-21 mimic control组,采用RT-qPCR检测转染效率;利用MDC荧光染色法观察细胞自噬泡;Western-Blot检测细胞自噬相关蛋白LC3和P62的表达以及PTEN/PI3K/AKT信号通路中关键蛋白PTEN、PI3K及AKT的表达水平。结果:RT-qPCR结果表明mi R-21 mimic转染成功且效率较高,与mi R-21 mimic control组及空白细胞对照组相比,差异显著(P0.05)。荧光显微镜观察MDC染色情况,mi R-21 mimic组的细胞中几乎没有发现自噬体,而mi R-21 mimic control组以及空白对照组细胞中自噬体均较多,与前者相比差异均明显,具有统计学意义(P0.05)。mi R-21 mimic组细胞中LC3-II/LC3-I表达量的比值均显著低于mi R-21 mimic control组及空白对照组细胞(P0.05);而P62在mi R-21 mimic组细胞中表达量显著高于mi R-21 mimic control组及空白细胞对照组,具有统计学意义(P0.05)。mi R-21 mimic组中PTEN蛋白的表达水平较低,与另外两组相比具有统计学意义(P0.05);磷酸化的PI3K(p-PI3K)和AKT(p-Akt)在mi R-21 mimic组中均明显高于mi R-21 mimic control组和空白细胞对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:mi R-21可以通过靶向沉默PTEN,促进PI3K和AKT发生磷酸化,进而使PTEN/PI3K/AKT信号通路被激活,最终抑制人椎间盘退变髓核细胞的自噬。     

VEGF和PCNA在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)和增殖细胞核抗原(PCNA)在骨肉瘤组织中的表达及其与微血管密度(MVD)、预后的关系。方法:用免疫组织化学法检测64例骨肉瘤组织中VEGF、PCNA的表达和MVD。结果:VEGF阳性表达主要在胞浆,PCNA的阳性表达主要在胞核。VEGF、PCNA表达与MVD存在显著关联(P<0.05),与骨肉瘤转移和5年生存率有显著关联性(P<0.05)。VEGF表达与PCNA表达密切相关(P<0.05)。结论:VEGF和PCNA指标可作为判断骨肉瘤预后的重要指标。     

抑癌基因PTEN 在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义*

目的:通过免疫组织化学方法检测PTEN基因在正常甲状腺组织、甲状腺良性肿瘤组织、甲状腺乳头状癌癌组织中的表达水平并进行比较,探讨其对甲状腺乳头状癌诊断和治疗的意义。方法:采用SP免疫组化方法,用已知阳性组织做阳性对照,以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗做阴性对照,分别作HE染色和免疫组织化学染色。结果:PTEN蛋白在三组组织中的表达差异具有显著性(P<0.001);正常甲状腺组织、甲状腺良性肿瘤组织中的阳性率分别为100%和82.5%,均显著高于甲状腺癌组织中的45%(P<0.05),即PTEN在甲状腺癌中表达显著降低;PTEN在甲状腺乳头状癌淋巴结转移组和无淋巴结转移组阳性表达率分别为15%和60%,差异有显著性(x2=10.91,P=0.001);PTEN在甲状腺乳头状癌在包膜侵犯组和无侵犯组的阳性表达率分别为25.93%和60.61%,差异有显著性(x2=7.22,P=0.007);PTEN在甲状腺癌淋巴结转移组和包膜侵犯组的阳性表达强度显著低于无淋巴结转移和包膜侵犯组(P<0.01),有统计学意义。结论:PTEN基因表达的降低在甲状腺癌的发生和转移过程中起重要作用。     

microRNA-21在食管癌细胞增殖、迁移和凋亡中的作用

本研究检测了40例食管癌组织和40例癌旁组织中的miR-21、PTEN、PI3K和AKT表达,并通过转染miR-21抑制剂来敲低人食管癌细胞系EC9706的miR-21表达,考察了miR-21对食管癌细胞生长的影响。研究发现,食管癌组织中PTEN蛋白的阳性染色评分低于癌旁组织(p<0.05),而PI3K和AKT蛋白的阳性染色评分高于癌旁组织(p<0.05)。miR-21在人食管癌组织中被上调(3.56 vs 1.21,p<0.05)。转染miR-21抑制剂导致PTEN蛋白表达升高,而PI3K和AKT蛋白表达降低(p<0.05)。转染miR-21抑制剂抑制了EC9706细胞的增殖和迁移,但促进了细胞凋亡(p<0.05)。miR-21的上调可通过激活PTEN/PI3K/AKT信号通路来促进食道癌细胞的增殖和迁移,并抑制细胞凋亡。     

miR‐10b expression in breast cancer stem cells supports self‐renewal through negative PTEN regulation and sustained AKT activation

Cancer stem cells (CSCs) are linked to metastasis. Moreover, a discrete group of miRNAs (metastamiRs) has been shown to promote metastasis. Accordingly, we propose that miRNAs that function as metastatic promoters may influence the CSC phenotype. To study this issue, we compared the expression of 353 miRNAs in CSCs enriched from breast cancer cell lines using qRT–PCR analysis. One of the most altered miRNAs was miR‐10b, which is a reported promoter of metastasis and migration. Stable overexpression of miR‐10b in MCF‐7 cells (miR‐10b‐OE cells) promoted higher self‐renewal and expression of stemness and epithelial–mesenchymal transition (EMT) markers. In agreement with these results, inhibiting miR‐10b expression using synthetic antisense RNAs resulted in a decrease in CSCs self‐renewal. Bioinformatics analyses identified several potential miR‐10b mRNA targets, including phosphatase and tensin homolog (PTEN), a key regulator of the PI3K/AKT pathway involved in metastasis, cell survival, and self‐renewal. The targeting of PTEN by miR‐10b was confirmed using a luciferase reporter, qRT–PCR, and Western blot analyses. Lower PTEN levels were observed in CSCs, and miR‐10b depletion not only increased PTEN mRNA and protein expression but also decreased the activity of AKT, a downstream PTEN target kinase. Correspondingly, PTEN knockdown increased stem cell markers, whereas AKT inhibitors compromised the self‐renewal ability of CSCs and breast cancer cell lines overexpressing miR‐10b. In conclusion, miR‐10b regulates the self‐renewal of the breast CSC phenotype by inhibiting PTEN and maintaining AKT pathway activation.     

骨肉瘤中P53及P21WAF1表达的生物学意义

应用免疫组化SP法观察34例骨肉瘤中P53及P21WAF1的表达情况,探讨P53及P21WAF1表达与骨肉瘸临床病理学特征之间的关系,分析P53和P21WAF1在骨肉瘤中的作用及其相关性。结果可见,在34例骨肉瘤中,18例表达P53,阳性表达率52.94%;12例表达P21WAF1,阳性表达率35.29%。P53阳性表达与性别、肿瘤分化及是否转移复发有关(P<0.05),P21WAF1与肿瘤分化有关(P<0.01)。P53在中、低分化骨肉瘤中阳性表达率较高,而在高分化骨肉瘤中阳性表达率较低(70%、28.57%);P21WAF1在高分化骨肉瘤中阳性表达率较高,而在中、低分化骨肉瘤阳性表达率较低(85.71%、0%)。P53及P21WAF1表达呈负相关性(r=-0.537,P=0.001)。在骨肉瘤组织中P53表达上调及P21WAF1表达下调与骨肉瘤的恶性进展有关。