草鱼出血病病毒对其它鱼的感染性研究

用草鱼出血病病鱼分离出的草鱼出血病病毒(Grass carp hemorrhage virus,GCHV)感染其它常见鱼并用ELISA方法检查感染鱼组织提取液,结果表明:青鱼、鲢鱼、布氏鳌条对GCHV抗体呈阳性反应;鲤鱼、鳙鱼、鲫鱼、团头鲂、泥鳅则呈阴性反应。综合感染鱼发病症状及死亡特征,初步认为:青鱼对GCHV是易感的,GCHV能在鲢鱼、布氏蟹条体内增值,但毒力较低,鳙鱼、鲫鱼、团头鲂、鲤鱼、泥鳅能抗GCHV感染。     

转基因抗病草鱼研究进展

草鱼是我国淡水养殖的著名品种。草鱼的疾病严重阻碍着我国水产业的发展。通过分析当前国内外转基因技术培育抗病草鱼的现状,对今后转基因抗病草鱼的研究作了展望。     

草鱼催乳素抗血清的制备与鉴定

应用从草鱼垂体中分离纯化的催乳素免疫兔子制备了特异抗血清。用常规酶联免疫吸附测定法检测表明该抗血清与马哈鱼生长激素及促性腺激素完全没有交叉反应，而与草鱼生长湟级向弱交叉反应。免疫细胞化学染色表明该抗血清主要与草鱼垂体前叶催乳素细胞发生结合反应，与垂体间叶细胞有微弱染色反应，但与神经垂体琢垂体后叶细胞则完全没有免疫结合反应。     

池塘饲养鱼类优化结构及其增产原理：Ⅰ.池塘越冬鱼种的生物学特性

1986—1989年的鱼种池塘越冬对比饲养与室内验证试验结果表明:长江以南草鱼种在冬季大部分时间仍能开口摄食。若不是密集越冬,并在晴天加强培育,越冬期间鱼种的平均生长率可达10—14％,鱼体丰满系数、血液中红细胞数、血红蛋白、血浆总蛋白含量,肌肉、肝脏中大部分营养成分较越冬前均无明显变化(p>0.05);补充投饵的半密集越冬组,鱼种体重、丰满系数能维持在越冬前水平(p>0.05),但血液、肌肉、肝脏中部分营养指标仍明显下降(p≤0.05);而饥饿条件下密集越冬组,鱼种消瘦9—14％,腹内肠系膜脂肪消耗殆尽,丰满系数、肝脏、肌肉中蛋白质、脂肪含量均明显下降(p≤0.05),且出现贫血状态。试验证明了越冬鱼种放养密度及饲养管理的不同,将影响鱼种质量的优劣和次年的成鱼养殖产量。为我国长江中下游大部,淮河、黄河中下游部分地区改革鱼种越冬制度,采取稀放精养的必要性和提高越冬鱼种质量与产量的可行性提供了理论根据。     

草鱼同工酶发育遗传学研究——Ⅰ.不同组织器官的同工酶分析

采用垂直淀粉凝胶电泳及特异性组织化学染色技术,研究了草鱼成体脑、眼、心、肾、肌、肝等6种组织中的6种同工酶系统(LDH、MDH、GDH、ADH、LDH、EST)的分化表达谱式。结果表明,草鱼的同工酶系统具有明显的组织特异性。与绝大多数硬骨鱼类相比,草鱼的LDH、m-MDH和ADH同工酶具有特殊的表达谱式:m-MDH和ADH均由两个基因座位编码;肾脏在LDH-A_3B与LDH-A_2B_3之间多出1条LDH酶带(LDH-X)。本文还讨论了草鱼同工酶的遗传基础和亚基组成,以及本实验的某些结果与其他作者的结果不相符的原因。     

草鱼转铁蛋白基因的克隆及其组织表达

转铁蛋白(Transferrin,Tf)功能广泛,不仅参与机体内铁离子的运输和代谢,还在细胞呼吸、细胞生长和增殖中起重要作用,而且它具有抗菌杀菌的功能。研究从草鱼肝肾全长cDNA文库中克隆得到草鱼转铁蛋白基因(CtTf),该基因全长cDNA5′非编码区包含31bp,最大开放阅读框为2025bp,编码674个氨基酸,3′非编码区为266bp。研究使用了Signal P、SMART等在线软件对草鱼转铁蛋白全长cDNA的分子特征进行预测,结果显示CtTf编码的蛋白质N-端有1个由15个氨基酸残基组成的信号肽,第24-334个和第338-665个氨基酸为2个保守的结构域,二者同源率为31%。与其他物种的转铁蛋白类似,草鱼转铁蛋白每个结构域包含4个铁离子结合位点,它们在两个结构域中的位置相对保守,除了这8个铁离子结合位点外,还存在多个完全保守的氨基酸位点。草鱼转铁蛋白与人及其他物种有很高的同源性,与其他鲤科鱼类的同源性为65%-73%;与海洋鱼类同源性为43%-50%;与两栖、爬行、鸟类、哺乳类的同源性为40%-42%。系统进化树也显示草鱼转铁蛋白基因与斑马鱼和鲤鱼的亲缘关系最近。RT-PCR的实验结果表明,在草鱼肝、肠、肾、脾、心、肌肉、鳃和脑8种组织中,草鱼转铁蛋白基因在肝中的表达量最高,其次为脾和肠,在鳃和脑中有痕量表达。       

青草鲢鳙四种鱼同工酶的比较研究

采用聚丙烯酰氨垂直板状连续电泳方法,对青草鲢鳙６种组织、１０种同工酶和蛋白质进行了电泳研究,并结合作者以前做的工作,对所研究的共２１种同工酶和蛋白质在４种鱼中的组织分布,位点表达及活性作了分析和总结。结果表明：４种鱼同工酶的种内组织分布差异大于种间差异;ＡＤＨ、ＡＭＹ、ＣＡＴ、ＥＳＴ、ＭＥ、ＰＯＸ、ＳＤＨ存在不同程度的种间差异,可作为种类的遗传标记;４种鱼ＭＤＨ、ＧＯＴ、ＡＬＰ、ＡＯ、ＳＯＤ同工酶谱非常相似,只在活性上略有差异;ＬＤＨ、Ｇ６ＰＤＨ和ＣＯＸ的酶谱特征可作为青草和鲢鳙两个亚科的鉴别标记。     

CaPKR-like在鲫鱼与草鱼组织中的表达特性分析

摘要：PKR是由干扰素诱导的最重要的抗病毒蛋白之一,能抑制细胞和病毒蛋白的合成。鲫鱼PKR基因(CaPKR-like)是鱼类第一个,也是非哺乳类脊椎动物第一个报道的PKR全长cDNA序列。本研究制备了CaPKR-like N-端包含Za结构域的多克隆抗体,采用Western blots检验PKR-like在鲫鱼和草鱼组织中的表达特性。Western blots显示在未诱导的鲫鱼和草鱼中该基因表达水平非常低,但是经Poly I:C免疫一周后,在鲫鱼和草鱼等8种组织中有较强的PKR-like蛋白产生。结果暗示：CaPKR-like与哺乳类PKR有相同的组织表达特性。。     

鲫鱼囊胚细胞干扰素的诱导及部分特性

用紫外线灭活的草鱼呼肠孤病毒（ＧＣＲＶ）诱导鲫鱼囊胚细胞（ＣＡＢ）能产生一种高滴度的抗病毒物质。这种物质在５６℃及ｐＨ２￣１１稳定;对雎蛋白酶敏感;抗病毒活性脘被保护细胞的密度、培养温度及保护时间的影响;不能被ＧＣＲＶ的特异性抗体中和;无直接杀病毒作用;抗病毒机制依赖于细胞内ＲＮＡ和蛋白质的合成;在多种鱼类培养细胞中具有抑制病毒作用。这些特性与哺乳类α／β干扰素一致,是一种鲫鱼干扰素。     

草鱼早期胚胎胚盘细胞表面微区元素的研究

本文应用扫描电镜Ｘ射线能量色散分析技术,对草鱼早期胚胎胚盘区细胞的表面元素进行了分析,结果表明：（１）草鱼胚胎细胞表面含有Ｎａ,Ｍｇ,Ａｌ,Ｓ,Ｃｌ,Ｋ和Ｃａ（２）七种元素在胚胎各期的相对含量是不同的,并且各种元素在胚胎发育中的变化曲线也是不同的。     

草鱼对营养盐钙磷及饲料钙磷镁铁的利用率

用氧化铬指示剂法测定了草鱼对营养盐钙、磷的表观利用率。钙利用率:乳酸钙81.3％,碳酸钙26.4％,磷酸二氢钙69.7％,磷酸氢钙39.9％,磷酸钙0.0;磷利用率:磷酸二氢钠90.3％,磷酸二氢钙90.3％,磷酸氢钙60.3％,磷酸钙2.8％。钙、磷利用率随着营养盐溶解度的增大而增高。对于(鱼是)鱼粉、豆麸粉、花生麸粉、玉米粉和麦麸粉的钙、磷、镁、铁表观利用率研究结果表明:草鱼能有效地利用天然饲料中的镁和磷,但是几乎不能利用铁和钙。因此,为了满足草鱼生长对无机盐的需要,则必须在人工饲料中添加钙和铁。     

池塘饲养鱼类优化结构及其增产原理 Ⅲ.池养草鱼适宜生长的食物结构及其需求量

在实验室以浮萍和苏丹草为青饲料,颗-1(蛋白质17％)和颗-2(蛋白质25％)为精饲料进行交叉梯度试验,用特定生长率、饲料总生长效率、蛋白质效率等作为评价指标,试验结果表明:草鱼种所需青饲料与颗-1、颗-2的适宜比例范围分别为20—50,1和15—30:1。根据上述试验结果,兼顾草鱼在不同季节的营养需求和控制池塘水质,调整各阶段青、精饲料的投喂量,于1987—1989年进行了池塘对比饲养试验,结果表明,青、精饲料的平均投喂量分别为11.25×10~4—12.00×10~4kg/ha和11.25×10~3—12.00×10~3kg/ha,试验池草鱼生长率、总体鱼增重量分别为常规池的1.4和1.5倍。     

草鱼前体脂肪细胞的原代培养

构建脂肪细胞体外培养体系,研究脂肪细胞分化过程,是探讨动物脂质代谢规律的重要手段.目前,哺乳动物方面,自20世纪60年代起至今,国内外已成功构建了大鼠[1,2]、人[3,4]、牛[5,6]和猪[7,8]的前体脂肪细胞体外培养模型,鱼类方面的工作则开始不久.     

草鱼穿孔素C端溶细胞活性分析

穿孔素的溶细胞作用是机体杀伤病毒和其他微生物感染细胞以及肿瘤细胞的一种效应机制。穿孔素在鱼类非特异性免疫中起重要作用。为了解鱼类穿孔素的功能,根据穿孔素基因序列特征,在已构建的草鱼肝肾cDNA文库中克隆了草鱼穿孔素基因C端包含1个完整蛋白激酶C保守结构域(C2)的cDNA。将该cDNA与表达载体pET32a连接并转化表达菌DE3,诱导表达。His-Bind亲和柱纯化获得了草鱼穿孔素C端表达多肽(PFP-C)。将PFP-C与兔红细胞共育,结果表明：PFP-C具有溶血功能,且在pH 7.5时活性最大,其溶血活性对Ca2+有明显的依赖性。     

鲤和草鱼杂交四倍体及其回交三倍体草鱼杂种的研究

进行了兴国红鲤♀×草鱼♂的杂交,杂种一代染色体数为142—156,众数值为146—152,系染色体自动加倍的异源四倍体。其外形和习性接近母本,两性均能成熟,雌、雄鱼分别与草鱼进行了回交。以草鱼为母本,杂种一代为父本的回交子代全部为草鱼形,草食性。以杂种一代为母本,草鱼为父本的回交子代一部分象草鱼,一部分象鲤,但草鱼形子代成活率较低,两个回交组合的子代均为三倍体,染色体数98—100,众数值98。1983年获得的杂种一代♀×草鱼♂的鲤鱼形回交杂种,已于1986年性成熟,雌、雄鱼分别与草鱼再次回交,获得了二次回交杂种。测定了红鲤、草鱼、杂种一代及其与草鱼回交子代的乳酸脱氢酶和过氧化物酶的同工酶,它们各有不同的电泳图谱。     

草鱼日粮中小肽对幼龄草鱼生长性能的影响

本实验研究了草鱼日粮中不同种类与含量的小肽对幼龄草鱼生长性能的影响。 4 5 0尾 3.74± 0 .2 3g的草鱼分为 6组 ,每组 75尾鱼 ,每 2 5尾鱼饲养于 0 .2 5m3 的水族箱中 ,每组设 3个平行水族箱。试验 1、2、3、4、5组日粮中分别添加 0 .2 5 %、0 .5 %、1%的虾蛋白肽和 0 .5 %鱼粉水解物、0 .5 %酶解酪蛋白 ,对照组为 1%的鱼粉。水温为 2 7.6±3.1℃ ,试验期为 5 6d。结果表明 :(1)试验各组草鱼其相对生长率、饲料效率、饲料蛋白保留效率和血浆中钙、磷、镁含量与小肽总量均高于对照组 ,与对照组有显著性差异 ;(2 )草鱼日粮中最适宜的虾蛋白肽添加量为 0 .5 % ;(3)草鱼日粮中添加一定比例的小肽可提高饲料表观消化率和蛋白消化率 ,增加血液循环中生物活性肽的含量 ,增加体内氮沉积 ,减少肝胰脏和肠系膜脂肪储积 ,从而提高草鱼对日粮中蛋白质的利用率和机体自身蛋白质合成能力。     

长江水系钱草鱼遗传结构及变异性的RAPD研究

采用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术对长江中游的湖北嘉鱼与江西瑞昌两个地理群体和中游的汉江和湘江两大水系的鲢和草鱼的群体进行了遗传学研究。发现长江水系链的遗传变异要高于草鱼,与现今生物量成反比的反常现象。鲢遗传多样性从大到小的分布是嘉鱼→湘江→瑞昌→汉江。草鱼遗传多样性从大到小的分布是瑞昌→汉江→湘江→嘉鱼,鲢和草鱼的遗传多样性地理分布并不一致。遗传分化指数Gst分别为12.3%和17.5%,表明鲢和草鱼的四个地理群体的遗传分化度较低,可能与地理较近和基因交流频繁有关。