鱼类染色体显带的研究 Ⅰ.鱼类染色体复制带显带的BrdU-Hoechst-Giemsa方法

本文报道显示鱼类染色体复制带的BrdU-Hoechst-Giemsa方法。采用含20％小牛血清的RPMI-1640培养液进行肾细胞培养,收获前按终浓度加入10μg/ml BrdU和2μg/ml放线菌素D,分别处理16—18小时和1.5—2小时。制片经Hoechst-33258染色,紫外灯照射,2×SSC温育和Gicmsa染色,获得了鲢鱼、鳙鱼和大鳍刺鳑鮍的染色体复制带图象,带纹清晰,结果较稳定。发现BrdU和放线菌素D有抑制鱼类染色体浓缩的作用。     

BrdU和Hoechst 33258诱导黑麦染色体臂内银染区的研究

黑麦（Secale cereale)染色体除核仁组成区,着丝粒、端粒能被AgNt)3染色体,还可用BrdU和Hoechst 33258诱导出银染区,本文还对染色体差别银染的机制作了探讨。     

BrdU和Hoechst 33258诱导黑麦染色体臂内银染区的研究

黑麦（Secale cereale)染色体除核仁组成区,着丝粒、端粒能被AgNt)3染色体,还可用BrdU和Hoechst 33258诱导出银染区,本文还对染色体差别银染的机制作了探讨。     

鱼类染色体的荧光显带研究

应用GC碱基特异性荧光染料色霉素A,辅以AT减基特异性荧光染料Hoechst33258,DAPI或喹吖因对鲤鱼,鲫鱼,大鳞副泥鳅和的有丝分裂染色体及黄鳝的有丝分裂和减数分裂染色体进行了荧光显带研究,结果发现,色霉素A3可以特异性地显示鱼类有丝分裂及减数分裂各个时期核仁组织区NORS的存在,Hoechst33258,DAPI或喹吖因则使这些区域（NORs)淡染,大鳞副泥鳞的染色体NORs 分布位置具有性别,根据实验结果,对有关鱼类染色体的荧光染色研究及其应用进行了讨论。     

温度对BrdU—标记的CH0细胞染色体形态学的影响

培养的细胞在5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)存在下,经过两个复制周期,在第二次分裂细胞染色体的一条单体中,DNA双链的胸腺嘧啶均为其同源物溴尿嘧啶所替代,而另一条染色单体只替代一股链的胸腺嘧啶,因而当用荧光染料33258 Hoechst处理,或荧光染料配合Giemsa染色,或用加热的磷酸盐溶液处理,Giemsa染     

近交系小鼠遗传质量监测新方法的建立——染色体Q—H分带技术及其应用

本研究利用最新的Quinacrine Mustard and 33258 Hoechst(Q—H)复合荧光染色技术对10个品系的近交系小鼠的核型进行分析。在同一细胞内,按各号染色体着丝粒带大小排列、分组,建立该10个品系近交系小鼠特有的染色体着丝粒带核型,作为各品系小鼠遗传质量监测的染色体标记指标。本研究还对615小鼠品系的生化标汜检测与染色体标记检测的结果进行比较,同时比较了不同来源615小鼠的染色体标记,从而进一步阐明了该方法作为实验动物遗传监测方法之一与其他方法间的互补性及其自身特点。     

小鼠富集着丝粒DNA在小鼠减数分裂粗线期染色体上的原位杂交

本工作用Hoechst 33258及着丝粒特异抗体间接免疫荧光法显示的小鼠粗线期染色体主缢痕区,与以小鼠富集着丝粒(SFA)DNA为探针在粗线期染色体上的原位杂交主缢痕区作了比较。发现SFA DNA探针不仅杂交于全部常染色体联会复合体上的着丝粒区,并且杂交于着丝粒周围的异染色质区;而且,也杂交于X,Y染色体的着丝粒区。由此结论:此富集SFA DNA中含有全套常染色体及X,Y染色体的SFA DNA。     

用改良的姐妹染色单体分化染色法对白鲢肾细胞增殖动力学和化学药品诱发姐妹染色单体交换频率的初步研究

自Latt首先使用Hoechst 33258对5-溴脱氧尿苷(BrdU)掺入的人淋巴细胞姐妹染色单体分化染色(SCD)以来,一些SCD永久制片法已陆续有报道。我们采用一种改良的SCD法,即硫堇-UV-Giemsa法,对离体短期培养的白鲢(Hypophthalmichthys molitrix)肾细胞增殖动力学和丝裂霉素C(MMC)、敌枯双(N,N-甲撑-双:2-氨基-1,3,4-噻二唑)在白     

家猪(Sus scrofa domestica)体细胞染色体的研究

家猪体细胞染色体(2n=38)已有报道。近年来应用染色体分带技术对家猪染色体作了进一步鉴定。但由于方法不同和缺乏统一标准,其结果不完全一致。对于我国家猪品种染色体的研究,目前尚少报道。我们以四川的内江猪、荣昌猪、柳加猪和成华猪为对象,用外周血淋巴细胞培养方法制备染色体,用Giemsa常规染色,G-分带和C-分带染色,对这些家猪的染色体组型,G-分带和C-分带作了详细的分析。     

食用真菌核荧光染色技术的研究

本文报道荧光染料双苯并咪唑Hoechst 33258(bisbenzimlde),应用于香菇(Lentinusedodes)、平菇(pleurotus ostreatus)、金针菇 (Flammulina velutipes)、木耳(vAurtculariaaurieula),毛木耳(A．Polytricha)等5种食用菌菌丝体。担孢子、分生孢子核的荧光染色研究。配制染液的Mcllvaine缓冲液pH值、缓冲液含0.6M MgSO₄·7H₂O、菌丝生长期、孢予贮存期亦与染色效果密切相关。我们观察到,使用插片法,爬片2／5的菌丝体,pH7.0一7.4 Hoechst 33258染液,染色3分钟为菌丝体核荧光染色的最佳效果。新鲜的担孢子,分生孢子、使用pH 6.8含0.6 M MgSO₄·7 H₂O Hoechst 33258染色液染色3分钟比使用pH 6.8 Hoechst 33258的染液有明显增效作用。     

尼罗尖吻鲈和鳜鱼染色体组型分析及比较

采用PHA、秋水仙碱腹腔或背部肌肉注射,活体培养法,以前肾为材料,低渗-空气干燥法制片,进行染色体观察,运用Micromeasure version 3.3染色体分析软件和Photoshop 7.0软件首次分析了尼罗尖吻鲈的染色体数目和核型,并同鳜鱼染色体数目和核型进行了分析比较,对今后拟采取的杂交尝试提供理论基础。结果显示：尼罗尖吻鲈染色体众数为2n=48,核型公式为2m+4sm+12st+30t,染色体臂数（NF）为54;鳜鱼染色体众数为2n=48,核型公式为6sm+12st+30t,染色体臂数（NF）亦为54;两种鱼染色体短臂上均无随体,单臂染色体较多。分析表明尼罗尖吻鲈与鳜鱼杂交成功的可能性较大。     

三倍体草鲂杂种及其双亲的细胞遗传学研究

用空气干燥法制片,Giemsa染色,检查草鱼、三角鲂及其杂交一代(简称草鲂杂种)的肾细胞染色体。双亲的二倍染色体均为48,草鲂杂种的染色体数目为72。草鱼染色体组型:20M+20SM+8ST;三角鲂染色体组型:18M+22SM+8ST,其亚中部着丝点染色体中有一对大型特征性标志染色体。根据比较双亲和草鲂杂种染色体组型特征,证实草鲂杂种是三倍体,组型为29M+31SM+12ST。其中草鱼提供了两份染色体,三角鲂提供了一份染色体。推测草鲂杂种染色体加倍原因是受精过程中卵子核内有丝分裂或第二极体的保留。       

A new method for fish chromosome preparation

A new method for the preparation of fish chromosomes from abdominal cavity fluid has been developed. Cells were collected from fish abdominal cavity fluid after an in vivo PHA treatment, and cultured for a short time in medium with colchicine. After 30 min hypotonic treatment for marine fish and 35 min for freshwater fish, slides were prepared by the conventional air-drying method. The advantages ofthe method are: (1) it is technically simple; (2) it produces a reasonably high mitotic index; (3) chromosome spreading is good (4) there is very little cell breakage. Using this method, the chromosomes ofrainbow trout (2n=62); cod (2n=4546) and plaice (2n=46,47 and 48) were investigated.     

THE KARYOTYPES OF DIPLOID CESPITOSE ZINNIAS: A METHOD AND ANALYSIS

The karyotypes of the three diploid (n = 10) species of the subg. Diplothrix (Zinnia—Compositae) were compared to determine whether there were any demonstrable differences which could then be sought in their polyploid derivatives. Because many of the chromosomes in a set were too similar to distinguish confidently between them, a method of analysis was developed which measures the similarity of whole sets of chromosomes rather than individual ones. The method consists of measuring the distances between graph-plotted vertices representing arm lengths of chromosomes of real or paper hybrids and then comparing these distances by means of U tests with those similarly derived for the “parents.” This procedure obviates the need of attempting to identify morphologues (morphologically similar chromosomes) in a somatic diploid root-tip cell and to equate corresponding pairs of chromosomes from different cells of a single plant or from different species or hybrids. No demonstrable differences in the karyotypes of diploid cespitose zinnias were found. Analysis of previously published data by this method indicated that there has been a general non-objectivity and non-operationalism in the determination of homologous chromosomes, and a general but unwarranted assumption that morphologues are in reality genologues (genetically corresponding chromosomes).     

同步化技术在草鱼染色体显带中的应用及草鱼核型的初步分析

对草鱼细胞进行同步化处理,并在DNA复制的早期和晚期分别掺入BrdU,制备的染色体标本置于CaCl_2溶液中温浴同时用紫外线照射,然后用Giemsa染色即可分别显示出G带和R带。标本中的部分晚前期和早中期分裂相具有高分辨染色体显带特征。用这一技术对草鱼每条染色体进行识别和分析,提出了初步的草鱼核型,发现了四对草鱼染色体具有随体。     

几种动物染色体超微结构的研究

应用表面舒展技术、原位培养表面舒展技术和临界点干燥以及空气干燥等方法制备染色体标本,用FESEM和SEM观察了CHO、IB-RS-2哺乳动物细胞以及黄鳝肾细胞和鲫鱼血淋巴细胞的染色体。看到了染色体处于不同舒展状态的染色质纤维。在染色质纤维未完全展开排列紧密时,染色体臂的染色质纤维,缠绕排列有序,垂直于染色体纵轴,螺旋盘绕形成疏密程度不同的横纹。在纤维较为松散和完全松敌的状态下,可以看见直径约为300(?)的染色质纤维从有序到不完全有序到无序,弯扭、螺旋、缠绕,有些似“辐射环”状结构。在着丝点处可清楚地看到有二条纤维平行分别通连二染色单体臂,未见有染色体膜。初步比较了鱼类和哺乳类的染色质纤维,二者基本一致,但鱼类染色质纤维排列较哺乳动物的松散,类似“辐射环”状的结构较为明显。     

热休克诱导虹鳟四倍体

虹鳟卵受精后5—9小时期间,用热休克处理,12月龄时检查,四倍体出现频率为5％。较高的温度处理可导致卵的高死亡率。2n=60的虹鳟核型中,有中部和亚中部着丝点染色体22对,近端着丝点染色体1对,端部着丝点染色体7对,总臂数NF=104。4n=120的虹鳟四倍体核型中,有22套中部和亚中部着丝点染色体,1套近端着丝点染色体,和7套端部着丝点染色体,总臂数NF=208。未发现有染色体倍性镶嵌的个体。分析比较了二倍体和四倍体两类鱼的红细胞及其核的9个度量值(DNA相对含量,细胞及核的长轴、短轴,面积和体积),为应用红细胞鉴定四倍体虹鳟提供了倍性标准。在形态、解剖和生长速度方面未发现两类鱼有什么差别。     

溜下盾螨染色体组型及其G带的研究

本文首次报道了溜下盾螨(Hypoaspis lubrica)染色体组型及其G带的研究。结果表明,溜下盾螨组型为n=7,2n=14。具有单二倍体性决定系统。常规染色下未见明显的着丝粒。G带分析显示单倍体组有28～30条带。 对溜下盾螨的组型和分带研究以及革螨染色体制片方法进行了讨论。并首次报道了一种适合于革螨染色体研究的方法——改良气干法。     

Cytogenetic techniques in fish genetics

A modification of a previously described method of fish blood lymphocyte culture is described and discussed with the results of various chromosome banding protocols as applied to fish chromosomes.