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1.
再狭窄基因治疗最新进展 总被引:1,自引:0,他引:1
旁路转流及血管成形术是慢性动脉缺血重要有效的治疗手段,但再狭窄严重限制了脸远期疗产。近两年来,随着血管基因转移技术的发展,基因治疗通过向血管壁转移SMC增殖治疗基因或通过反义核酸技术为再狭窄防治带来了新的希望。 相似文献
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阻断VEGF旁分泌通路抑制乳腺癌血管生成与肿瘤生长 总被引:4,自引:0,他引:4
以人乳腺癌细胞株MCF 7为研究对象 ,通过构建有义与反义血管内皮生长因子 (VEGF)基因表达质粒 ,并转染MCF 7细胞 ,建立了高与低水平表达VEGF的细胞克隆。稳定转染反义VEGF表达质粒的细胞产生和分泌VEGF的能力明显下降 ,尽管在体外培养条件下细胞的增殖速度与未经转染的对照相比不是减慢而是略有增快 ,但在体内的成瘤能力、生长速度和转移能力等却明显低于未经转染的对照细胞或稳定转染有义VEGF表达质粒高水平表达VEGF的细胞克隆。通过体内电穿孔技术介导反义VEGF12 1及可溶性VEGF受体sFlk 1表达质粒转移至荷瘤鼠肿瘤组织内 ,反义VEGF12 1及sFlk 1的表达能显著抑制肿瘤的生长。研究结果证实了VEGF旁分泌通路在诱导乳腺癌肿瘤血管生成、促进肿瘤生长和转移方面起重要作用 ,阻断VEGF旁分泌通路能有效抑制乳腺癌的生长 相似文献
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构建可表达原癌基因c-jun正义和反义RNA的真核细胞表达载体,将其导入体外培养的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)后,经Northern分析证实,两种插入方向的cjun基因均在VSMC中大量表达; ̄3H-TdR参入实验表明,c-jun反义RNA对VSMC的增殖具有显著抑制作用.提示用反义核酸抑制c-jun表达对治疗某些由于VSMC增殖所引起的心血管病可能具有一定意义. 相似文献
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TGFα反义寡聚核苷酸对膀胱癌BIU 87细胞株的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
报道了23碱基组成的TGFα反义寡聚核苷酸和对照寡聚核苷酸对人膀胱移行细胞癌BIU87细胞增殖及其TGFα mRNA表达的作用,结果表明:TGFα反义寡聚核苷酸抑制体外培养的BIU87细胞的增殖、DNA合成和TGFα mRNA的表达,进一步证明了TGFα在BIU87细胞恶性增殖中的重要作用. 相似文献
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SHEEC食管癌细胞中NGAL基因的功能 总被引:33,自引:0,他引:33
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 (neutrophilgelatinase associatedlipocalin ,NGAL)是脂质运载蛋白(lipocalin)家族的一个新成员 ,可能是人类的一种新的癌基因 ,但是在肿瘤中的功能不清楚。以往研究发现NGAL基因在SHEEC食管癌细胞中显著过表达 ,表明该细胞是一种用来揭示NGAL基因在肿瘤中功能的良好模型。采用反义封闭技术 ,同时结合裸鼠成瘤实验等研究了反义封闭NGAL基因转录对SHEEC食管癌细胞的浸润和分裂增殖等行为的影响。结果发现 ,反义封闭NGAL基因转录不但可以有效地降低SHEEC细胞分泌的基质金属蛋白酶 9和基质金属蛋白酶 2的活性 ,而与此同时裸鼠成瘤细胞的浸润行为也相应地受到了明显抑制 ,然而SHEEC细胞端粒的长度、拓扑异构酶II的含量以及细胞增殖指数等未发生明显变化。表明NGAL基因在食管癌细胞SHEEC中的功能可能主要是通过明胶酶在促进肿瘤细胞的浸润中发挥作用 ,而可能与肿瘤细胞分裂增殖的相关性不明显 相似文献
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MAPK对胰岛素介导的人血管平滑肌细胞PKCα的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
目的:在胰岛素的干预下,观察MAPK反义寡核苷酸(ODNs)对人血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及PKCα表达的影响。方法:3HTdR掺入法检测VSMC增殖,逆转录PCR、免疫组织化学法检测PKCα表达。结果:反义ODNs 处理的细胞可显著抑制胰岛素诱导的VSMC的DNA合成,ODNs 的上述作用与降低VSMC内PKCα基因表达有关。结论:胰岛素刺激人VSMC增殖可被MAPK反义寡核苷酸所抑制,可能存在有关胰岛素PKCMAPK激活途径 相似文献
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徐莹莹 《国外医学:分子生物学分册》2007,4(4):347-349
中期因子(midkine,MK)作为肝素结合生长因子家族的一员,通过促有丝分裂和细胞增殖、促血管生成、诱导细胞恶性转化、抗凋亡等功能影响肿瘤细胞的增殖、分化及凋亡。MK在多种恶性肿瘤中呈过表达,且血清MK水平与预后不良呈正相关,因此MK有望成为一种新的肿瘤标志物;随着反义核苷酸、RNA干涉及特异性启动子参与基因治疗技术的发展,MK可能成为肿瘤基因治疗的新靶点。 相似文献
9.
《生理学报》2017,(1)
本研究旨在探索C型利钠肽前体蛋白基因(natriuretic peptide precursor C,nppc)在斑马鱼胚胎期的表达及其在血管发育过程中的功能。利用胚胎整体原位杂交技术检测nppc基因在斑马鱼胚胎期的表达。同时使用转基因斑马鱼系Tg(flk1:GFP)和Tg(fli1a:n GFP),显微注射nppc特异性吗啉基反义寡核苷酸(morpholino)和nppc m RNA调控nppc基因表达,利用激光共聚焦显微镜观察分析斑马鱼节间血管(intersegment vessel,ISV)表型,并统计内皮细胞数目。结果显示,在受精后24 h和48 h,nppc基因在斑马鱼脑、心脏、血管系统中都有表达。下调nppc基因表达导致ISV发育缺陷,ISV内皮细胞数目减少。以上结果表明下调nppc基因表达可能通过抑制内皮细胞增殖和内皮细胞迁移调控斑马鱼胚胎血管发育。 相似文献
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本综述了反义RNA在原核生物和真核生物中的作用机理,并系统地介绍了反义RNA技术在植物基因过程中的研究进展。 相似文献
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本文综述了反义RNA在原核生物和真核生物中的作用机理,并系统地介绍了反义RNA技术在植物基因过程中的研究进展。 相似文献
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报道了23碱基组成的TGFa反义寡聚核苷酸和对照寡聚核苷酸对人膀胱移行细胞癌BIU87细胞增殖及其TGFamRNA表达的表用,结果表明:TGFa反义寡聚核苷酸抑制抑体外培养的BIU87细胞的增殖,DNA合成和TGFamRNA的表达,进一步证明了TGFa在BIU87细胞恶性增殖中的重要作用。 相似文献
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目的:研究小鼠双微体扩增基因(mouse double minute 2;MDM2)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide;ASON)对血管平滑肌细胞MDM2和p53表达的影响,探讨MDM2反义寡核苷酸包埋支架防治支架内再狭窄的可行性。方法:人工合成一段针对MDM2 mRNA的反义寡核苷酸,脂质体包裹不同浓度ASON转染兔血管平滑肌细胞,RT-PCR和Western-blotting检测MDM2反义寡核苷酸对兔血管平滑肌细胞MDM2和p53表达的影响。结果:不同浓度MDM2反义寡核苷酸作用于兔血管平滑肌细胞后,MDM2和p53 mRNA表达量各浓度组之间有显著性差异(P<0.01),MDM2和p53蛋白表达量各浓度组之间有显著性差异(P<0.01)。结论:MDM2反义寡核苷酸体外能够特异性抑制兔血管平滑肌细胞MDM2表达,提高细胞内p53基因表达量,MDM2反义寡核苷酸有望被进一步应用于药洗脱支架研究。 相似文献
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为了探讨长链非编码RNA干扰素活化基因的反义核糖核酸(lncRNA IFNG-AS1)对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的人脐静脉血管内皮细胞EVC-304增殖、凋亡的影响和调控机制,该研究采用100 μg/mL的oxLDL分别处理转染si-IFNG-AS1、miR-19b-1-5p mimics或共转染si-IF... 相似文献
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反义技术及其在G蛋白研究中的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
反义技术至少包括反义寡核苷酸技术、反义RNA技术和核酶技术.在G蛋白研究中,反义技术在G蛋白受体及受体亚型研究、G蛋白转导信号特异性研究方面及对G蛋白耦联信号传导途径与其他信号传导途径之间“cross talk”认识方面的研究中,有着广泛的应用. 相似文献
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反义技术是近些年来随着现代分子生物学技术的发展而产生的新的生物医学治疗技术。它采用反义核酸分子抑制、封闭或破坏靶基因组的技术手段,包括反义寡核苷酸、核酶及RNA干扰等。反义分子通过与靶基因异性互补配对结合,阻断靶基因的复制、转录或翻译过程,从而发挥抗病毒作用。针对乙型肝炎病毒的反义技术也有了广泛而深入的研究。根据反义技术在分子、细胞以及动物水平上的研究表明:反义技术能够高效、特异地抑制HBV的复制与表达。 相似文献
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表达PKCα反义RNA对人肺癌细胞增殖的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
运用基因重组和基因转染技术 ,将 PKCα c DNA反向插入的重组质粒 p XJ41 - CKPα导入人肺癌 LTEPa- 2细胞 .经 Northern印迹 ,Western印迹等检验 ,表明成功地建立了稳定表达 PKCα反义 RNA的人肺癌细胞 (LT· AS4) .进一步研究了表达 PKCα反义 RNA对人肺癌细胞 LTEPa-2增殖的影响 .结果表明 ,表达 PKCα反义 RNA可抑制人肺癌细胞增殖速率 ,流式细胞光度术检测 ,G1 期细胞百分数增加 ,S期细胞百分数降低 ,并进一步探讨了其作用机理 ,观察到与增殖相关基因 c- myc、Ca M和 Cyclin B1的表达水平均下降 .这可能是 PKCα表达被阻抑、负调细胞增殖的分子机理之一 相似文献
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反义RNA抑制存活素基因的表达对HeLa细胞的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
为研究存活素(survivin)基因在肿瘤细胞中的应用,通过RT-PCR从HeLa细胞中克隆得到存活素cDNA的编码区,将其反向克隆到可诱导型表达载体pHC中,得到存活素反义RNA表达的载体pHSC,通过脂质体的介导,将pHSC导入HeLa细胞中,经C418(800nmol/L)筛选获得可以诱导表达存活素反义RNA的稳定细胞株HeLa-pHSC。获得的细胞株在2mmol/LZn^2 的诱导下,可以表达存活素反义RNA,从而抑制存活素基因的表达,此时HeLa细胞的增殖受到抑制,对化疗药物的敏感性增加,在G2/M期可以减缓细胞周期的进行性,这表明存活素对维持肿瘤细胞的增殖以及细胞周期的进行具有非常重要的作用。 相似文献
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利用基因重组技术,hTRT基因反向插入真核表达载体pcDNA3.0,获得重组体pcDRTRT,通过脂质体法导入人结肠癌细胞株SW-111C,获得稳定转染细胞系,即反义细胞,该细胞易脱落,出现明显生长抑制现象;失去叠落生长能力;流式细胞仪(FCM)证实导入反义hTRT后,G0/1期细胞增加,G2M和S期细胞减少,增殖指数(PI)降低;且不能在软琼脂中形成集落;并发现反义细胞中hTRT表达水平明显下降。说明反义hTRT基因体外导入结肠在细胞株SW-111C可以明显降低端粒酶活性,抑制结肠癌细胞的生长、增殖且能使其恶性表型发生逆转。 相似文献