大鲵（Andrias davidianus）4种生殖器官的蛋白水解酶种类和活性分析

用蛋白水解酶活性电泳方法（G-PAGE）分析了大鲵卵巢,输卵管,精巢,输精管的蛋白水解酶种类和活性,结果表明：1）精巢和输精管的蛋白水解酶种类（分子量）相似,活性有差异。主要的蛋白水解酶分子量为240,85,73,61,51,42,37和23kD;2）输精管的蛋白水解酶在碱性条件下活性最强,在中性条件下活性次之,在酸性条件下活性最弱。精巢的蛋白水解酶在中性和碱性条件下活性相似,在酸性条件下活性很弱,推测精巢蛋白水解酶活性的最适pH为中性,输精管蛋白水解酶活性的最适pH为碱性;3）卵巢和输卵管的蛋白水解酶种类（分子量）相似,主要的蛋白水解酶分子量为73、61、51和37kD,它们在酸性条件下活性最强,在中性条件下几乎无活性,推测它们活性的最适pH为酸性;4）与卵巢和输卵管相比,精巢和输精管的蛋白水解酶种类多,活性强,活性的最适pH高,推测这种差别可能有利于受精和发育中所需的蛋白水解酶快速灭活或活化。     

大鼠肝生长发育过程中蛋白水解酶和ADAMs的变化

用SDS-PAGE、SDS-G-PAGE、Western等方法研究了大鼠肝从胚胎到成体生长发育过程中酸性,中性和碱性蛋白水解酶和ADAMs变化。结果表明：30和32kD酸性蛋白水解酶在开始吃奶和出生后第五周各出现一个活性高峰;75/80kD酸性蛋白水解酶仅在出生后第三周有活性,71和75kD的中性蛋白酶在出生后第三周活性最强：15kD碱性蛋白水解酶在开始吃奶时有活性,75kD的ADAMs在出生前至出生后第20天和出生后第四周到成体的含量呈两次正态分布;40kD的ADAM主要在胚胎肝和吃奶时检测到,但30kDADAMs主要出现在吃饲料以后各个时期,50/47、73和140kDMDC15变化和75kD的ADAM相似,30kD的MDC15仅出现在出生后15-35天的肝脏内,58kD的MDC15主要在出生后7-45天之间,实验表明,营养来源和方式能有效影响肝脏的生理生化过程,揭示营养,肝功能,生长发育的密切关系。     

小麦老化叶片蛋白水解酶的某些生化特性的研究（简报）

小麦叶片蛋白水解酶最适pH为5．0左右;最适温度：扬麦五号品种为50℃,野生一粒为45℃。碘乙酸、苯甲基磺酰氟明显抑制蛋白水解酶活力,前者大于后者;而半胱氨酸明显激活其活性。对小麦老化叶片起主要作用的是巯基类蛋白水解酶,丝氨酸蛋白酶也起一定作用。     

五种黄精属植物的蛋白水解酶谱研究

用蛋白水解酶复性电泳方法 (G- PAGE)分析了 5种黄精属植物根状茎和叶的蛋白水解酶的种类和活性。结果表明 :(1)它们的根状茎均含有 85k D和 55k D的蛋白水解酶 ;叶均含有 82 k D的蛋白水解酶 ;(2 )根状茎和叶的蛋白水解酶种类和活性有很大差异 ,叶的蛋白水解酶活性为根状茎的 10倍 ,它们的活性均受 p H影响 ,其最适 p H为 7;(3)每种植物都含有自己特有蛋白水解酶 ;(4 )蛋白水解酶在植物鉴定中有参考价值     

离子交换层析初步分离大鼠肝蛋白水解酶、ADAMs、ACP、AKP和PCNA

用DEAE 离子交换层析法分离 2 /3肝切除 ( partialhepatectomy ,PH)后恢复 4、 3 6和 14 4h的大鼠再生肝及正常肝的蛋白水解酶、ADAMs、ACP、AKP和PCNA ;用SDS PAGE、Western blot、酶复性电泳等方法 ,分析了它们在不同洗脱段中的分布及活性变化 ,为分离与肝再生有关的蛋白 (酶 )提供了资料。     

ADAMs与生长发育(英文)

ADAMs是近几年发现和鉴定的一类具有多个结构域和广泛生物学功能的细胞表面糖蛋白 ,由信号肽区、前调控区、金属蛋白水解酶区、去整合蛋白区、富半胱氨酸区、表皮生长因子区、跨膜区和胞质区组成 ,已发现 3 0多种成员。它们在性细胞发生、受精、胚胎发育、细胞融合、器官形成、细胞分化等方面起重要作用。本文重点介绍了ADAM1 0 Kuz在神经发育过程中的信号传导和蛋白水解酶作用及ADAM1 7 TACE、ADAMTS在小鼠胚胎发育过程中对眼、肾、肾上腺、生殖等器官结构、功能的作用 ;另外 ,还对ADAM1 2 meltrinα促进肌细胞融合、分化、MIG 1 7介导细胞迁移等多种ADAMs在生长发育方面的研究作了简要介绍     

粘虫幼虫肠道蛋白水解酶特性的研究

本文研究了粘虫(Mythimna separata Walker)幼虫蛋白水解原酶和粗提的幼虫肠道蛋白水解酶的一些主要生化特性.实验结果表明:幼虫肠道蛋白水解酶温培后仍然保持最大酶活的最适温度是25℃,最适pH是11,从pH和酶活关系的曲线图可知原酶在pH9和10之间有一个“峰肩”,然而粗提酶则没有. 新鲜收集的幼虫原酶在30℃下经过2小时培养后,酶的活性可以提高10%.本研究也为寻找合适的粘虫幼虫蛋白水解酶的温度处理和作用条件提供了理论依据.     

豆乳凝固醇产生菌UV—10发酵条件及其酶学性质的研究

豆乳凝固醇产生菌Bacillus sp.UV-10的最适产酶条件,初始pH6.4,温度26℃,培养时间19h,需要较大的通气量,酶的最适作用pH和温度分别为5．8和70℃,在最适条件下酶活力可达1.84u/mL,pH6.0-7.0稳定性较好,60℃下1h残余酶活60％,Ca^2 ,Fe^2 ,Mg^2 ,Na^2 对其有较强的激活作用,而Zn^2 ,Al^3 则有抑制作用。     

与番茄花柄脱落相关的多聚半乳糖醛酸酶的分离纯化和特性

为弄清番茄花柄脱落相关酶—哆聚半乳糖醛酸酶（polygalacturonase,PG）的性质,采用离体培养条件下经乙烯处理的番茄花柄,分离和纯化了多聚半乳糖醛酸酶并测定其性质。结果表明：用Sephadex G-75凝胶过滤层析和CM Sepharose CL-6B阳离子交换层析方法可分离纯化得到分子量约为30．2kDa的多聚半乳糖醛酸酶,纯化倍数为30．85;纯化的PG活性最适pH值为5．0,最适反应温度为40℃;Km值为26．14mg·mL^-1;1mmol·L^-1Ca^2＋、Cu^2＋、Ba^2＋、Co^2＋和Mn^2＋可抑制PG活性,而1mmol·L^-1的Mg^2＋、K^＋、Fe^2＋、Zn^2＋、Fe^2＋促进PG活性,20mmol·L^-1的Fe^2＋和Fe^3＋促进效果尤为显著。     

离子束介导玉米DNA影响水稻幼苗根系蛋白水解酶的表达

利用离子束介导法把玉米DNA导入水稻豫粳6号种子胚中,通过复性电泳技术,分析水稻幼苗根系中蛋白水解酶在pH4.5、pH7.0和pH8.5的表达情况.结果表明:(1)在不同pH条件下处理,各蛋白水解酶种类与活性存在差异,酸性、中性、碱性条件下,检到的蛋白水解酶酶带依次增多,酸性条件下酶活性较弱,中性和碱性条件下酶活性较强;(2)在3种pH条件下,离子束辐照处理均有部分蛋白水解酶带缺失,同时,在中性和碱性条件下检出50kD新酶带,说明离子束辐照可影响水稻蛋白水解酶表达;(3)离子束介导玉米DNA水稻幼苗根系中,pH4.5时无新蛋白水解酶酶带检出,pH7.0和pH8.5时均检到多条新酶带且活性较强.说明离子束介导玉米DNA引起水稻幼根蛋白水解酶表达发生变化.     

链霉菌Str s-2产木聚糖酶的条件及部分性质研究

通过碳氮源对链霉菌Str s-2产胞外木聚糖酶活性的影响,得出其适宜培养基为(g/L)：含半纤维素20,(NH4)2SO4 4．0,KH2PO4 1．0,MgSO4-7H2O 0．5,NaCl 0．3,CaCO3 1．0。用DNS法研究了该酶的性质结果表明其最适pH值为6．5,最适反应温度为55℃;Na^ 、K^ 、Ca^2 、Mg^2 等离子对酶有激活作用,而Zn^2 、Ag^ 、Fe^3 和Cu^2 离子则抑制酶的活性。     

大鵟消化系统蛋白水解酶种类和活性分析

采用蛋白水解酶复性电泳(G-PAGE)技术对大(Buteo hemilasius)消化系统5种器官腺胃、胰脏、十二指肠、空肠、大肠蛋白水解酶的种类和性质进行了研究,以期为研究野生鸟类的分类地位、系统演化提供基础资料,结果表明,①受pH值的影响和制约,大消化系统蛋白水解酶的活性在碱性、中性与酸性条件下递减;②在酸性条件下,45 ku蛋白水解酶存在于除腺胃外的各受检器官;③pH 7.0时,腺胃、胰脏酶谱相似,均含有683、5、342、0 ku的蛋白水解酶;④pH 8.0时,空肠和十二指肠的蛋白水解酶种类最多、活性最强,分别检出8种和7种蛋白水解酶。总之,pH值对蛋白水解酶的活性有明显的制约作用,46、41ku蛋白水解酶随着pH值的增高而失去活性,为酸性蛋白水解酶,250、2064、5 ku蛋白水解酶随着pH值的增高活性逐渐增强,为碱性蛋白水解酶。十二指肠和空肠的蛋白水解酶种类多、活性强,可能为蛋白质消化的主要场所。     

C6大白鼠神经胶质瘤细胞HSP68的修饰和降解分析

本文用蛋白水解酶复性电泳、放射自显影和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹等方法分析Ｃ６细胞ＨＳＰ６８在体内、外修饰和降解表明：（１）Ｃ６细胞的中性蛋白水解酶几乎不参与ＨＳＰ６８降解;（２）ＨＳＰ６８降解涉及到胞液ＡＴＰ结合蛋白水解酶和溶酶体酸性蛋白水解酶,其中,ＡＴＰ结合蛋白水解酶在起动ＨＳＰ６８降解和把ＨＳＰ６８降解成多肽大片段方面起重要作用,溶酶体酸性蛋白水解酶主要参与把多肽大片段彻底降解;（３）热休克诱导Ｈ     

锌转运蛋白基因研究进展

锌作为一种重要的微量元素参与了植物体内广泛的生理和生化过程,本文详细介绍了涉及Zn^2＋吸收转运的ZIP基因家族（ZRT／IRT相关蛋白）和CDF（Cation　diffusion　facilitator）家族。ZIP家族转运蛋白主要负责将Zn^2＋等二价阳离子跨膜转运进细胞内,以完成细胞内多种生理生化反应。CDF家族转运蛋白主要负责将过量Zn^2＋运出细胞,或者将细胞内过量Zn^2＋进行区室化隔离,降低Zn^2＋对细胞的危害作用。ZIP家族转运蛋白和CDF家族转运蛋白的相互协调使得Zn^2＋在细胞和有机体水平上维持着稳态,进而为细胞内各种生理生化反应的进行供一种保障机制。     

ADAMs与生长发育

ADAMs是近几年发现和鉴定的一类具有多个结构域和广泛生物学功能的细胞表面糖蛋白,由信号肽区、前调控区、金属蛋白水解酶区、去整合蛋白区、富半胱氨酸区、表皮生长因子区、跨膜区和细胞质区组成,已发现30多种成员。它们在性细胞发生、受精、胚胎发育、细胞融合、器官形成、细胞分化等方面起重要作用。本文重点介绍了ADAM10／Kuz在神经发育过程中的信号传导和蛋白水解酶作用及ADAM17／TACE、ADAMTS在小鼠胚胎发育过程中对眼、肾、肾上腺、生殖等器官结构、功能的作用;另外,还对ADAM12／meltrin α促进肥细胞融合、分化、MIG－17介导细胞迁移等多种ADAMs在生长发育方面的研究作了简要介绍。     

金鱼不同组织器官及胚胎发育不同时期蛋白水解酶的种类和活性变化

采用复性电泳方法研究了金鱼组织器官蛋白水解酶及个体发生过程中蛋白水解酶的种类和活性变化,主要结果表明：⑴金鱼各组织器官蛋白水解酶种类差异不大,大多数组织器官都具有１１３、６９、２０、１６ｋＤ四条带,但不同组织器官常具有其特异性蛋白水解酶;肠道蛋白水解酶种类最多、活性最强。⑵蛋白水解酶的活性受ｐＨ值影响和制约,大多数组织器官蛋白水解酶活性最适ｐＨ值为８．５。⑶在金鱼胚胎发育早期（从卵裂到心跳期）多数     

大蕉果皮脱镁螯合酶的纯化和某些特性初探

用盐析法从大蕉果皮中初步纯化了脱镁螯合酶（Mg—dechelatase,MDCase）,纯化程度约为3．01倍。以叶绿酸（chlorophy1lin）为底物,MDCase Km值为13．47nmol·L^-1;活性最适反应温度为50℃;在30～70℃内,活性较稳定,但在100℃下40min仍保持50％活性;在pH6．5～9,5范围内,随着pH的升高,酶活性逐渐增大。MDCase活性受还原剂β-巯基乙醇、二硫苏糖醇、抗坏血酸、Na2SO3（SO2）和还原型谷胱甘肽的抑制,而受过氧化氢激活;金属离子Cu^2＋、Zn^2＋、Fe^2＋、Ca^2＋和K^＋都在不同程度上抑制MDCase活性;不同的螯合剂效应不同,EDTA对酶活性有抑制作用,而柠檬酸却影响不大。     

大鼠肝生长发育过程中蛋白水解酶和ADAMs的变化(英文)

用SDS-PAGE、SDS-G-PAGE、Western等方法研究了大鼠肝从胚胎到成体生长发育过程中酸性、中性和碱性蛋白水解酶和ADAMs变化。结果表明:30和32kD酸性蛋白水解酶在开始吃奶和出生后第五周各出现一个活性高峰;75/80kD酸性蛋白水解酶仅在出生后第三周有活性。71和75kD的中性蛋白酶在出生后第三周活性最强;15kD碱性蛋白水解酶在开始吃奶时有活性。75kD的ADAMs在出生前至出生后第20天和出生后第四周到成体的含量呈两次正态分布;40kD的ADAM主要在胚胎肝和吃奶时检测到,但30kD ADAMs主要出现在吃饲料以后各个时期;50/47、73和140kD MDC15变化和75kD的ADAM相似,30kD的MDC15仅出现在出生后15~35天的肝脏内,58kD的MDC15主要在出生后7~45天之间。实验表明,营养来源和方式能有效影响肝脏的生理生化过程,揭示营养、肝功能、生长发育的密切关系。     

β—葡聚糖酶的分离纯化和特性研究

对里木霉所产β－葡聚糖酶粗酶液通过饱和硫酸铵沉淀、Sephadex G-100柱层析和DEAE－Sephadex A-50柱层析进行纯化,比活提高14．60倍,活力回收6．62％。酶特性研究表明,最适温度和pH分别为60℃和5．0,在pH低于5．0时酶较稳定,酶的热稳定性在60℃以下。Cu^2 、Mn^2 、Mg^2 、Fe^3 和K^ 对酶有抑制作用,Zn^2 、Ca^2 、Co^2 和Fe^2 有激活作用。     

褐藻胶裂解酶基因的克隆表达与酶学性质

随着大型褐藻生产燃料乙醇以及褐藻寡糖重大药用价值的发现,褐藻胶裂解酶成为国内外多个领域的研究重点。文中对解藻酸弧菌上与褐藻胶降解相关的5个基因分别进行克隆表达,通过SDS-PAGE和酶活性定量测定,发现该基因簇中的4个基因有降解褐藻胶活性。对酶活最高的rAlgV3进行了诱导条件的优化、酶蛋白纯化及酶性质研究,发现优化诱导条件后重组酶rAlgV3的酶活由2.34×10~4 U/L上升为1.68×10~5 U/L,比优化前提高了7.3倍;对酶性质进行表征发现该酶在4–70℃均有活性,最适反应温度为40℃,在4–20℃酶相对稳定;该酶在pH 6.5-9.0环境下均有较高的酶活,最适pH为8.0;pH稳定性好,在pH 4.5–9.5环境下可以稳定存在;适量的NaCl浓度和Fe~(2+)、Fe~(3+)等离子具有促进酶活的作用,SDS和Cu~(2+)离子可明显抑制酶活力。对该酶的底物特性的研究发现,该酶不仅可以降解褐藻胶中的Poly-M片段,也能降解Poly-G片段,具有广泛底物特性;其降解海藻酸钠主要释放二糖和三糖,是一种内切酶。该酶对于第三代燃料乙醇的发展及褐藻寡糖的生产具有重要作用。