低氧诱导因子在肾炎大鼠肾小管间质中的表达及氯沙坦的保护作用研究

目的:观察低氧诱导因子在肾炎大鼠肾小管间质中表达的变化以及氯沙坦对肾炎的保护作用。方法:雄性Wistar大鼠32只,随机分成假手术组、肾炎模型组、氯沙坦小剂量组、氯沙坦大剂量组各8只,假手术组不做肾脏切除,其他组在右肾切除后尾静脉注射标记抗体。给药组则按量分别灌胃给药,8周时处死。结果:大剂量给药组的血肌酐(Scr)、收缩压和24 h尿蛋白量较模型组显著降低,且小剂量给药组的血肌酐(Scr)和24h尿蛋白量较模型组也显著降低。小剂量组和大剂量组大鼠的肾间质面积较肾炎模型组均显著降低。HIF-1αmRNA大量表达于肾小管上皮细胞胞质和间质细胞胞质,且与模型组比较,小剂量给药组的HIF-1αmRNA显著降低;大剂量给药组较肾炎模型组HIF-1αmRNA的含量也显著降低。结论:氯沙坦可能可以通过影响低氧诱导因子(HIF-1α)的表达发挥对肾脏的保护作用。     

Roxadustat对肾缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的:探讨一种新型PHD抑制剂Roxadustat对小鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:假手术组(sham)、损伤组(IR)、损伤+低剂量给药组(IR+Rox10 mg/kg)以及损伤+高剂量组(IR+Rox25 mg/kg)。除假手术组外,其余各组分别于造模前1h、6h、12h给药,并于造模后6h、12h、24h、48h采血检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),1d、2d、5d取材肾脏进行病理检测。此外,利用HK-2细胞建立缺氧模型,测定给药后细胞活力和细胞凋亡情况的变化及凋亡通路蛋白和HIF-1α的表达情况。结果:与sham组和IR组相比,给药组Scr和BUN水平均明显降低,且高剂量组Scr和BUN水平显著低于低剂量组,且给药组形态学损伤更轻,细胞凋亡明显减少。细胞学实验显示,Roxadustat能提高低氧条件下HK-2细胞的活力,降低细胞凋亡,并抑制低氧导致的Bax升高,提高Bcl-2的表达,而用HIF-1α抑制剂2-MeOE2,可消除Roxadustat对凋亡的抑制作用。结论:Roxadustat能够通过上调HIF-1α表达,抑制线粒体途径凋亡通路相关蛋白表达,减少细胞凋亡,对小鼠肾脏缺血再灌注损伤产生保护作用。     

低氧诱导因子脯氨酰羟化酶与OS－9在大鼠低氧肺动脉高压中的协同作用

目的：研究HIF-1α、PHDs及OS-9的表达变化在低氧性肺动脉高压（HPH）中的作用和意义。方法：SD大鼠随机分5组（n=8）;对照组（C组）和低氧3、7、14和21d组,常压低氧复制HPH大鼠模型。原位杂交、RT-PCR检测mRNA表达,免疫组化、Westernblot检测蛋白质表达。结果：①HIF-1αmRNA对照纽和低氧3d无明显差异,低氧14d后表达明显增高;HIF-1α蛋白质低氧3d组表达明显增高,7d达高峰;②对照组PHD1mRNA呈阳性表达,各低氧组与对照组比较差异不显著,PHD1蛋白质在对照组强阳性表达,低氧14d下降,低氧21d保持较低水平;对照组PHD2mRNA呈阳性表达,低氧3d增高,14d达到高峰,21d维持高水平,其蛋白质表达趋势与mRNA相同;对照组PHD3mRNA和蛋白质表达不明显,低氧3dmRNA明显增高,蛋白质低氧3d明显增高,低氧7d保持高水平,低氧14d和21d下降。③OS-9mRNA在对照组呈强阳性表达,低氧3d后迅速降低,14d达到最低水平;其蛋白质表达趋势与mRNA相同。相关分析表明,肺小动脉壁OS-9蛋白质表达水平与OS-9mRNA呈正相关,与RVHI、mPAP、WA％及LA％呈负相关。结论：HIF-1α、PHDs及OS-9均在大鼠HPH的发病机制中发挥作用。OS-9可能通过增强PHDs的活性来调节HIF-1α的表达,从而在HPH的发生和发展中发挥作用。     

小檗碱对缺血性脑梗死大鼠氧化应激/炎症反应、血管生成的作用研究

摘要 目的：探讨小檗碱对缺血性脑梗死大鼠氧化应激/炎症反应、血管生成的作用。方法：选取60只SPF级SD大鼠,随机分为对照组、模型组和小檗碱组各20只。建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型。术后及给药后7d采用Longa标准评分评估大鼠神经功能。检测各组大鼠脑组织的抗氧化活性和炎症因子水平。采用免疫组化检测脑缺血再灌注皮质微血管密度（MVD）。采用实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测低氧诱导生长因子- 1 （HIF-1 ）和血管内皮生长因子（VEGF） mRNA表达水平。采用蛋白免疫印迹试验检测VEGF和HIF-1 蛋白表达水平。结果：模型组和小檗碱组大鼠术后具有神经功能缺损症状表现,Longa评分均高于对照组。给药7 d后,模型组和小檗碱组大鼠Longa评分均高于对照组（P＜0.05）,且小檗碱组大鼠Longa评分低于模型组（P＜0.05）。与对照组比较,模型组丙二醛（MDA）水平显著升高,而谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和超氧化物岐化酶（SOD）活性显著降低（P＜0.05）。与模型组比较,小檗碱组MDA水平显著降低,而GSH-Px和SOD活性显著升高（P＜0.05）。与对照组比较,模型组白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平显著升高（P＜0.05）。与模型组比较,小檗碱组IL-1β、TNF-α水平显著降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。给药7 d后,模型组和小檗碱组MVD、VEGF mRNA和HIF-1 mRNA表达水平均高于对照组（P＜0.05）,而小檗碱组MVD、VEGF mRNA和HIF-1 mRNA表达水平高于模型组（P＜0.05）。给药7 d后,小檗碱组和模型组VEGF和HIF-1 蛋白表达水平均高于对照组（P＜0.05）,而小檗碱组VEGF和HIF-1 蛋白表达水平高于模型组（P＜0.05）。结论：小檗碱通过抑制氧化应激/炎症反应、促进血管生成从而达到脑保护作用,其机制可能与激活HIF-1 /VEGF信号通路有关。     

川陈皮素对脑梗死缺血再灌注大鼠的保护作用及其机制研究

摘要 目的：研究川陈皮素对脑梗死缺血再灌注大鼠的保护作用及其机制。方法：将90只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组及低剂量组、中剂量组及高剂量组,每组15只。空白对照组不予以任何处理,模型组、低剂量组、中剂量组及高剂量组其余各组大鼠均采用Long线栓法构建脑梗死缺血再灌注模型,假手术组除了不插入拴线,其他操作和模型组相同。造模后,空白对照组、假手术组及模型组分别予以10 mL/（kg?d）的生理盐水灌胃,低剂量组、中剂量组、高剂量组分别予以10 mL/（kg?d）、15 mL/（kg?d）、20 mL/（kg?d）川陈皮素灌胃。检测各组大鼠梗死面积以及神经细胞凋亡率,缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）水平,炎症细胞因子水平,B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）表达情况。结果：模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组梗死面积、神经细胞凋亡率以及HIF-1α、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-β）、Bax mRNA、caspase-3 mRNA水平均高于空白对照组及假手术组;且低剂量组、中剂量组、高剂量组较模型组低;降低呈剂量依赖性（均P＜0.05）。模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组VEGF、Bcl-2 mRNA水平均低于空白对照组及假手术组;且低剂量组、中剂量组、高剂量组较模型组高;降低呈剂量依赖性（均P＜0.05）。假手术组梗死面积以及神经细胞凋亡率均高于空白对照组（均P＜0.05）。结论：川陈皮素对脑梗死缺血再灌注大鼠的保护作用明显,其主要机制可能与调控HIF-1α、VEGF、炎症细胞因子以及凋亡相关基因表达有关。     

转化生长因子β1和Snaill参与糖尿病大鼠肾小管上皮细胞向间充质细胞转变

本文旨在观察转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和锌指转录因子Snaill在糖尿病(diabetesmellitus,DM)大鼠.肾组织中的表达,并初步探讨它们与肾小管上皮细胞向间充质细胞转变的关系.链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发大鼠DM,按病程分为2、4、8、12、16、20、24周、16周胰岛素治疗(16wA)、20周胰岛素治疗(20wA)和24周胰岛索治疗(24wA)组(n=6).其中胰岛素治疗组动物从第13周起用胰岛素控制血糖至正常水平,每一时点均设鼠龄匹配的正常对照组.测定各组血糖、24 h尿蛋白、血肌酐(serum creatinine,Scr)、肾脏指数.PAS染色光镜观察肾脏病理学改变.免疫组织化学检测肾脏SnMll、TGF-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、E-钙黏素和纤连蛋白(fibronectin,FN)的表达;Western blot检测肾皮质SnailI、TGF-β1和E-钙黏素蛋白表达.RT-PeR检测肾皮质Snaill和E-钙黏素mRNA表达.结果显示:(1)DM各组大鼠的血糖、24 h尿蛋白、Scr、肾脏指数均较正常对照组明显升高(P<0.05,P<0.01),胰岛素治疗组大鼠上述指标均较DM组显著降低(P<0.01).(2)TGF-β1和Snmll免疫组织化学阳性染色见于DM各组大鼠肾小管,正常对照组未见阳性表达,胰岛素治疗组大鼠弱阳性表达,并随治疗时间延长而减少.从16周开始在DM大鼠肾小管上皮细胞可见α-SMA蛋白阳性表达,胰岛素治疗组大鼠未见α-SMA蛋白表达;DM组大鼠E-钙黏素蛋白阳性染色明显少于正常对照组.(3)DM组大鼠肾皮质TGF-β和Snaill蛋白以及Snaill mRNA表达较正常对照组显著增高(P<0.01),胰岛素治疗组大鼠则显著低于DM组(P<0.01);DM组E.钙黏素mRNA和蛋白表达与TGF-β1和Snaill呈相反变化.结果提示,TGF-βl和Snaill可能参与DM大鼠肾小管上皮细胞向问充质细胞转变,胰岛素治疗可抑制两者表达并阻断肾小管上皮细胞向间充质细胞转变.     

骨髓间充质干细胞对大鼠急性肾损伤的修复作用

目的：观察外源性骨髓间充质干细胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）对庆大霉素（Gentamycin,GM）诱导的大鼠急性肾损伤是否具有治疗作用,并初探其机制。方法：建立腹腔注射庆大霉素致大鼠急性肾损伤模型。实验分为舡常对照组、模型组、MSCs治疗组（模型＋MSCs）、生理盐水组（模型＋生理盐水）。于不同处理后4d分别检测血尿素氮（BUN）和肌酐（Scr）水平,观察肾组织病理改变,免疫印迹及RT-PCR法检测肾组织肝细胞生长因子（Hepatocyte growth factor,HGF）水平。结果：模型组大鼠的BUN及Scr较正常对照组显著升高,且肾小管组织病理损伤严重;而MSCs治疗组大鼠的BUN及Scr水平较生理盐水组显著降低,肾小管组织病理损伤明显减轻。此外。促肾小管损伤修复的肝细胞生长因子（HGF）表达在MSCs治疗组显著高于生理盐水组。结论：MSCs输注可促进庆大霉素所致急性肾小管损伤的修复,改善肾功能,其作用机制可能是与上调肾组织中肝细胞细胞生长因子的表达有关。     

RNA干扰沉默低氧诱导因子-1α对低氧下大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

本研究应用基因克隆技术,将合成的发卡样特异性低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1alpha,HIF-1α）干扰寡核苷酸（siRNA）序列插入真核表达载体中,构建出特异性HIF-1α基因RNA干扰（RNAi）真核表达载体。采用组织块种植法,原代培养大鼠肺动脉平滑肌细胞（pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs）,将构建出的特异性HIF-1αRNAi真核表达载体转染到PASMCs;分别在常氧和低氧下进行细胞培养,采用RT-PCR检测PASMCsHIF-1αmRNA表达水平,用MTT和流式细胞仪检测细胞增殖水平,探讨低氧条件下HIF-1αRNAi真核表达载体对PASMCs增殖的影响。结果表明,低氧培养48h后,正常PASMCs和转染了HIF-1αsiRNA阴性表达载体的细胞增殖显著,HIF-1αmRNA表达水平也显著升高;而转染了HIF-1αsiRNA阳性表达质粒的细胞增殖不显著,HIF-1αmRNA表达水平较低。结果提示：HIF-1αRNAi真核表达载体能显著干扰培养的PASMCsHIF-1αmRNA表达,同时抑制低氧环境下PASMCs的增殖。     

转化生长因子β1和snail1参与糖尿病大鼠肾小管上皮细胞向间充质细胞转变

本文旨在观察转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）和锌指转录因子Snail1在糖尿病（diabetes mellitus,DM）大鼠肾组织中的表达,并初步探讨它们与肾小管上皮细胞向间充质细胞转变的关系。链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱发大鼠DM,按病程分为2、4、8、12、16、20、24周、16周胰岛素治疗（16wA）、20,周胰岛素治疗（20wA）和24周胰岛素治疗（24wA）组（n=6）。其中胰岛素治疗组动物从第13周起用胰岛素控制血糖至正常水平,每一时点均设鼠龄匹配的正常对照组。测定各组血糖、24h尿蛋白、血肌酐（serum creatinine,Scr）、肾脏指数。PAS染色光镜观察肾脏病理学改变。免疫组织化学检测肾脏Snail1、TGF-β1、α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、E-钙黏素和纤连蛋白（fibronectin,FN）的表达;Western blot检测肾皮质Snail1、TGF-β1和E-钙黏素蛋白表达。RT-PCR检测肾皮质Snail1和E-钙黏素mRNA表达。结果显示：（1）DM各组大鼠的血糖、24h尿蛋白、Scr、肾脏指数均较正常对照组明显升高（P〈0．05,P〈0．01）,胰岛素治疗组大鼠上述指标均较DM组显著降低（P〈0．01）。（2）TGF-β1和Snail1免疫组织化学阳性染色见于DM各组大鼠肾小管,正常对照组未见阳性表达,胰岛素治疗组大鼠弱阳性表达,并随治疗时间延长而减少。从16周开始在DM大鼠肾小管上皮细胞可见α-SMA蛋白阳性表达,胰岛素治疗组大鼠未见α-SMA蛋白表达;DM组大鼠E-钙黏素蛋白阳性染色明显少于正常对照组。（3）DM组大鼠肾皮质TGF-β1和Snail1蛋白以及Snail1 mRNA表达较正常对照组显著增高（P〈0．01）,胰岛素治疗组大鼠则显著低于DM组（P〈0．01）;DM组E-钙黏素mRNA和蛋白表达与TGF-β1和Snail1呈相反变化。结果提示,TGF-β1和Snail1可能参与DM大鼠肾小管上皮细胞向间充质细胞转变,胰岛素治疗可抑制两者表达并阻断肾小管上皮细胞向间充质细胞转变。     

大鼠5/6肾切除慢性肾功能衰竭动物模型的实验研究

观察5/6肾切除大鼠模型中肾功能、肾脏病理改变、肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的变化,证明5/6肾切除可制作理想的慢性肾功能衰竭、肾间质纤维化动物模型。方法:大鼠随机分为假手术组(SOR)和5/6肾切除组。随机选取各组中的10只大鼠分别于5/6肾切除术后30、60和90天处死,收集血清与肾组织供生化及病理分析。结果:①5/6肾切除组24小时尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐水平明显高于假手术组(P<0.05)。②残肾的肾重/体重逐渐增加,到术后90天时,几乎接近假手术组大鼠左肾肾重/体重。③5/6肾切除后,残肾肾小球面积和肾小球毛细血管体积增加,肾小球硬化指数(GSI)及肾小管间质损伤评分(TIS)明显高于假手术组(P<0.05)。④免疫组化结果显示,5/6肾切除组肾间质和小管上皮细胞α-SMA表达增加。⑤肾小球面积、GSI、α-SMA表达与血肌酐、蛋白尿水平呈明显正相关性。结论:5/6肾切除可以建立伴慢性肾功能衰竭的肾间质纤维化动物模型。     

黄芪甲甙对急性心肌梗死大鼠心室重构和NOX/ROS/TNF⁃α信号通路的影响

研究旨在探究黄芪甲甙对急性心肌梗死大鼠心室重构的作用及其机制。选取36只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪甲甙低剂量组、黄芪甲甙中剂量组、黄芪甲甙高剂量组和阳性对照组,每组6只。除假手术组外,其余大鼠手术建立急性心肌梗死模型,假手术组大鼠开胸后仅分离冠状动脉左前降支,不做结扎处理便逐层缝合,造模后第2天开始药物干预：黄芪甲甙低、中、高剂量组分别给予20、40、60 mg·kg^-1黄芪甲甙灌胃处理,阳性对照组给予100 mg·kg^-1阿司匹林灌胃处理。比较各组治疗第0、2、4周心功能指标[左心室射血分数（left ventricular ejection fractions,LVEF）、左心室短轴缩短率（left ventricular fractional shortening,LVFS）、左心室质量指数（left ventricular mass index,LVMI）]的变化情况。采用心脏血流动力学监测系统监测心脏血流动力学指标[左心室舒张末压（left ventricular end diastolic pressure,LVEDP）、左心室收缩压（left ventricular systolic pressure,LVSP）和左心室等容收缩/舒张压上升最大速率（maximal rate of left ventricular pressure increase/decrease,±dp/dt_max）]的变化情况,采用酶联免疫吸附法测定血清血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ,AngⅡ）、内皮素1（endothelin-1,ET-1）、脑钠肽（brain natriuretic peptide,BNP）含量,试剂盒检测心肌组织活性氧（reactive oxygen species,ROS）含量,实时荧光定量PCR和Western blot检测大鼠心肌组织NADPH氧化酶（reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase,NOX）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α,TNF-α）mRNA相对表达量和蛋白表达水平。结果显示,治疗4周后,黄芪甲苷高剂量组和阳性对照组LVEF、LVFS随着治疗时间延长不断升高（P<0.05）;与相同治疗时间假手术组比较,模型组LVEF、LVFS均显著降低（P<0.05）;与治疗第0周模型组比较,各治疗组LVEF、LVFS差异无统计学意义（P>0.05）;治疗第2、4周与模型组比较,黄芪甲苷中剂量组、黄芪甲苷高剂量组和阳性对照组LVEF、LVFS显著升高（P<0.05）;与模型组比较,黄芪甲苷中剂量组、黄芪甲苷高剂量组和阳性对照组LVMI显著降低（P<0.05）,LVSP、LVEDP、±dp/dt显著升高（P<0.05）,血清AngⅡ、ET-1、BNP显著降低（P<0.05）,心肌组织ROS含量显著降低（P<0.05）,NOX、TNF-α基因和蛋白表达量显著降低。研究结果表明,黄芪甲甙可改善AMI大鼠心功能和血流动力学紊乱,抑制心室重构,可能与下调NOX/ROS/TNF-α信号通路表达有关。     

AS2O3抑制人结肠癌生长的体内外实验研究

目的：通过研究三氧化二砷（AS2O3）对人结肠癌细胞株LS-174T在体内外实验中增殖情况的影响,探讨As2O3治疗结肠癌的机制。方法：1、试验分组：体外细胞培养及体内动物实验均分三组：对照组,As2O3低剂量组,As2O3高剂量组。2、MTT法测定细胞增殖数的情况。3、丫啶橙/溴乙啶（AO/EB）双荧光染色检测细胞凋亡率。4、免疫组织化学法测定结肠癌细胞和裸鼠实体肿瘤中HIF-1α和VEGF的表达。5、测量各组裸鼠实体肿瘤的重量及体积。结果：体外试验中,由MTT法可以看出,As2O3治疗组细胞生存率明显低于对照组（P〈0.01）,其中AS2O3高剂量组明显低于低剂量组。双荧光染色结果As2O3高剂量组细胞凋亡百分率明显高于低剂量组和对照组（P〈0.01）。免疫组化结果显示结肠癌细胞HIF-1α和VEGF在对照组的阳性表达率明显高于As2O3治疗组（P〈0.01）,低剂量组高于高剂量组（P〈0.05）。体内实验中,治疗组平均瘤重和瘤体积均较对照组明显减低,（P〈0.01）。HIF-1α及VEGF在裸鼠肿瘤组织中均有阳性表达,其中对照组较AS2O3治疗组高（P〈0.01）。结论：As2O3能够抑制体内外人结肠癌细胞的生长,并能明显抑制HIF-1α和VEGF的表达,从而抑制肿瘤的生长。     

Modulation of kinin B1 receptor expression by endogenous angiotensin II in hypertensive rats

We investigated the expression and localization of B1 receptor in tissues of rats submitted to a renin-dependent model of hypertension (2K-1C), and analyzed the influence of endogenous Ang II in modulating the in vivo expression of these receptors. B1 mRNA levels in the heart, kidney and thoracic aorta were quantified by real time PCR, B1 receptor protein expression was assessed by immunohistochemistry, plasma Ang II levels were analyzed by radioimmunoassay and the effects of AT1 receptor blockade were determined after losartan treatment. 2K-1C rats presented a marked increase in Ang II levels when compared to sham-operated rats. In parallel, cardiac- (but not renal and aortic) B1 mRNA levels were 15-fold higher in 2K-1C than in sham rats. In 2K-1C, B1 expression was detected in the endothelium of small cardiac arteries and in cardiomyocytes. Losartan completely reverted the increased B1 mRNA levels and significantly decreased the protein expression observed in 2K-1C rats, despite reducing, but not normalizing blood pressure. We conclude that in the 2K-1C rat, induction of cardiac B1 receptor might be tightly linked to AT1 receptor activation. These data suggest the existence of a new site of interaction between kinins and angiotensins, and might provide important contributions for a better understanding of the pathophysiology of hypertension.     

HIF-1α 在垂体腺瘤中的表达及与垂体腺瘤侵袭性的关系

目的:研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在人垂体腺瘤中的表达,对HIF-1α蛋白表达与肿瘤分级进行相关性分析,探讨其表达水平与垂体腺瘤侵袭性的关系.方法:集影像学检查、内分泌学检查及病理诊断的垂体腺瘤60例,分为侵袭组和非侵袭组,其中侵袭组36例,非侵袭组24例;对照组正常脑组织5例.免疫组织化学技术检测HIF-1α蛋白的表达,结合临床资料进行统计学分析.分析垂体腺瘤HIF-1α蛋白的表达水平并与对照组进行比较,比较侵袭组和非侵袭组垂体腺瘤之间HIF-1α蛋白表达水平的差异.结果:HIF-1α蛋白在垂体腺瘤中的表达明显高于对照组,二者比较,x20.05,1=12.392,P＜0.001,有显著性差异;侵袭组HIF-1α蛋白的表达较非侵袭组显著增高,二者比较,x20.05.1=24.658,P＜0.001,有显著性差异.结论:H1F-1α是垂体腺瘤侵袭过程中的重要调控因子,与垂体腺瘤的大小、分级以及侵袭性密切相关,其作用机制有待进一步研究,其表达程度可用作垂体腺瘤预后的评估指标,为垂体腺瘤术后的复发以及相应的辅助治疗提供判断依据.有可能为人们靶向肿瘤缺氧来开发新药物提供新的作用靶点.     

苦参素对肾间质纤维化大鼠单核巨噬细胞浸润及MCP-1表达的影响

目的 观察苦参素对肾间质纤维化大鼠单核巨噬细胞（MC/MP）浸润,MCP-1及Ⅰ型胶原表达的影响。方法 大鼠行单侧输尿管结扎（UUO）建立肾小管间质纤维化模型。实验分为3组：假手术组,UUO组,苦参素治疗组。治疗组在UUO的基础上每天以苦参素100mg/Kg腹腔注射。各组于术后第14d分别处死5只大鼠。用PAS及Masson染色法观察肾脏病理改变。用免疫组织化学法观察肾间质ED-1阳性的MC/MP细胞浸润,单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）及Ⅰ型胶原（ColⅠ）的表达。结果 苦参素治疗组肾间质MC/MP细胞浸润数及MCP-1,ColⅠ的表达显著低于UUO组,肾小管变性和肾间质纤维化的程度也明显减轻。结论 苦参素可下调UUO大鼠肾间质MCP-1的表达,减少MC/MP细胞浸润,减轻肾间质纤维化。     

Losartan Improved Antioxidant Defense,Renal Function and Structure of Postischemic Hypertensive Kidney

Ischemic acute renal failure (ARF) is a highly complex disorder involving renal vasoconstriction, filtration failure, tubular obstruction, tubular backleak and generation of reactive oxygen species. Due to this complexity, the aim of our study was to explore effects of Angiotensin II type 1 receptor (AT1R) blockade on kidney structure and function, as well as oxidative stress in spontaneously hypertensive rats (SHR) after renal ischemia reperfusion injury. Experiments were performed on anaesthetized adult male SHR in the model of ARF with 40 minutes clamping the left renal artery. The right kidney was removed and 40 minutes renal ischemia was performed. Experimental groups received AT1R antagonist (Losartan) or vehicle (saline) in the femoral vein 5 minutes before, during and 175 minutes after the period of ischemia. Biochemical parameters were measured and kidney specimens were collected 24h after reperfusion. ARF significantly decreased creatinine and urea clearance, increased LDL and lipid peroxidation in plasma. Treatment with losartan induced a significant increase of creatinine and urea clearance, as well as HDL. Lipid peroxidation in plasma was decreased and catalase enzyme activity in erythrocytes was increased after losartan treatment. Losartan reduced cortico-medullary necrosis and tubular dilatation in the kidney. High expression of pro-apoptotic Bax protein in the injured kidney was downregulated after losartan treatment. Our results reveal that angiotensin II (via AT1R) mediates the most postischemic injuries in hypertensive kidney through oxidative stress enhancement. Therefore, blockade of AT1R may have beneficial effects in hypertensive patients who have developed ARF.     

右归丸对大鼠膝骨关节炎的干预作用及其机制*

目的: 探讨右归丸对膝骨关节炎(KOA)模型鼠关节软骨组织骨诱导因子(OGN)、骨黏连蛋白(ON)和纤维蛋白原2(FBN2)的影响。方法: 将大鼠随机分为假手术组,模型组,硫酸氨基葡萄糖组(硫酸氨基葡萄糖),右归丸(高、中、低剂量)组,每组10只。采用改良Hulth法制备大鼠KOA模型,假手术组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,右归丸高、中、低剂量组分别灌胃给予右归丸4.8,2.4,1.2 g/kg,硫酸氨基葡萄糖组灌胃给予硫酸氨基葡萄糖 0.17 g/kg,连续给药8周。干预结束24 h后取鼠膝关节软骨,采用HE染色法观察各组软骨的病理改变,并进行Mankin评分;免疫组化法检测各组关节软骨组织中OGN、ON和FBN2的表达;Western blot法检测各组关节软骨组中糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的表达。结果: 与假手术组比较,模型组大鼠软骨组织Makin 评分显著升高,软骨组织FBN2蛋白表达水平上显著增加,OGN、ON和GSK-3β蛋白表达水平上的显著降低(P＜0.01);模型组关节软骨边缘严重破坏,软骨细胞排列紊乱。与模型组比较,右归丸高剂量干预组大鼠软骨组织Makin 评分和FBN2蛋白表达水平显著降低,GSK-3β蛋白表达水平上显著增加,且右归丸中、高剂量组OGN、ON蛋白表达水平均显著增加(P＜0.05或P＜0.01),软骨结构趋于正常,软骨细胞分布仅偶见不均,关节软骨表面欠光滑。结论: 右归丸能够延缓关节软骨退变,其可能机制是通过提高骨诱导因子和骨粘连蛋白的表达水平来促进关节软骨的骨化和重构。     

大鼠脑损伤后非损伤区域缺氧诱导因子与乳酸的变化研究

目的：研究大鼠脑损伤后非损伤区域缺氧诱导因子（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）与乳酸的表达变化。方法：取雄性SD大鼠36只,体重200-300g,参照统计学随机数字表将大鼠随机平均分为正常对照组（6只）、假手术组（6只）、造模组（24只）,3组,造模组分四个时间点12h、72h、1w、2w处死动物（每时间点6只）。使用立体定位仪和液压打击装置,靶向打击大脑中动脉,造大鼠脑外伤模型。采用免疫组织化学法检测脑外伤后不同时间点损伤临近区域脑组织中HIF-1α蛋白表达及乳酸含量的变化。结果：正常组和假手术组脑组织神经细胞HIF-1α表达和乳酸含量无明显变化,而模型组损伤临近区域HIF-1α的表达及乳酸含量的变化规律基本一致,12 h时增多,72h时达到高峰,1w表达下降至2w时恢复正常。造模组12h、72h、1w3个亚组与正常对照组比较差异具有统计学意义p〈0.01,造模组2w亚组与正常对照组比较差异无统计学意义p〉0.01。结论：脑外伤后非损伤区域也有缺血、缺氧的改变,可能与脑外伤后的脑萎缩有相关性。     

氯沙坦对机械通气大鼠肺组织TNF-α和MPO表达的影响

目的通过观察AngⅡ受体拮抗剂——氯沙坦对呼吸机所致肺组织TNF-α水平和髓过氧化物酶（MPO）活性的影响,探讨氯沙坦对呼吸机所致肺损伤的保护作用。方法 24只健康雄性Wister大鼠随机分为对照组、呼吸机所致肺损伤组（VILI）和氯沙坦干预组（LAP）,分别采用ELISA法测定大鼠肺组织中血管紧张素II（AngⅡ）含量,采用免疫组织化学染色法测定大鼠肺组织TNF-α蛋白表达水平,采用化学比色法测定肺组织匀浆中MPO活性。结果 VILI组大鼠肺组织AngⅡ含量、TNF-α蛋白表达水平以及肺组织匀浆中MPO活性均明显高于对照组（均P〈0.01）。氯沙坦干预组大鼠肺组织AngⅡ含量与VILI组比较无明显差异（P〉0.05）,但肺组织TNF-α蛋白表达水平、肺组织匀浆中MPO活性和肺W/D比值均较VILI组明显降低（均P〈0.01）,同时肺组织病理损伤程度也较VILI组明显减轻。结论 AngⅡ通过调控肺组织中TNF-α的表达在VILI发病中起重要作用,氯沙坦可阻断AngⅡ与AT1受体的结合,下调肺组织TNF-α表达,降低MPO的活性,对VILI具有一定防治作用。     

Increased renal adrenomedullin expression in rats with ureteral obstruction

Ureteral obstruction is characterized by decreased renal blood flow that is associated with hypoxia within the kidney. Adrenomedullin (AM) is a peptide hormone with tissue-protective capacity that is stimulated through hypoxia. We tested the hypothesis that ureteral obstruction stimulates expression of AM and hypoxia-inducible factor-1 (HIF-1alpha) in kidneys. Rats were exposed to bilateral ureteral obstruction (BUO) for 2, 6, 12, and 24 h or sham operation and compared with unilateral obstruction (UUO). AM mRNA expression was measured by quantitative PCR in cortex and outer medulla (C+OM) and inner medulla (IM). AM and HIF-1alpha protein abundance and localization were determined in rats subjected to 24-h BUO. AM mRNA expression in C+OM increased significantly after 12-h BUO and further increased after 24 h. In IM, AM mRNA expression increased significantly in response to BUO for 6 h and further increased after 24 h. AM peptide abundance was enhanced in C+OM and IM after 24-h BUO. Immunohistochemical labeling of kidneys showed a wider distribution and more intense AM signal in 24-h BUO compared with Sham. In UUO rats, AM mRNA expression increased significantly in IM of the obstructed kidney compared with nonobstructed and Sham kidney whereas AM peptide increased in IM compared with Sham. HIF-1alpha protein abundance increased significantly in IM after 24-h BUO compared with Sham and HIF-1alpha immunoreactive protein colocalized with AM. In summary, AM and HIF-1alpha expression increases in response to ureteral obstruction in agreement with expected oxygen gradients. Hypoxia acting through HIF-1alpha accumulation may be an important pathway for the renal response to ureteral obstruction.