大鼠三叉神经尾侧亚核内SPR阳性神经元与初级传入和下行投射纤维之间的突触联系

用追踪和免疫电镜技术研究三叉神经尾侧亚核（Ｖｃ）内Ｐ物质受体（ＳＰＲ）阳性神经元与初级传入和下行投射之间的突触联系。光镜观察发现,在Ｖｃ浅层,ＳＰＲ阳性神经元的分布与ＲＭｇ下行投射终末的分布有重叠。电镜观察发现,三叉初级传入终末和ＳＰＲ阳性神经元树突形成非对称性轴树突触;ＲＭｇ下行投射终末与ＳＰＲ阳性神经元树突也形成非对称性轴树突触,提示ＲＭｇ下行投射纤维可能通过直接作用于丘脑投射神经元对三叉初级传入的伤害性信息进行调控。     

代谢型谷氨酸受体五种亚型在猫脊髓内的分布—免疫组织化学方法研究

为研究代谢型谷氨酸受体各亚型在猫脊髓内的定位分布特征,本实验采用免疫组织化学方法调查了代谢型谷氨酸受体五种亚型（ｍＧｌｕＲ１,ｍＧｌｕＲ２,ｍＧｌｕＲ３,ｍＧｌｕｒ５及ｍＧｌｕＲ７）在猫脊髓（颈２、颈６、胸５、腰６、骶１－２）内的分布状况。结果如下：（１）在背角深层（Ⅲ－Ⅳ层）和腹角内分布有大量中小型（＜３０μｍ）ｍＧｌｕＲ１样免疫反应阳性神经元,背角浅层（Ⅰ、Ⅱ层）为阴性;（２）ｍＧｌｕＲ２／３样免疫反应阳性产物仅见于背角Ⅱ层内侧部,其它部位为阴性;（３）致密的ｍＧｌｕＲ５样免疫反应阳性产物主要分布于猫脊髓背角Ⅱ层的神经毯内,背角Ⅰ层及深层呈中等密度染色;（４）致密的ｍＧｌｕＲ７样免疫反应阳性产物分布于背角Ⅱ层的神经毯内,背角Ⅰ层及深层（Ⅲ－Ⅳ层）呈中等密度染色。此外,腹角运动神经元和骶髓副交感核内的神经元亦呈现ｍＧｌｕＲ７样免疫反应阳性。单侧切断背根,发现术侧背角浅层内ｍＧｌｕＲ７样免疫反应阳性产物密度略有降低,而ｍＧｌｕＲ５样免疫反应阳性产物密度与对侧基本相同。本研究结果显示代谢型谷氨酸受体五种亚型在所调查的猫脊髓各节段内（颈２、颈６、胸５、腰６、骶１－２）的分布存在差异,提示它们在介导谷氨酸传递的信     

褪黑素对大鼠海马神经元谷氨酸所致毒性的拮抗作用

在大鼠海马脑片上电刺激Ｓｃｈａｆｆｅｒ 侧支纤维, 胞外记录ＣＡ１ 区锥体细胞层诱发群体锋电位（ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｓｐｉｋｅ,ＰＳ） , 观察灌流谷氨酸（Ｇｌｕ） 和褪黑素（ＭＥＬ） 对ＰＳ的影响。结果显示：５－０ ｍｍｏｌ／Ｌ浓度的Ｇｌｕ 可使ＰＳ值下降至对照值的４－１ ％ ; ＭＥＬ（０－４ 、０－５ 和０－６ μｍｏｌ／Ｌ） 与５－０ ｍｍｏｌ／ＬＧｌｕ 混合给药,ＰＳ值分别变化为对照值的１４－７ ％ 、１０５－２％ 、２４－３ ％ ; ＭＥＬ（０－５ μｍｏｌ／Ｌ） 、Ｇｌｕ （５－０ ｍｍｏｌ／Ｌ） , 与赛庚啶（ＣＤＰ,０－５ μｍｏｌ／Ｌ） 混合给药,ＰＳ值下降至０ 。上述结果提示,５－０ ｍｍｏｌ／Ｌ浓度的Ｇｌｕ 有神经毒性作用, 但可为ＭＥＬ拮抗, 这可能由５ＨＴ受体所介导。     

阿片成瘾与中脑边缘DA系统的适应性变化

中脑－边缘ＤＡ神经阿片奖赏效应中起着关键性作用。长期应用阿片类药物可引起该系统靶神经元独特的适应性改变。主要包括：（１）中脑腹侧被盖区（ＶＴＡ）的ＴＨ被诱导增加、ＧｌｕＲ１受体上调、神经纤维丝蛋白的减少以及ＤＡ神经元的形态萎缩等；（２）伏核（ＮＡｃ）ＤＡＤ１受体超敏、Ｇｉ／ｏα亚单位的减少，ｃＡＭｐ－ＰＫＡ系统活性上调以及ｃＡＭＰ反应元蛋白（ＣＲＥＢ）和ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ基因表达的改变等。阿片     

褐黑素对大鼠海马神经元谷氨酸所致毒性的拮抗作用

在大鼠海马脑片上电刺激Ｓｃｈａｆｆｅｒ侧支纤维,胞外记录ＣＡ１区锥体细胞层诱发群体锋电位,观察灌流谷氨酸和褪黑素对ＰＳ的影响。结果显示：５．０ｍｍｏｌ／Ｌ浓度的Ｇｌｕ可使ＰＳ值下降至对照值的４．１％;ＭＥ（０．４、０．５和０．６μｍｏｌ／Ｌ）一５．０ｍｍｏｌ／Ｌ浓度的Ｇｌｕ可使ＰＳ值下降至对照值的１４．７％、１０５．２％、２４．３％;ＭＥＬ、Ｇｌｕ,与赛庚啶混合给药,ＰＳ值下降至０。上述结果提示。     

白细胞介素-2对大鼠海马谷氨酸能神经元和γ-氨基丁酸能神经元的影响———免疫组织化学和狭线杂交研究

本研究应用免疫组织化学（ＰＡＰ法）的方法,观察到侧脑室内注射白细胞介素２（ＩＬ２）后,大鼠海马回和齿状回内谷氨酸（Ｇｌｕ）免疫反应阳性神经元的数量明显减少、胞体皱缩、突起及其分支减少;γ氨基丁酸（ＧＡＢＡ）免疫反应阳性神经元的数量、突起及其分支皆减少。用３２Ｐ标记的ＧＡＢＡＴｃＤＮＡ探针对大鼠海马组织的ＧＡＢＡＴｍＲＮＡ进行狭线杂交结果显示：实验组大鼠海马组织的ＧＡＢＡＴｍＲＮＡ的含量明显增多。由于ＧＡＢＡ在ＧＡＢＡＴ的作用下,可转变为Ｇｌｕ,因此,以上结果表明ＩＬ２不仅可影响海马神经元合成和释放Ｇｌｕ和ＧＡＢＡ,而且还使Ｇｌｕ的释放量大于其合成量。这些变化可能与癫痫的发病机理有关     

代谢型谷氨酸受体

代谢型谷氨酸受体（ｍＧｌｕＲｓ）的发现是中枢兴奋性突触性研究中的一些重要进展,ｍＧｌｕＲｓ激活后通过不同的胞内信号转导系统（如ＰＩ水解,ｃＡＭＰ水平变化等）产生生理效应,目前已有八种ｍＧｌｕＲｓ亚基被克隆并成功表达,由于缺少选择性工具药,对其药理学特性及生理功能尚了解甚少,现有证据表明ｍＧｌｕＲｓ在中枢神经系统的活动中起重要作用,包括调制离子通道活动神经元兴奋性和神经递质释放,参与突触传递和突触可     

P物质在谷氨酸兴奋外侧下丘脑-穹窿周围区引起的升压反应中之作用

Ｐ物质（ＳＰ）能神经元及其轴突末梢和受体广泛分布于很多心血管中枢。外侧下丘脑含ＳＰ能神经元,外侧下丘脑投射的升压区内又存在ＳＰ能纤维及ＳＰ受体;因此本工作检验ＳＰ在外侧下丘脑升压反应中的作用。实验显示：（１）Ｌ－谷氨酸（Ｇｌｕ）兴奋外侧下丘脑的穹窿周围区（ＬＨ／ＰＦ）或将ＳＰ分别注入各ＬＨ投射区：蓝斑（ＬＣ）、臂旁核（ＮＰＢ）或中脑导水管周围灰质（ＰＡＧ）均引起升压反应;（２）［Ｄ－Ｐｒｏ２,Ｄ－Ｐｈｅ７,Ｄ－Ｔｒｐ９］－ＳＰ（ＳＰ拮抗剂）预先注入ＬＣ或ＰＡＧ可使Ｇｌｕ兴奋ＬＨ／ＰＦ引起的升压反应减小,而注入ＮＰＢ对该反应无明显影响;（３）双侧延髓头端腹外侧区（ＲＶＬ）分别用酚妥拉明、心得安或阿托品预处理也可明显削弱该反应。结合我们以往的实验结果：ＲＶＬ内的α－、β－、Ｍ－受体介导ＬＣ升压反应,α－和β－受体介导ＰＡＧ－升压反应;本工作显示ＬＨ／ＰＦ可通过其ＳＰ能投射纤维作用于ＬＣ－ＲＶＬ和ＰＡＧ－ＲＶＬ升压系统而实现其升压反应。     

鸡视网膜谷氨酸受体和GABA受体在两栖类卵母细胞中的表达

本工作利用两栖类卵母细胞作为功能表达系统,对鸡视网膜中的谷氨酸受体和ＧＡＢＡ受体的类型和基本性质进行了研究。在注射鸡视网膜ｍＲＮＡ的卵母细胞上,谷氨酸受体有明显的表达。Ｌ－Ｇｌｕ及其类似物ＫＡ,ＡＭＰＡ,ＱＡ都毫无例外地能诱导卵母细胞产生快速平滑的去极化电流,而ＮＭＤＡ,Ｌ－ＡＰ４,ＡＣＰＤ以及天冬氨酸不能诱导明显的电流反应。并且ＡＭＰＡ,ＱＡ对ＫＡ反应存在一定的抑制作用,提示ＡＭＰＡ,ＱＡ可能与ＫＡ作用于同一受体。抑制性氨基酸ＧＡＢＡ的受体被证明大部分为ＧＡＢＡＡ亚型,但有小部分的ＧＡＢＡ反应不能为荷包牡丹碱（ｂｉｃｕｃｕｌｌｉｎｅ）所阻断。     

抗丙肝病毒核心抗原单克隆抗体的研制与初步鉴定

用基因工程重组技术获得的丙肝病毒（ＨＣＶ）核心蛋白抗原与鼠血清白蛋白交联后免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠,用杂交瘤技术成功地建立了４株稳定分泌抗核心抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞,试验结果表明,该４株ＭｃＡｂｓ与免疫抗原及核心区Ｃ３３肽、ＣＰ９、ＣＰ１０抗原有较强的抗原－抗体反应,与ＨＣＶ ＮＳ３、ＮＳ４、ＮＳ５无反应,在竞争ＥＬＩＳＡ中,对ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性血清有较好的抑制作用。４株ＭｃＡｂｓ中３株为ＩｇＧ２     

低氧对培养的肺血管周细胞凋亡的影响

为了研究低氧是否影响肺血管周细胞凋亡并参与腺泡内无肌肺动脉的构型重建, 用ＴＵＮＥＬ法和免疫组化方法, 观察低氧（Ｈ） 组和低氧肺动脉内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ） 组对肺血管周细胞凋亡发生率及抑凋亡基因ｂｃｌ２ 蛋白表达的影响。结果表明：Ｈ组和ＨＥＣＣＭ 组的凋亡指数明显较对照组减小。Ｈ 组和ＨＥＣＣＭ 组ｂｃｌ２ 蛋白的表达量分别是ＮＥＣＣＭ 组的１１７ 倍、１１３ 倍, 是Ｎ组的１３３ 倍、１２７ 倍。提示低氧诱导的抑凋亡基因ｂｃｌ２ 的过度表达, 对周细胞凋亡发生的抑制作用和低氧促进的周细胞增生过程可能都参与无肌肺动脉的构型重建, 与肺动脉高压的形成有关。     

维拉帕米对缺血后大鼠视网膜NOS阳性神经元的影响

实验用 β- NADPH脱氢酶组织化学染色研究维拉帕米对缺血后大鼠视网膜 NOS阳性神经元的影响。结扎双侧颈总动脉使视网膜缺血 ,3小时后松结复流。分别于缺血前 15分钟和再灌流前 1分钟腹腔注射维拉帕米 (5 m g/kg/次 ) ,对照组腹腔注射等量生理盐水。动物存活 3天后取视网膜进行 β- NADPH组化反应。结果表明 :视网膜缺血后 NOS阳性神经元减少 ,并出现 i NOS阳性细胞。在缺血前后应用维拉帕米可使视网膜内 NOS神经元较对照组显著减少 (P<0 .0 1) ,NOS神经元形态良好。说明维拉帕米减少大鼠视网膜缺血后 NOS阳性神经元 ,其相应 NO量减少 ,推测维拉帕米对大鼠缺血后视网膜功能具有保护作用。     

枯否细胞在实验性肝癌细胞凋亡中的作用研究

探讨Kupffer细胞在大鼠实验性肝癌细胞凋亡中的作用。应用免疫组化方法和TUNEL法对单用二乙基亚硝胺（DENA）诱发的肝癌及用氯化钆（GC）或酶母多糖（ZM）分别阻塞或激活Kupffer细胞后,给以DENA所引起的大鼠肝癌中的增殖细胞核抗原（PCNA）、bax、bcl-2蛋白表达和肝癌细胞的凋亡进行了对比研究,结果显示：肝癌组织的增殖指数在ZM＋DENA组、DENA组、GC＋DENA组依次增高,而凋亡指数在上述各组依次降低。Bax阳性率在ZM＋DENA组明显高于DENA组（P＜0.05）,而ZM＋DENA组bcl-2阳性率明显低于DENA组（P＜0.05）。结果提示：Kupffer细胞可促进实验性肝部细胞凋亡。     

雄激素受体在肝癌发生过程中的表达及意义

为了进一步探讨雄激素受体（ＡｎｄｒｏｇｅｎＲｅｃｅｐｔｏｒ,ＡＲ）作为肝癌标志物的意义,本文采用免疫组织化学ＡＢＣ法,对二乙基亚硝胺（ＤＥＮ）诱发大鼠肝癌发生过程中肝细胞雄激素受体（ＡＲ）的表达进行了系统观察。结果显示：正常大鼠的ＡＲ阳性肝细胞极少,ＤＥＮ诱癌第４周可见少量肝细胞呈ＡＲ阳性表达,细胞散在分布,胞质和／或胞核内可见棕褐色阳性反应颗粒。随着肝癌发展进程,ＡＲ阳性肝细胞数逐渐增多,呈簇状或片状分布。至诱癌第１８周,肝癌结节内肝癌细胞大多呈ＡＲ阳性表达。本实验结果表明,ＡＲ与肝癌的发生和发展具有密切关系     

电针对局灶性脑缺血大鼠脑内神经生长因子受体trkA的影响

神经生长因子对神经元凋亡有拮抗作用,其作用方式是通过特异性受体——ｔｒｋＡ实现。为了探讨针刺对内源性抗凋亡因素的调节作用。本研究用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学方法观察缺血再灌注时ｔｒｋＡ的变化及针刺对ｔｒｋＡ的影响。结果发现：缺血组对照侧大脑皮层偶见散在ｔｒｋＡ免疫阳性神经元,缺血侧大脑皮层ｔｒｋＡ阳性神经元与对照侧相比,显微镜下见无显著性差异。电针组缺血侧大脑皮层见大量ｔｒｋＡ免疫反应阳性神经元,主要分布于半影区,与对照侧及未电针的缺血侧相比,显微镜下见阳性神经元数目有差异。结果提示：电针可以诱导脑缺血时神经营养因子受体表达,调动机体内抗凋亡因素的作用。     

前脑生长抑素样神经元对大鼠颈部食管前运动神经元的支配——PRV和SOM荧光双标记法研究

用ＰＲＶ和ＳＯＭ免疫荧光双标记法研究了前脑中ＳＯＭ样神经元对孤束核中食管前运动神经元的支配。当ＰＲＶ注射于大鼠颈部食管后,在大脑皮质前部嗅沟背侧的无颗粒型岛叶皮质后部和嗅沟腹侧的梨状前皮质前部可见较多ＰＲＶ和ＳＯＭ双标记细胞。在终纹床核、内侧视前区、外侧视前区和正中视前区、终板血管器、穹隆下器、以及嗅结节等处也可见少量ＰＲＶ和ＳＯＭ双标记细胞。本文推测脑对颈部食管运动的调节是由广泛的中枢神经系统结构来完成的     

人胎前额叶皮质神经肽Y免疫反应阳性神经元的发育

本文用免疫组化方法研究了人胎前额叶皮质中神经肽Ｙ（ＮＰＹ）免疫反应阳性神经元的发育。结果显示,ＮＰＹ阳性神经元最早于１６周出现于前额叶皮质的皮质下板,为未成熟的双极神经元。随着胎儿生长,皮质下板的ＮＰＹ阳性神经元数量逐渐增加,胞体增大,着色加深,突起增多增长。３０周后较少数量的ＮＰＹ阳性神经元也见于皮质的Ⅵ层及白质,皮质其它层阳性神经元数量很少。２８周后皮质内还能见到各种走向的ＮＰＹ阳性神经纤维,其数量随胎儿生长而增加。本研究提示,与其它动物相比,人类大脑皮质ＮＰＹ阳性神经元出现较早,其成熟过程基本上在出生前完成     

共聚焦镜观察凋亡巨噬细胞内pH的变化

用透射电镜观察巨噬细胞的形态学改变,结果显示,地塞米松处理８小时后,大部分巨噬细胞发生凋亡特征变化：胞突缩短、减少,胞膜完整。胞体皱缩,胞质密度增加,其中出现大量空泡。胞核染色质边聚、浓缩。另外用激光扫描共聚焦显微镜（ＡＣＡＳ５７０）和ｐＨ荧光探针ＳＮＡＲＦ┐１／ＡＭ实时检测地塞米松处理巨噬细胞胞浆ｐＨ的动态变化。加入地塞米松,多数巨噬细胞胞浆马上发生快速和短期的碱化。随后,胞浆ｐＨ缓慢降低,胞浆酸化。结果表明,胞浆酸化是细胞凋亡发展的必然过程,胞浆碱化则很可能与细胞凋亡的发生相关,也可能与细胞种类、细胞功能状态相关     

细胞周期调控因子的表达与肺癌预后关系的研究

应用细胞周期调控因子P^27kipl,Rb单克隆抗体和CDK4多克隆抗体,对54例肺鳞状细胞癌的纤支镜活镜标本和10例正常肺组织进行免疫组织化学染色研究。结果发现：54例肺鳞癌中,P^27kipl阳性表达率为928/54）51.9%。表达水平与患预后呈正相关。P^27kipl表达是影响肺癌患预后的主要因素。CDK4阳性表达率（26/54）为48.1%,Rb阳性表达率（33/54）为61.1%。表达水平与患预后呈正相关。结果表明：P^27kipl低表达可作为判断肺鳞癌患预后差的一个独立的有效标记指标,CDK4表达对鉴别良恶性病变有一定意义,Rb表达可作为判断肺鳞癌预后的有意义指标。     

自发性高血压鼠脑底动脉单胺能神经起源的观察——免疫组织化学法研究

应用免疫组织化学ＡＢＣ法和颈上神经节切除术,观察了１５只自发性高血压鼠（ＳＨＲ）（分手术Ⅰ组、手术Ⅱ组和对照组）脑底血管主要动脉单胺能神经纤维的起源。对照组自发性高血压鼠脑底主要动脉分支,大脑前动脉、大脑中动脉和大脑后动脉均可见棕褐色的免疫反应阳性纤维。手术Ⅰ组作左侧颈上神经节切除术,同侧大脑前动脉、大脑中劝脉和大脑后动脉的免疫反应阳性纤维明显减少,对侧各同部位血管的阳性纤维也有减少;手术Ⅱ组作双侧颈上神经节切除术,双侧大脑前动脉、大脑中动脉和大脑后动脉的免疫反应阳性纤维基本消失。结果提示：自发性高血压鼠脑血管一侧颈内动脉系各主要动脉分支的交感神经纤维,起源于双侧颈上神经节。讨论了颈上神经节切除对探讨高血压病的发病机理可能的作用。