CXCR4在脊索瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨脊索瘤组织中CXCR4的表达情况,并分析其在脊索瘤侵袭和复发中的作用及临床意义.方法:应用免疫组织化学方法检测42例脊索瘤及16例骨样骨瘤患者标本中CXCR4的表达,并分析其与侵袭复发的关系.结果:脊索瘤组织中CXCR4的阳性表达率为80％(34/42),而在骨样骨瘤中的表达率为12.5％(2/16),两者比较有显著差异(P＜0.01),在正常脊索组织中无表达.CXCR4的表达与脊索瘤患者的性别、年龄无关(P＞0.05);而与脊索瘤有无复发有关(P＜0.05).结论:CXCR4可能在脊索瘤细胞侵袭、复发的过程中起重要作用,为进一步的研究奠定基础.     

中低温度热疗对人骨肉瘤SaoS-2细胞VEGF表达和分泌的影响

目的:探讨中低温度热疗对人骨肉瘤SaoS-2细胞株VEGF蛋白表达和分泌的影响.方法:经43℃中低温作用过后的SaoS-2细胞分别提取其全细胞蛋白和收集其培养上清,再使用Western Blot方法和ELISA方法分别检测SaoS-2细胞表达和分泌VEGF蛋白的状况.结果:43℃加热可以抑制人骨肉瘤SaoS-2细胞表达和分泌VEGF,并且其抑制效应随着加热时间的延长而逐渐增强.结论:中低温度引起的VEGF表达和分泌的降低,在中低温度热疗的抗肿瘤机制中可能发挥了一定的作用.     

兔骨髓间充质干细胞的体外分离培养和生物学特性观察

目的:探讨兔骨髓间充质干细胞体外分离、培养和鉴定方法,观察其生物学特性.方法:采集兔股骨及胫骨骨髓组织,采用密度梯度离心法结合贴壁培养法体外分离、培养和扩增兔骨髓间充质干细胞,倒置相差显微镜观察细胞形态,绘制原代、第1、3、8代细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞表面标志物,成骨和成脂肪诱导培养鉴定,观察细胞生物学特性.结果:培养的BMSCs呈纺锤形、长梭形,旋涡状排列、放射性生长,增值活跃.各代细胞生长曲线呈S型,细胞增值活跃.细胞表面标志物CD44分子阳性,CD34和CD45分子阴性.经成骨和成脂肪诱导后细胞碱性磷酸酶染色和油红O染色阳性.结论:成功建立了兔BMSCs体外分离、培养的有效方法,扩增的BMSCs仍保留多向分化潜能,是理想的组织工程种子细胞.     

WNT6基因在原发性骨肉瘤组织中的表达及其临床意义

目的:骨肉瘤是最常见的恶性骨肿瘤之一,好发于青少年,致残致死率高.因此,骨肉瘤的早期诊断、治疗及其发病原因和机制已成为现阶段骨肉瘤研究领域的主要方向之一.通过观察WNT6在骨肉瘤组织中的表达,探讨其在原发性骨肉瘤发生发展中的可能作用机制,为以WNT6为指标对原发性骨肉瘤的诊断和以WNT6为靶点进行原发性骨肉瘤生物学治疗提供理论依据.方法:收集70例原发性骨肉瘤、28例骨样骨瘤和25例骨软骨瘤标本的存档蜡块,应用SP免疫组织化学染色法检测组织中WNT6蛋白的表达情况,并应用统计学处理数据分析其与骨肉瘤临床病理参数及预后的关系.结果:WNT6在原发性骨肉瘤、骨样骨瘤和骨软骨瘤组织中的阳性表达率分别为90.00 ％(63/70)、14.29 ％(4/28)和12.00 ％(3/25).骨样骨瘤组织WNT6阳性表达率与骨软骨瘤组织相比差异无统计学意义(P＞0.05);原发性骨肉瘤组织WNT6阳性表达率明显高于骨样骨瘤组织和骨软骨瘤组织,差异均有统计学意义(均P＜0.05).WNT6在骨肉瘤组织中的表达与Enneking分期、肺转移和预后呈正相关关系.结论:WNT6在原发性骨肉瘤中的表达明显上调,WNT6表达与骨肉瘤的Enneking分期、年龄、肺转移等相关,同时WNT6高表达患者生存率降低,对骨肉瘤的诊断和预后评估具有重要价值,并在临床可能成为一个诊断原发性骨肉瘤的检测指标,为骨肉瘤的生物学治疗提供新的靶点.     

FZD10在骨肉瘤组织中的表达及临床意义

目的：探讨骨肉瘤组织中FZD10的表达及其临床意义。方法：用S-P免疫组织化学染色法对69例骨肉瘤及35例骨软骨瘤中FZD10蛋白的表达进行检测,并对其与骨肉瘤临床病理及预后的关系进行统计学分析。结果：FZD10在骨肉瘤和骨软骨瘤组织中阳性表达率分别为89.9%和5.7%,P〈0.01。FZD10蛋白表达与Enneking分期和Price分级呈正相关,与WHO分型和预后相关。结论：骨肉瘤FZD10蛋白的表达与肿瘤恶性程度密切相关,对骨肉瘤诊断和预后评估具有重要价值。     

膝关节限位矫形器对膝关节韧带损伤术后的康复作用

目的:观察膝关节限位矫形器在膝关节韧带损伤术后康复中的作用.方法:对52例膝关节韧带损伤患者应用膝关节限位矫形器辅助康复训练,进行康复评估.结果:52例患者配戴膝关节限位矫形器后均未发生严重并发症,术后随访10～24个月,平均(15.25±3.76)个月,Lysholm膝关节功能评分为78～93分,平均(81.23±5.82)分.国际膝关节文件编制委员会(IKDC)综合评定由术前显著异常(D级)26膝,改进为随访时正常(A级)8膝、接近正常(B级)14膝、异常(C级)4膝.结论:膝关节韧带损伤患者术后配戴膝关节限位矫形器对膝关节活动度、稳定性和整体功能康复均具有明显促进作用.     

白介素1受体拮抗剂及转化生长因子β1对兔膝关节骨性关节炎（OA）的治疗研究

目的：通过关节腔内注射白介素l受体拮抗剂（IL-1Ra）及转化生长因子β1（TGF]B1）,观察其对骨性关节炎的治疗作用。方法：16只3-4个月龄新西兰大白兔（雌雄不限）随机分为四组,每组四只,分为正常组,对照组,IL1-Ra组,TGF-β组,正常组仅打开左膝关节关节腔,剩余三组均给予左膝关节前交叉韧带离断术（anterior cruciate ligament transaction ACLT）。四周后IL-1Ra组给予关节腔内注射IL-1Ra5g／ml,TGF-β1组给予关节腔内注射TGF-β150mg／ml,每周两次,连续四周,正常组及对照组未采取任何措施。术后八周时采用空气栓塞法处死全部实验动物,取股骨远端长约1cm,固定后切片行细胞形态学观察。结果：大体肉眼观察：对照组股骨远端软骨面色颜色变暗并稍显粗糙,可见少量软骨脱落,其余两组关节软骨大体形态均接近正常。镜下观察：TGF-β1组软骨细胞增生明显,软骨细胞排列较正常软骨细胞排列轻度紊乱。IL—1Ra组软骨细胞增生数量未及TGF-β1组明显,软骨细胞排列也不及TGF-β1组规则。IL-1Ra组及TGF-β1组软骨细胞形态接近正常软骨细胞,基质染色接近正常。两组软骨膜表面光滑,无纤维细胞形成,软骨膜下未见纤维化。对照纽软骨细胞数量明显减少且排列紊乱,软骨细胞形态发生改变,可见软骨细胞凋亡,镜下可见软骨细胞核浓缩、裂解,并可见新生软骨形成,突出于正常软骨膜表面,软骨膜表面下方可见血管翳及纤维母细胞形成,出现轻度纤维化。基质染色不均匀且染色较淡。结论：IL-1Ra及TGF-β1关节腔内注射均能有效抑制骨性关节炎关节软骨的退变并增加软骨细胞再生,促进软骨基质合成,延缓骨性关节炎的发病进程.     

CSE1L在绝经后女性骨关节炎滑膜细胞中的作用探究

目的:探讨CSE1L在绝经后女性骨关节炎滑膜细胞中的表达及其作用和机制。方法:通过RT-PCR、Western blot以及免疫组化的实验方法检测和比较CSE1L在绝经后女性骨关节炎和创伤截肢患者关节滑膜细胞中的表达,不同浓度TNF-α或TNF-α抗体处理的关节炎滑膜细胞中CSE1L的表达;采用si RNA干预其骨关节炎滑膜细胞中CSE1L的表达后,通过RT-PCR、ELISA以及Western blot检测其TNF-α的表达和分泌情况。结果:RT-PCR以及Western blot结果均提示绝经后女性骨关节炎滑膜细胞中CSE1L的表达较创伤截肢患者关节滑膜细胞显著增高(P0.01,P0.001)。对CSE1L进行si RNA干预降低其表达水平后,CSE1L表现出与TNF-α浓度呈正相关的变化趋势;此外,在对CSE1L进行敲减以降低其表达水平后,绝经后女性骨关节炎滑膜细胞中TNF-α的表达水平变化提示其受到CSE1L调节。结论:CSE1L可能通过调节TNF-α的表达促进绝经后女性骨关节炎的发展。     

不同场强下IRE的肿瘤消融作用及对抗肿瘤免疫的影响

目的:探讨不同电场强度的不可逆电穿孔(IRE)对于肿瘤的消融效果以及其所引起的肿瘤免疫反应。方法:将B16黑色素瘤细胞接种于C57小鼠,制作黑色素瘤小鼠模型,应用不可逆电穿孔仪对肿瘤进行消融,通过测量肿瘤生长大小研究不同场强下的消融效果。通过CD4、CD8a免疫组化染色初步了解不同场强激发的免疫反应的强弱,从而选择最佳消融参数。结果:随着电场强度增加,肿瘤消融效果逐渐趋于理想,然而平板电极夹之间过高电场引发的热效应则不利于后续抗肿瘤免疫反应的激活。选择合适的电场,通过增加电击组数可以达到良好的治疗效果。结论:IRE对肿瘤的消融优势在于它能够很好的激活机体的抗肿瘤免疫反应,因此,选择合适的电场增加电击组数可以起到很好的抗肿瘤作用,具有很好的应用前景。