乳酸菌对重金属污染的生物修复作用

乳酸菌具有吸附及积累重金属离子的特性,且乳酸菌对重金属污染的生物修复作用的安全性较高。本研究综述了乳酸菌修复重金属污染的机制,及乳酸菌生物修复重金属污染水体、农产品及生物体的研究现状,为重金属污染的修复提供新思路。乳酸菌作为自然环境中普遍存在的一种安全且可食用微生物,其在生物修复重金属污染方面将发挥其独有的优势。     

基于RAPD标记的南苍术居群遗传多样性分析

采用RAPD标记技术对分布于江苏小九华山、小汤山和湖山,安徽金寨和芜湖以及湖北保康和英山的7个南苍术〔Atractylodes lancea(Thunb.)DC.〕野生居群的28个单株基因组总DNA进行PCR扩增,在此基础上分析居群的遗传多样性及遗传分化,并采用聚类分析法对居群的遗传关系进行分析。结果表明:用18条RAPD引物共扩增出193条带,其中多态性条带111条,多态性条带百分率(PPB)为57.51%;平均每条引物扩增出10.72条带,其中多态性条带6.17条。从省级水平看,安徽居群的PPB、有效等位基因数(Ne)、Nei’s基因多样性指数(H)和Shannon信息指数(I)均最低,而湖北居群的Ne、H和I均最高,但江苏居群的PPB最高;从居群水平看,湖北保康居群的PPB、Ne、H和I均最高,而安徽金寨居群均最低。7个居群的基因分化系数和基因流分别为0.206 5和1.921 5,说明7个居群总遗传变异的20.65%存在于居群间、79.35%存在于居群内。7个居群间的遗传距离为0.150 7～0.252 1,其中,安徽金寨和芜湖居群间最小(0.150 7),江苏湖山和安徽芜湖居群间最大(0.252 1)。基于遗传距离的聚类分析结果表明:7个居群可分为2组,湖北保康居群单独成组,其他6个居群聚为另一组;来自同一居群的单株均聚在一起。研究结果提示:南苍术居群间的遗传多样性较低,居群间无明显的遗传分化。     

4种形态类型诸葛菜的等位酶变异及遗传多样性分析

以采自江苏省南京市4个样点的4种不同形态类型(紫花毛果、紫花光果、白花光果和白花毛果)诸葛菜〔Orychophragmus violaceus(L.)O.E.Schulz〕63个单株为研究对象,采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(SDS-PAGE)对过氧化物酶同工酶(POD)、乙醇脱氢酶(ADH)、谷氨酸脱氢酶(GDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和多酚氧化酶(PPO)酶谱进行了分析,并基于5个等位酶的酶谱分析结果对4种形态类型诸葛菜的遗传多样性进行了研究。结果表明:5个等位酶系统共包含12个位点32个等位基因,其中POD-1、POD-4、POD-5、POD-6、ADH-1、PPO-1、SOD-1和SOD-2为多态性位点;除具有共有谱带外,不同类型诸葛菜还具有各自特有的酶谱特征,其中,GDH-2的b带和c带分别是紫花类型和白花类型的特有谱带。紫花毛果、紫花光果和白花毛果类型的多态位点百分率(PPL)均为58.33%,而白花光果的PPL为66.67%;紫花毛果、紫花光果、白花光果和白花毛果每个位点的平均等位基因数分别为2.42、2.25、2.42和1.83,平均期望杂合度分别为0.35、0.30、0.38和0.29。4种形态类型诸葛菜的总基因多样度平均值为0.61,类型内基因多样度平均值为0.49,明显大于类型间基因多样度平均值(0.12);类型间的基因分化系数平均值为0.195,表明总基因多样性的80.5%来源于类型内。紫花光果和白花毛果类型间的遗传一致度最低(0.724 4)且遗传距离最大(0.322 5),而2个白花类型间的遗传一致度最高(0.954 1)且遗传距离最小(0.047 1)。研究结果显示:诸葛菜的种内变异程度很大、遗传分化程度较高,但在各类型内具有较高的遗传相似性。     

体内外因素对大鼠肝脏加工ADAMs的影响研究

ADAMs是近年发现的一个新的具有多个结构域和多种功能的蛋白质家族。本文多方面比较了大鼠实质肝细胞和非实质肝细胞的ADAMs与再生肝的ADAMs异同。检测多种因子对ADAMs体外加工的影响发现,活性的最适pH为3.5-4的酸性蛋白水解酶在细胞ADAMs降解加工中起关键作用;活性的最适pH为7.5-8.5的偏碱性蛋白酶在基质ADAMs降解加工中起重要作用;外源的胶原酶能高效降解75kDADAMs和140kDMDC15,可见,体内胶原酶样的蛋白水解酶是ADAMs降解加工的重要酶类;Fe^3 和Zn^2 等可在体外活化ADAMs的降解,看来,体内降解加工ADAMs的酶属依赖于Fe^3 或Zn^2 的蛋白水解酶。根据研究结果推测,体内许多不同性能的蛋白水解酶,如丝氨酸蛋白水解酶,半胱氨酸蛋白水解酶,天冬氨酸蛋白水解酶和金属蛋白水解酶等参与ADAMs的降解加工。     

影响SPH大鼠肝蛋白水解酶活性因素分析

用蛋白水解酶复性电泳技术分析了 4 3 6 3 6连续部分肝切除 ( 4 3 6 3 6successivepartialhepatectomy ,4 3 6 3 6SPH)中影响大鼠肝中性蛋白水解酶活性的因素。发现连续部分肝切除 (successivepartialhepatectomy ,SPH)的时间、SPH中营养条件、取材时间、制样条件和样品的后处理均可对大鼠中性蛋白水解酶活性产生不同程度的影响。     

野生种马铃薯PHYA基因cDNA的克隆与表达分析

采用RT-PCR技术从野生种马铃薯（Solanum pinnatisectum Dun）中克隆到1个光敏色素基因PHYA,其cDNA全长为3466bp,含有一个3 372bp的完整开放阅读框,编码一条长1123个氨基酸的蛋白,分子量为125kDa,等电点为5．8-该基因编码的蛋白序列与栽培种马铃薯、番茄和烟草基因编码的氧基酸序列同源性分别为96％、94％和91％。半定量RT-PCR分析表明,PHYA在根、茎和芽中的表达量较高;光对PHYA表达的作用在地上部器官中表现为抑制,而在地下部器官中则促进。     

离子交换层析初步分离大鼠肝蛋白水解酶、ADAMs、ACP、AKP和PCNA

用DEAE 离子交换层析法分离 2 /3肝切除 ( partialhepatectomy ,PH)后恢复 4、 3 6和 14 4h的大鼠再生肝及正常肝的蛋白水解酶、ADAMs、ACP、AKP和PCNA ;用SDS PAGE、Western blot、酶复性电泳等方法 ,分析了它们在不同洗脱段中的分布及活性变化 ,为分离与肝再生有关的蛋白 (酶 )提供了资料。     

基于RAPD标记的叉蕊薯蓣和粉背薯蓣不同居群遗传多样性研究

采用RAPD分子标记技术对6个叉蕊薯蓣(Dioscorea collettii Hook. f.)居群及5个粉背薯蓣[D. collettii var. hypoglauca (Palibin)C. T. Ting et al.]居群的遗传多样性进行了分析,并基于遗传相似系数采用UPGMA法对11个居群进行了聚类分析.用14个寡聚核苷酸引物共扩增出170条带,其中多态性条带161条,多态性条带百分率高达94.71%; 粉背薯蓣5个居群多态性条带百分率的变化幅度(81.25%～89.29%)略大于叉蕊薯蓣6个居群(82.00%～84.21%).粉背薯蓣居群间的有效等位基因数(Ne)、Nei's基因多样性指数(h)和Shannon多样性指数(I)分别为1.368 5、0.238 4和0.376 3,叉蕊薯蓣居群间的Ne、h和I分别为1.331 1、0.197 2和0.298 3;叉蕊薯蓣与粉背薯蓣间的基因分化系数(Gst)为0.122 8,基因流(Nm)为3.570 7.二者间的遗传相似系数为0.922 3, 遗传距离为0.080 9; 其中, 粉背薯蓣江西庐山居群和叉蕊薯蓣云南丽江居群间的遗传距离最远,达0.693 1;叉蕊薯蓣云南蒙自和云南景洪居群间的遗传距离最近,仅0.219 4.根据聚类分析结果可将参试的11个居群分成4组,其中,所有的叉蕊薯蓣居群和粉背薯蓣浙江临安居群聚成第1组,粉背薯蓣重庆南川居群和湖南衡山居群聚为第2组,粉背薯蓣湖南永顺居群和江西庐山居群则各自独立成组.研究结果证明,叉蕊薯蓣和粉背薯蓣这2个类群之间为原变种和变种的关系,并存在着变种水平上的分化不完全.     

基于3个DNA序列的不同形态类型诸葛菜的遗传关系分析及后代性状观察

选择4种形态类型(花紫色-果实光滑、花紫色-果实密生毛、花白色-果实光滑和花白色-果实密生毛)诸葛菜[Orychophragmus violaceus (L. ) O. E. Schulz]共11个单株为实验材料,在进行ITS、trnL-F和psbA-trnH序列分析的基础上,采用邻接法(NJ)构建系统发育树,并对各形态类型的后代性状进行观察和分析.结果表明,诸葛菜的ITS、trnL-F和psbA-trnH序列长度分别为704、767和216 bp,合并序列长度为1 687 bp,G+C含量为43.5%;共有7个变异位点和7个信息位点,变异率0.41%.4个形态类型诸葛菜的trnL-F序列完全一致,ITS和psbA-trnH序列略有差异.其中,花紫色和花白色的果实密生毛类型中各有1个单株的ITS序列第519位碱基为C,其他单株为T;花紫色和花白色的果实光滑类型中各有1个单株的psbA-trnH序列第68位至第73位碱基依次为CAAAAA,其他单株均为TTTTTG.NJ系统发育树显示,4个类型诸葛菜之间没有完全清晰的界限,亲缘关系很近.后代性状观察结果表明,诸葛菜白色花为特化现象,果实光滑和密生毛是不稳定的性状.研究结果支持将毛果诸葛菜(O. violaceus var. lasiocarpus Migo)并入诸葛菜的分类处理.     

野生种马铃薯SpPHYB基因的克隆与表达分析

采用RT-PCR技术从野生种马铃薯中克隆到一个光敏色素基因PHYB,其cDNA全长为3470bp。含有一个3393 bp的完整开放阅读框,编码一条长1130个氨基酸的蛋白,分子量为125kDa,等电点为5.6。该基因编码的蛋白序列与栽培种马铃薯、番茄和烟草同源基因编码的氨基酸序列一致性分别为98%、95%、92%,命名为SpPHYB.半定量PCR分析表明,根、茎、叶和芽中SpPHYB表达水平较高且相似,但在花和块茎成熟器官中表达量稍低.