连钱草组培快繁技术研究

用连钱草无菌茎尖为外植体进行快速繁殖,分别诱导、分化、生根形成再生植株进行快速繁殖,并移栽成活。结果表明在MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L培养基上诱导丛生芽效果最佳。在MS+IBA1.0mg/l+KT1.0mg/L培养基中根的诱导率为100%。     

草麻黄植株再生体系的建立

目的:以草麻黄的子叶为材料,建立草麻黄植株再生体系.方法:采用组织培养的方法进行了愈伤组织诱导、愈伤组织分化和不定芽生根研究.结果:MS+2,4-D 2.0mg/1+6-BA 1.0mg/l为诱导子叶形成具有分化能力愈伤组织的理想培养基;MS+2,4-D 1.5mg/l+6-BA 1.5mg/l是愈伤组织的最佳继代培养基;MS+IAA 0.2mg/l+TDZ 2.0mg/l是愈伤组织不定芽分化的最佳培养基,分化率为75%;试管苗生根培养基为MS+2,4-D 1.0mg/l.结论:建立了草麻黄子叶再生系统,为开发和保护麻黄野生资源提供一定的材料来源和技术方法.     

不同外植体来源和培养条件对拟似棉植株再生的影响

对拟似棉的不同器官(叶、叶柄、茎)在离体培养中的反应以及影响植株分化的各种因素(继代培养时间、激素、光、温度)进行了研究。结果表明:茎段作为外植体效果最佳,并且愈伤组织的诱导能力与茎段切口的面积成正比。外植体的方向性,也就是指茎表皮靠着培养基,切口面暴露于空气中为愈伤组织诱导的重要条件。愈伤组织诱导的最适培养基是MS+2mg/l IAA+1mg/l KT,最佳培养条件是强光(10,000勒克斯)、高温(29±1℃)。在MS+0.1mg/l NAA+3mg/l 2ip+0.5g/l LH分化培养基上,在4,000—5,000勒克斯的光强,28℃条件下,愈伤组织分化成小苗的频率可达20％。     

玄参组织培养植株再生

材料名称:玄参(Scrphularia mingpoensis) 材料类别:幼叶、芽培养条件:愈伤组织诱导培养基为MS+NAA2(mg/l,下同)+BA0.2,及MS+2,4-D2+KT0.2,分化培养基为N_6+BA2+NAA0.2和MS+BA2+KT1+NAA0.2。生根培养基为简易培养基(1050     

胭脂碱合成酶基因在龙葵基因组中的转移

利用致瘤农杆菌的三个菌株B3/73、M3/73和pTi214感染龙葵植株诱发了畸胎瘤。由B3/73菌株诱导出的瘤组织产生的幼苗和幼茎能够在无激素的培养基上直接分化出愈伤组织和小植株;由M3/73和pTi214菌株诱导出的瘤组织块需要在含有激素5mg/1 LAA,0.5mg/l2,4-D,0.5mg/l KT的MS培养基中经过短期培养后,使其产生愈伤组织,再转移到没有激素的培养基中培养,才能分化出小植株。测定表明这些小植株都含有胭脂碱。从这些小植株诱导出的愈伤组织在固体培养基中经过一年多时间十几次继代培养,和通过二十多次液体悬浮培养,建立了较稳定的细胞系,在继代培养的愈伤组织和细胞株系中都测出了胭脂碱,说明胭脂碱合成酶基因能够整合到龙葵基因组中并可以正常表达。     

黄瓜成熟胚离体培养中的胚状体诱导和植株再生（简报）

以10个黄瓜品种为材料,取成熟胚外植体先经MS 2,4—D 1.0mg/L(单位下同) KT0.5诱导后转入MS IAA 0.1 KT0.5上分化,胚状体发生频率高并有植株再生。材料的基因型差异显著,“农大春光”分化率最高(40％)。双层培养有效地促进畸形胚状体的正常发育,5％蔗糖和1.0mg/L ABA促进胚性愈伤组织的继代增殖和胚性保持。     

秀丽野海棠叶片不定芽高频再生体系的建立

以秀丽野海棠叶片为外植体诱导愈伤组织并分化出不定芽,得到再生植株,建立了组织培养和快速繁殖体系。结果表明:培养基MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.3 mg·L^-1适用于叶片外植体愈伤组织诱导和分化,诱导率为100%,分化率为85.83%;MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+IBA 0.3 mg·L^-1适用于继代增殖培养,平均增殖系数为7.38,且不定芽较粗壮;MS+NAA 0.5mg·L^-1+活性炭1 g·L^-1适用于生根培养,生根率达到100%;将生长良好的无菌植株进行移栽驯化,存活率达到90%。     

激素对洋桔梗植株再生的影响及生根培养的研究

以MS为基本培养基 ,附加不同浓度的 6 BA、KT、NAA和IBA诱导洋桔梗叶片外植体的再生植株。结果表明 :MS +6 BA 0 .5～ 1 .0mg/L(单位下同 ) +NAA 0 .2和MS +6 BA 0 .5～ 1 .0 +IBA 0 .2培养基都能诱导外植体产生愈伤组织 ,但 6 BA的浓度必须小于 1 .0mg/L ,否则会导致组织的严重玻璃化 ;MS +KT 1 .0～2 .0 +NAA 0 .2或MS +KT 1 .0～ 2 .0 +IBA 0 .2培养基也能诱导外植体产生愈伤组织 ,愈伤组织出现的时间较早且质地较好 ,适合分化。继代培养时 ,MS培养基中仅加 6 BA 0 .5mg/L或KT 0 .5mg/L ,即能获得较高的分化率。生根培养研究中 ,培养液为 1 /2MS+5 0g/L糖 +IBA 2mg/L的前处理 ,生根效果较好 ,生根率接近基质生根培养的生根率。     

茼蒿叶外殖体培养中的器官发生

本工作主要研究茼蒿叶外殖体的器官发生。当叶外殖体培养在附加1—3mg/l 细胞分裂素(ZT 或 KT)和0.1—1.0mg/l 的生长素(IAA 或 NAA)的 MS 培养基中,培养后21天就形成芽。在一定的细胞分裂素(ZT 或 KT)浓度范围内,无论是在低浓度 IAA(0.1 mg/l)还是高浓度 IAA(1mg/l)情况下,芽分化频率都随着细胞分裂素浓度的增加而提高。在附加3mg/l ZT 和1mg/l IAA 培养基上,芽分化频率可达62%。虽然 BA 比 ZT 或 KT 更有效地促进芽分化,但形成的芽的生长通常不正常。当将芽切下转移到 MS 培养基上后迅速生根形成完整植株。     

小麦幼胚培养中体细胞胚发生和植株再生

小麦组织培养中的植株再生,早期认为主要是通过器官发生途径,但近年来的研究表明:大量植株再生是通过体细胞胚发生途径。我们以小麦幼胚作为外植体,在附加6mg/12,4-D,0.5mg/1 KT,300mg/1 LH 和3%蔗糖的 MS 培养基上可形成大量愈伤组织。该愈伤组织经过5个月继代培养仍保持较高的分化频率。将2,4-D 浓度从6mg/1降至2mg/1继续培养后,继代中以60%的频率产生胚性愈伤组织,如再进一步降低2,4-D 浓度至0.5mg/1时,     

铁线莲‘Gipsy Queen’组织培养与快速繁殖(简报)

以铁线莲‘Gipsy Queen’当年生嫩茎为外植体进行组织培养与快速繁殖。在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.01 mg/L+5.5 g/L卡拉胶的培养基中适合愈伤组织诱导,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+6.0 g/L卡拉胶适宜不定芽分化,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+KT 1.0 mg/L+6.5 g/L卡拉胶为最佳继代增殖培养基,1/2MS+NAA 0.2 mg/L适合生根,红土和腐殖土1∶1的基质适宜移栽,成活率达70%。     

青叶胆愈伤组织的诱导与液体继代培养

以青叶胆(Swertia mileensis)幼叶为外植体,在添加不同生长调节剂组合的MS培养基上进行愈伤组织诱导。结果表明,最有效的生长调节剂组合为IAA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L和NAA 4.0 mg/L+KT 2.0 mg/L+GA₃ 1.0 mg/L,其诱导率分别为96.6%和96.0%。使用以上两种生长调节剂组合进行愈伤组织的液体继代培养,10 d可使愈伤组织增殖率分别达257.3%和310.2%。     

滇黄芩器官发生与不同继代次数遗传稳定性的RAPD分析

本研究以滇黄芩不带腋芽茎段为外植体,采用不同配比激素的MS培养基建立了滇黄芩器官发生,植株再生体系.结果表明,茎段在MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基上培养时,愈伤组织诱导率达到100%:以相同培养基进行分化,并在MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.2 mg/L培养基上扩繁丛生芽.在1/2MS+IBA 0.2 mg/L培养基诱导生根,扦插继代.利用RAPD分析不同继代次数再生植株,所用的39条随机引物中只有1条引物带型发生变化.说明经组织培养获得的再生植株遗传稳定,可多次继代培养,为滇黄芩进一步遗传操作和扩大药材资源奠定基础.     

水稻单倍体幼穗切块的离体培养

长0.5—4厘米的水稻单倍体幼穗,剪切成1毫米左右的碎块,培养在附加2.4-D 1mg/l的N_6培养基上,切块容易被诱导生成愈伤组织。愈伤组织转移到附加NAA0.5-KT 2mg/l的培养基上培养,约30%分化出苗。由单个幼穗的全部切块平均可得30丛绿苗。幼穗切块培养在附加NAA 1 KT 2mg/l的培养基上,切块上颖花不孕稃片与内外稃之间的表皮和皮层细胞被诱导分裂并形成芽和根。通过这种直接出苗方式,每个幼穗的全部切块平均出苗12丛。由上述二种途径再生的小苗中,白化苗均低于2%。98％的再生植株仍为单倍体。用含有2%二甲基亚砜和200mg/l秋水仙碱的培养液浸泡愈伤组24小时(26℃),再生的植株中,能育二倍体植株达50%。     

植物生长调节剂对花叶开唇兰原球茎增殖和分化的影响

应用正交设计法探讨3种植物生长调节剂对花叶开唇兰原球茎增殖和分化的影响。结果表明,6-BA对原球茎增殖和分化作用显著,NAA和KT作用不显著;原球茎增殖最佳培养基为改良KC+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.2 mg/L,原球茎分化最佳培养基为改良KC+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L。     

小麦遗传转化受体系统建立的研究

选用‘小偃22’和‘宁春16’小麦品种的成熟胚和幼胚进行培养,研究不同种类的胚和培养因子对愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,幼胚和成熟胚的愈伤组织诱导率无明显差异,但较高浓度的2,4-D有利于成熟胚的诱导,而幼胚培养时2,4-D浓度的影响效果因品种而异;两种外植体分化率的高低与KT/IAA的配比均有密切关系,但高浓度的激素水平不利于成熟胚的分化;诱导培养基中低浓度的2,4-D有利于所诱导的愈伤组织的分化。同时,在诱导培养基中添加低浓度的KT能显著提高两品种成熟胚愈伤组织的分化率;各种培养基处理与品种间都存在显著的互作效应,‘小偃22’成熟胚培养的最佳培养基组合为MSD 3.0 mg/L 2,4-D和MSD 0.5 mg/LIAA 1.0 mg/L KT,幼胚培养为MSD 4.0 mg/L 2,4-D和MSD 0.5 mg/L IAA 1.0 mg/L KT;‘宁春16’成熟胚培养为MSD 4.0 mg/L 2,4-D和MSD 1.0 mg/L IAA 1.0 mg/L KT,幼胚培养时为MSD 1.0 mg/L 2,4-D和MSD 2.0 mg/L IAA 2.0 mg/L KT。     

仙客来的离体无性试管繁殖研究

利用引种仙客来的叶片、叶柄、球茎等为外植体进行组织培养与再生植株 ,筛选最适诱导和继代增殖培养基为MS +BA 2 (mg/l,下同 ) +KT 0 .2 +2 ,4 -D 0 .5。其中叶片的诱导率和繁殖系数较高 ,叶柄次之 ;生根较难 ;球茎因常内带菌而造成培养困难     

非洲菊试管苗叶柄愈伤组织的诱导与分化研究

以非洲菊(Gerbera janesonii Bolus)品种‘Sunanda'试管苗幼叶的带叶叶柄为材料,研究了培养基、外植体类型和继代次数等因素对愈伤组织诱导及分化的影响.结果表明:培养基上附加不同植物生长调节剂所诱导出的愈伤组织在形态和分化能力上存在显著差异,叶柄基部诱导愈伤组织的最适培养基是MS+TDZ 0.3 mg L-1+NAA0.1 mg L-1.外植体以叶片长度＞0.5 cm,叶片已舒展,颜色嫩绿的幼叶最佳,继代培养基以MS+KT 1.0 mg L-1较适宜,愈伤组织在分化培养基MS+6-BA 2.0 mg L-1+NAA 0.1 mg L-1上分化出芽的同时还会增殖,分化率达87.4%,继代培养2次的愈伤组织分化率可提高至95%.不定芽在生根培养基1/2MS+IBA0.6 mg L-1上的生根率达100%,试管苗移栽45 d后,成活率达97%以上.     

甘蓝型油菜子叶和下胚轴再生植株无性系建立

以甘蓝型油菜(Brassica napus L.)豫油2号和6257的子叶和下胚轴为材料,在不同激素配比的MS培养基上诱导出了愈伤组织。将经过继代的部分愈伤转入分化培养基,分化结果表明:除基因型、外植体和分化培养基的激素配比对分化率有影响外,诱导愈伤培养基的激素配比对分化率也至关重要。豫油2号的子叶和下胚轴在最适诱导培养基(ZT 1+NAA0.5+2,4-D 0.2 mg/L)和最适分化培养基(ZT4+IAA 0.2 mg/L)组合中的愈伤分化率分别为12.5%和75%;6257的子叶和下胚轴在其最适诱导培养基(KT 2+NAA1+2,4-D 0.2 mg/L)和最适分化培养基(6-BA 4+IAA 0.02 mg/L)组合中的愈伤分化率分别为50%和37.5%。将其最适诱导培养基中的愈伤组织继代达8个月以上,建立了不同继代愈伤的再生植株无性系。     

荔枝花粉植株诱导的研究

两个品种的荔枝花药,接种在MS附加KT2mg/1、2,4-D2mg/1、NAA0.5mg/1培养基上培养,经过70—90天即诱导出愈伤组织;再以MS和改良B_5附加KT0.5mg/1+NAA0.1mg/1+蜂皇浆400mg/1+LH500mg/1培养基进行分化培养,经30天左右分化出胚状体,再转入MS和改良B_5培养基附加蜂皇浆400mg/1、谷氨酰胺500mg/1、LH500mg/1进一步培养出芽;最后用1/2改良B_5或2.5倍White的大量元素附加KT0.1mg/1、IAA0.01mg/1、LH500mg/1、谷氨酰胺1600mg/1进一步分化成具有根、茎、叶器官的完整植株。目前已获得小苗24株,其中4株系具有正常根、茎、叶的完整小植株。根尖细胞压片检查结果,染色体数为2n=15,证明它们是单倍体植株。