糖皮质激素非基因组效应的研究

在过去的几十年间,人们认为糖皮质激素（glucocorticoid,GC）仅仅是通过改变基因的表达来发挥其生理作用,这个过程需要几个小时来完成。然而,近年来越来越多的证据表明GC对激素分泌、神经元兴奋性、机体行为及细胞形态、糖类代谢等具备快速效应,这些过程往往在数秒钟或者分种内完成,这种作用机制被称为GC的非基因组作用机制。GC的非基因组作用主要可能通过两种不同的机制起作用：（1）通过细胞膜上或者细胞质内结构未知的糖皮质激素受体（glucocorticoid Recptor,GR）来发挥非基因组作用,即为特异性非基因组效应,（2）GC主要通过改变细胞膜理化作用来发挥效应。也称为非特异性非基因组效应（non-specific nongenomic effects,NSNE）。本文通过阐述近年来GC的非基因组的作用的最新研究进展并且讨论了这些非基因组作用临床治疗过程中的联系。对糖皮质激素基因组和非基因组作用机制的深入了解有助于指导我们在临床合理用药并减少其副作用。     

糖皮质激素非基因组效应及其信号转导机制

糖皮质激素具有多种重要的生理和药理作用,其经典作用途径为“基因组机制”,通过调节基因转录发挥作用.近年来,其“非基因组机制”在生理和药理学方面的作用越来越受重视.在这一作用途径中,可能有多种受体、激酶、信号分子的参与,“基因组机制”和“非基因组机制”间还可能存在交互调节,对非基因组机制进行深入研究有利于糖皮质激素的临床合理应用.     

ATM和ATR：在G2—M期阻滞与凋亡中的作用及相互关系

ATR和ATM是DNA损伤引起的G2—M期阻滞的主要信号因子,它们通过调节不同的细胞因子在细胞G2—M期阻滞中发挥不同的作用,并且它们相互作用在诱发细胞凋亡方面也有重要意义。本文着重阐述了近年来报道的有关ATR和ATM在G2—M期阻滞与凋亡中的作用及相互关系方面的研究进展。     

从少量培养细胞中同时提取微量蛋白和RNA的方法探讨

为建立一项从少量培养细胞中同时提取RNA和蛋白质的技术 ,向 2～ 3× 10 5细胞中加入 1ml自制RNA提取试剂 ,RNA抽提后剩下的中下两相 ,用异丙醇、盐酸胍和无水乙醇抽提蛋白质 .同时用进口Tripure试剂、经典的异硫氰酸胍 苯酚 氯仿一步抽提RNA法和分子克隆实验手册裂解液制备蛋白质的方法 ,作为对照 .自制试剂提取的总RNA ,18S、2 8S清晰可见 ,2 8S比 18S带亮度强 2～ 3倍 ,带与带之间无拖尾现象 ,5S隐约可见 ,而且成功地进行了Northern印迹、RT PCR分析 ,与经典方法差异不大 ;用此法所提蛋白质 ,经SDS PAGE检测 ,蛋白分离效果很好 ,无杂质 ,且Western印迹检测Giα蛋白 ,可见一条清晰的特异带 ,与常规提取蛋白质 ,结果相似 .从微量细胞中同时提取的RNA和蛋白质 ,得率高、纯度好 ,具有化学完整性和生物学性质     

G蛋白及其研究进展

Ｇ蛋白及其研究进展周元国,王正国（第三军医大学野战外科研究所,重庆６３００４２）目录一、Ｇ蛋白的结构与分类（一）α亚基（二）β亚基（三）γ亚基二、Ｇ蛋白发挥生物学功能与作用的机制（一）传递信息的方式（二）βγ二聚体的作用（三）与Ｇ蛋白偶联的受体（四）...     

小鼠脑组织腺苷A2A受体缺失模型的建立与评价

制备了脑组织腺苷A2A受体基因缺失的小鼠模型并对该模型进行评价。在采用2次6.2 Gy X线间隔照射对敲除A2A受体基因的雌性C57BL/6小鼠进行清髓处理后, 将野生型雄性C57BL/6小鼠骨髓细胞移植到其体内, 使其脑组织的A2A受体仍保持缺失型。然后对移植效果进行鉴定, 并对模型的生理指标进行观察和评价。结果发现: 骨髓移植6周后, 受体小鼠的白细胞性染色体基因由雌性变为雄性; 骨髓中A2A受体阳性细胞率为94.85%, 而脑内A2A受体mRNA与A2A受体基因敲除小鼠比较, 无显著差异。模型小鼠除心率略低于野生型小鼠外, 在呼吸频率、脑含水量以及脑内谷氨酸含量等生理指标上均与野生型小鼠和A2A基因敲除小鼠无显著差异。     

纳米金新型基因芯片检测系统的研制及其在临床病原微生物快速检测中的应用

本研究在纳米放大基因芯片检测专利技术的基础上 ,研制纳米金新型基因芯片检测系统 ,从而充分利用纳米金与银反应可将信号放大 10 6倍的优势以取代目前通用的荧光、同位素、酶标等信号报告材料 ,实现芯片技术与纳米技术的有机结合 ,使之具有设备简单 ,技术稳定易于掌握 ,灵敏度高 ,应用范围广等特点。并在此基础上构建针对临床常见致病菌的实用型纳米金基因芯片 ,从而为临床致病性病原微生物的快速、简便、准确诊断探索一条新的途径。试验的主要方法及结果如下 :(1)扩增实验表明 :引物巯基修饰后必须经过TCEP预还原处理 ,才能获得较好的P…     

脑肿瘤抑制因子的功能研究

本文证明了胎脑组织中存在一类可以抑制人白血病细胞系的生长的低分子天然抑癌物．这种抑瘤物抑制活性分布在小于１０ｋＤａ组分,经Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ２５凝胶过滤可分离为单一组分,且具有广谱的抗肿瘤效应．体外可抑制人白血病、肝癌、胃癌细胞系和小鼠粒、单核和淋巴系白血病细胞,而对人骨髓ＣＦＵ－ＧＭ和小鼠骨髓ＣＦＵ—ＧＭ的抑制作用较弱。     

基于纳米金的显色基因芯片快速检测病原微生物

为构建一种新型的比色芯片,以实现对临床常见感染病原微生物的快速、准确地检测和鉴定.采用纳米金标记巯基修饰的各待检病原微生物的特异性基因片段,与相应的以各待检靶序列的特异性寡核苷酸探针构建成的基因芯片杂交,并通过结合银染反应将杂交信号被放大形成裸眼可见的显色信息来判读检测结果.该芯片技术检测时间短,最低检测值达 100fmol/L.操作方法简单,不需要特殊设备,能部分满足临床检测的通量要求,具有很好的临床应用前景.     

油酸性肺损伤时纤维细胞生长因子的变化

纤维细胞生长因子(FGF)是分子量为16000—18000的蛋白,对中胚层来源的细胞,如成纤维细胞,血管内皮细胞有促进增殖作用。正常机体,除脑组织外,其他器官组织中FGF含量极低,不易检出。在慢性纤维化疾病和脑损伤时,FGF明显增加。油酸可引起多种动物急性肺损伤,导致反应性细胞增生,肺纤维