基于全基因组数据华根霉产真菌毒素分析

【目的】在对中国传统优势浓香型白酒产业中重要功能微生物华根霉菌株CCTCCM201021全基因组测序的基础上,以生物信息学的方法和手段主要针对真菌毒素的合成代谢途径及关键基因进行分析,考察微生物在食品工业应用中的安全性。【方法】应用Illumina平台Solexa测序技术对华根霉进行基因组测序,运用SOAPdenovo组装软件进行拼接,并进行一系列生物信息分析,考察根霉素、小孢根霉素及典型丝状真菌毒素代谢的主要途径及相关基因,包括PKS、NRPS与PKS-NRPS混合代谢途径;萜类化合物代谢和其他代谢途径等,判断华根霉是否具有产真菌毒素的潜在危害性。【结果】测序结果表明华根霉全基因组大小为45.70 Mb左右,GC含量为36.99%。通过基因预测软件分析得到基因17 676个,共注释基因13 243个。通过进化树与同源基因比较分析,与目前基因组测序完成的仅有的3株接合菌基因组相比,序列相似性普遍偏低,与华根霉存在较为显著的差异,但同源基因的相似性在60%左右。代谢分析表明,华根霉中仅存在较少聚酮合成、萜类化合物合成途径代谢基因,存在大量异源物质降解途径基因。【结论】华根霉基本不具备产目前已知的真菌毒素的关键基因或合成能力,可以认为其发酵产品是相对安全的。在酿造过程中,不仅可作为糖化菌,在混菌发酵时,对部分具有抑菌能力的抗生物质具有降解功能,是发酵工业中应用的相对安全的重要生产菌。     

高产信号分子AI-2乳酸菌的筛选及其Pfs基因的克隆和表达

【目的】从锡盟地区酸马奶酒分离的乳酸菌中筛选出高产信号分子自体诱导物2(Autoinducer-2,AI-2)的乳酸菌,通过优化其重组蛋白Pfs的诱导条件体外合成信号分子AI-2。【方法】利用生物学发光法对不同乳酸菌产信号分子AI-2的产量进行比较,以高产信号分子AI-2乳酸菌基因组DNA为模板,扩增其S-腺苷高半胱氨酸核苷酶(S-adenosylhomocysteine nucleosidase,Pfs)基因,构建原核表达载体。利用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)进行重组蛋白的诱导表达,通过优化培养基、诱导温度、诱导前菌体密度、IPTG浓度以及诱导时间得到高表达的Pfs蛋白,使其与底物作用最终体外合成信号分子AI-2。【结果】10株乳酸菌均可产信号分子AI-2,其中屎肠球菌8-3分泌信号分子AI-2的产量明显高于其他菌株;重组蛋白的最佳诱导条件为:选取SOC(Super optimal broth with catabolite repression)作为诱导表达培养基,菌液OD600为0.5–0.7时加入终浓度为0.1 mmol/L的IPTG,37°C诱导12 h;利用最优诱导条件获得了浓度为4.08 g/L的纯化Pfs蛋白,体外合成了信号分子AI-2。【结论】酸马奶酒中分离出的10株乳酸菌均可产生信号分子AI-2,且屎肠球菌8-3可通过Pfs基因的作用生成信号分子AI-2。     

铁线莲‘Gipsy Queen’组织培养与快速繁殖(简报)

以铁线莲‘Gipsy Queen’当年生嫩茎为外植体进行组织培养与快速繁殖。在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.01 mg/L+5.5 g/L卡拉胶的培养基中适合愈伤组织诱导,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+6.0 g/L卡拉胶适宜不定芽分化,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+KT 1.0 mg/L+6.5 g/L卡拉胶为最佳继代增殖培养基,1/2MS+NAA 0.2 mg/L适合生根,红土和腐殖土1∶1的基质适宜移栽,成活率达70%。     

多西他赛单药与培美曲塞联合顺铂二线治疗老年晚期胃癌的疗效及对患者生活质量的影响

目的:探讨多西他赛单药与培美曲塞联合顺铂二线治疗老年晚期胃癌的疗效及对患者生活质量的影响,为临床用药提供参考。方法:选取我院2014年6月-2017年6月期间收治的120例一线化疗失败的老年晚期胃癌患者,按照随机数字表法将患者分为观察组和对照组各60例,观察组使用培美曲塞联合顺铂治疗,对照组单独使用多西他赛治疗,两组均治疗3个疗程。治疗3个疗程后,采用实体肿瘤的疗效评价标准(RECIST)对两组患者的临床疗效进行评价,参照抗癌药物常见毒副反应分级标准统计患者出现的不良反应,采用生活质量量表评价患者的生活质量,并对所有患者进行为期半年的随访,统计两组患者的生存率。结果:观察组有效率(RR)为30.00%,略高于对照组的25.00%,但两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,观察组患者日常生活、社会活动、抑郁、焦虑得分均明显高于对照组(P<0.05)。观察组患者半年生存率为71.67%,明显高于对照组的48.33%(P<0.05)。结论:相比于多西他赛单药治疗,培美曲塞联合顺铂二线治疗老年晚期胃癌能够改善患者生活质量,延长其生存期,安全可靠。     

群体感应抑制剂及其在食品保藏中的应用研究进展

细菌在生长过程中会合成并释放一种叫做信号分子的化学因子,作为细胞间或细胞内传递信息的介质。这种信号分子积累到一定水平,会对细菌生理性状的表达产生调控作用,即群体感应现象。细菌群体感应现象对食品腐败变质过程也有很大的影响。因此,研究群体感应抑制剂在食品保藏中的作用就显得尤为重要。本文中,笔者根据细菌分泌信号分子类型的不同,综述了不同细菌的群体感应抑制剂及其在食品保藏中的应用。     

ASSP在非小细胞肺癌中的表达及与预后关系

目的:研究ASPP蛋白在非小细胞肺癌中的表达情况,探讨其表达与患者预后之间的关系。方法:选取于我院就诊的86例非小细胞肺癌患者,病理学诊断癌症分型及分期,对所有患者进行随访,并用免疫组化法检测患者组织切片中ASPP2、i ASPP和p53的表达,SPSS软件分析ASPP2、i ASPP表达水平与患者预后的关系。结果:NSCLCⅢ期的患者中ASPP2阳性表达的中位生存期大于阴性患者,i ASPP阴性表达患者的中位生存期大于阳性患者(P0.05);p53野生型Ⅲ期患者ASPP2阳性表达者的中位生存期显著大于阴性表达患者,Ⅰ、Ⅲ期i ASPP阴性表达患者的中位生存期显著大于阳性表达患者义(P0.05)。p53突变型患者Ⅲ期iASPP阴性表达患者的中位生存期显著大于阳性表达患者(P0.05)。ASPP2和i ASPP蛋白的表达水平和治疗方式均为影响患者预后的因素(P0.05)。结论:ASPP2的阳性表达和i ASPP的阴性表达是NSCLC的保护因素,可在一定程度上预测患者的生存期。     

保鲜剂对晚香玉切花的保鲜效应

以晚香玉切花为材料,用蔗糖、6-BA、8-HQC和酒石酸按四因素三水平的正交设计配制保鲜液,通过测定瓶插寿命、小花开放率、鲜重、可溶性糖和电导率,研究不同保鲜剂的保鲜效果。结果表明：与对照相比,各处理均能不同程度地延缓切花衰老,其中处理9即12g.L^-1蔗糖＋60mg·L^-16-BA＋400mg·L^-18-HQC＋100mg·L^-1酒石酸效果最好,花枝瓶插寿命比对照长6d,70％的小花开放,其他指标均明显优于对照,是晚香玉切花较好的保鲜配方。