共查询到20条相似文献,搜索用时 712 毫秒
1.
鸡马立克氏病病毒B抗原片段在大肠杆菌中表达 总被引:1,自引:0,他引:1
鸡马立克氏病病毒BamHI基因文库I3质粒中含有编码B抗原膜外Domain的DNA序列。经ScaI和SphI双酶酶解I3质粒,分离获得764bpDNA片段,并克隆进M13mp19中。DNA序列测定分析表明克隆片段为MDV-B抗原基因的494-1258bp部分序列。进一步分离NcoI-HindIII部分基因片(530bp),克隆于PLPromoter控制下的含有修饰型cIts857基因的表达载体中, 相似文献
2.
恒河猴Fas基因的克隆 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究猴艾滋病发病机制中细胞凋亡的作用,克隆凋亡相关基因Fas的cDNA序列。方法从恒河猴腹股沟淋巴结中提取总RNA,根据人的Fas cDNA序列设计上、下游引物,通过RT-PCR扩增出目的cDNA片段,将这一片段克隆到pGFM-T Easy载体中,筛选阳性克隆并进行序列测定。结果首次克隆了恒河猴Fas基因,编码序列为1005 bp,将其序列提交GenBank,收录号为AY007572。结论克隆的新序列与GenBank已收录的人和食蟹猴的Fas基因在编码序列的长度上稍有区别,人的编码序列为1008bp,食蟹猴的为996 bp。 相似文献
3.
4.
抗肿瘤单抗3H11对应抗原cDNA片段的克隆 总被引:1,自引:0,他引:1
单克隆抗体3H11能与多种肿瘤细胞特异结合,克隆其对应抗原无疑具重要意义.用胃癌细胞MGC803构建cDNA表达文库,通过抗体3H11对其进行原核表达筛选,获得一株能与3H11特异反应的阳性克隆.其cDNA插入片段为554bp.GenBank不含其同源序列.将此cDNA片段与谷胱甘肽转移酶表达质粒pGEX-4T重组,Westernblot和竞争抑制实验表明,表达产物依然保持同3H11反应的特异性.可见它是3H11对应抗原的cDNA. 相似文献
5.
植物甜蛋白mabinlinⅡcDNA的克隆与序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
根据已由作者克隆的mabinlinⅡB亚基185bp的cDNA片段,设计合成系列引物.从马槟榔(CapparismasaikaiLévl.)种子提取总RNA并纯化mRNA,经反转录合成cDNA第一链.采用RACE方法,快捷克隆mabinlinⅡ全长cDNA.经序列测定与分析,该cDNA为583bp,其中编码序列长465bp,共编码155个氨基酸. 相似文献
6.
采用人结核分枝杆菌染色体DNA为模板,选择位于插入片段IS6110中884 ̄865和568 ̄588碱基对处的两个片段为引物,扩增出317bp的特异性片段,将共克隆进pUC19载体,酶切酶谱分析和DNA序列测定证实为目的片段。 相似文献
7.
传染性法氏囊病病毒中国强毒株A节段cDNA基因的克隆和序列分析 总被引:9,自引:2,他引:7
以来自哈尔滨传染性法氏囊病病毒(IBDV) 强毒株(Harbin 毒株,H) 的基因组RNA为模板,用反转录聚合酶链反应(RT- PCR) 的方法得到了其A 节段的全长cDNA 片段,分5'端(1 659bp) 和3'端(1 444bp) 上下两段分别克隆到pGEMB○R - T 载体上,测定了其核苷酸顺序,在长为3 101 bp 中含有两个阅读框ORFA1 和ORFA2 ,分别编码1 012 个氨基酸的前体蛋白(VP2 - 4 -3) 和145 个氨基酸的VP5,ORFA1 和ORFA2 有部分的重叠。将核苷酸序列及推测出的氨基酸序列与已报道的IBDV 血清Ⅰ型和Ⅱ型毒株的相应序列进行了比较,结果表明:H 毒株与其它血清Ⅰ型毒株之间,在核苷酸水平上存在25bp - 267bp 的差异;在氨基酸水平上存在17 ~40 个氨基酸的差异。在VP2 - 4 - 3 内比较显示,H 毒株与P2 、Cu- 1 之间氨基酸的差异最小为1 .7% ,H 毒株与UK661 之间氨基酸的差异最大为3 .9 % 。变异主要发生在VP2 的可变区(206 - 350 位氨基酸) ,在H 毒株所特有的12 个氨基酸当中,该区就占5 个,代表1 .76 % 的变异。VP4、VP3 和VP5区各有 相似文献
8.
大鼠肝脏脂酶基因的PCR扩增,序列分析和克隆 总被引:1,自引:0,他引:1
报导了应用聚合酶链式反应技术,扩增大鼠肝脏脂酶基因及其克隆和序列分析的结果,经31个循环的坟增,得到大鼠肝脏脂酶及其N端结构域的cDNA,前为1508bp的片段,后为1076bp的片段。克隆事,对此二片估进行一限制性内切酶物理图谱分析,测定了DNA序列,并已将它们克隆表达载体pGT-d中。 相似文献
9.
大熊猫犬瘟热病毒融合蛋白基因3‘端的序列测定 总被引:1,自引:0,他引:1
从死亡大熊猫的肝脏中直接提取细胞总RNA,经反转录后,用犬瘟热病毒的两对引物,分两段扩增出融合蛋白基因3'端的片段。经序列分析表明:此片段的长度为693bp;此毒株在核苷酸和氨基酸水平与某疫苗弱毒株、Onderstepoort弱毒株、海豹瘟热病毒2型毒株和海豹瘟热病毒1型的同源性分别为97.5%和96.2%、88.6%和94.5%、92.9%和95.6%、63.2%和76.5%;大熊猫毒株与其它毒 相似文献
10.
陈丽 《植物生理与分子生物学学报》1999,25(2)
在水稻蜡质基因5’上游区中一段31bp 核苷酸序列能与水稻未成熟种子核蛋白特异结合。为了克隆这一核蛋白基因,以此31 bp 序列构建成“鱼饵”质粒,从水稻cDNA文库中筛选到13 个阳性克隆。根据这些阳性克隆中插入cDNA 片段的相互杂交结果,对这些克隆进行了分组。 相似文献
11.
应用酵母单杂交系统分离水稻蜡质基因5‘调控区结合蛋白的基因 总被引:3,自引:0,他引:3
在水稻蜡质基因5‘上游区中一段31bp核苷酸序列能与水稻末成熟种子核蛋白特异结合。为了克隆这一核蛋白基因,以此31bp序列构建成“鱼饵”质粒,从水稻cDNA文库中筛选到13个阳性克隆,根据这些阳性克隆中插入cDNA片段的相互杂交结果,对这些克隆进行了分组。 相似文献
12.
用Nested-PCR方法从含Ds因子的转基因烟草DNA中克隆了Ds因子在烟草染色体插入位点的9个旁邻DNA片段,以这些片段作探针,和野生型烟草的DNA进行Southern杂交,以检测这些片段在烟草染色体上的低拷贝DNA。另外,对这些DNA片段进行核苷酸序列测定,并将它们的顺序与Genbank数据中已有的核苷酸序列相比较,其中长度为128核苷酸的片段1和荷兰芹的4CL-2基因的一个区段有57.8% 相似文献
13.
以分离提取的HeLa细胞总RNA为模板,通过RT-PCR反应扩增得到了1017bp的人可溶性白细胞介素6受体(sIL-6R)cDNA片段,将扩增片段克隆到pUC19质粒中进行序列测定。结果证明该片的序列与文献报道的sIL-6RcDNA的序列完全一致,将sIL-6RcDNA与链霉素信号肽melCl的编码序列融合后得到的融合基因mel/sIL-6R克隆到链霉菌质粒pLJ459中,构建成重组表达质粒pL 相似文献
14.
15.
水稻中编码甘油—3—磷酸转酰酶部分cDNA的克隆及序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
参照国外报道的几种双子叶植物的甘油-3-磷酸转酰酶的相对保守的氨基酸序列,设计并合成了一对简并引物,提取抗冷性强的水稻品种“丽梗2号”的RNA,采用RT-PCR技术,扩增出315bp的一般cDNA片段。扩增产物经纯化后直接克隆到pGEM-T载体系统中,经PCR法鉴定,所得的重组质粒中含有315bp的片段。 相似文献
16.
在以前工作中我们从人精子中分离纯化出一种与生育有关的糖蛋白,命名为BS-17。本文用其多克隆抗血清从人睾λgt11cDNA表达库中克隆了编码BS-17的cDNA片段。序列分析表明BS-17cDNA片段长791bp,开放阅读框架558bp,可编编码186个氨基酸。经数据库检索,该cDNA片段与人Calpastatin蛋白质羧基末端同源性为99.5%。用cRNA进行组织原位杂交结果表明,BS-17基因 相似文献
17.
苎麻疫霉激发蛋白基因断裂现象初探 总被引:4,自引:0,他引:4
苎麻疫霉可分泌具有诱抗作用的激发蛋白(α-elicitin),根据α-clicitin第24 ̄30和56 ̄63位保守区氨基酸推导的寡核苷酸引物序列,对苎麻疫霉基因组DNA进行特异PCR扩增反应,发现其扩增的DNA片段大于预计的片段。回收纯化的特异扩增DNA,并进行克隆和测序分析,结果表明特异扩增的clicitin基因亚克隆DNA为570bp,大于预计的117bp。在特异片段中,存在3个内含子将基因 相似文献
18.
一种强启动子的分离与功能 总被引:5,自引:0,他引:5
以棉花曲叶病毒(CLCuV)侵染的番茄叶片组织总DNA为模板,通过PCR反应扩增CLCuV双向启动子片段并插入克隆载体。序列分析和同源性比较表明,克隆的启动子长436bp,与目前发现的4类CLCuV分离物的启动子序列的同源性最高为99.32%。将启动子片段分别以不同方向与gus报告基因和nos终止子融合,构建了瞬时表达载体。通过基因枪法将质粒载体导入烟草(Nicotiana tabacum L.) 相似文献
19.
水稻蜡质基因5‘端上游顺序中的核蛋白结合区 总被引:4,自引:0,他引:4
通过wx基因转录起始点上游2120bp长的DNA序列的测定,用不同的限制性内切酶对此片段进行消化,获得15个大小不同的DNA片段并构建成不同的亚克隆。 相似文献
20.
从死亡大熊猫的肝脏中直接提取细胞总RNA,经反转录后,用犬瘟热病毒的两对引物,分两段扩增出融合蛋白基因3′端的片段。经序列分析表明:此片段的长度为693bp;此毒株在核苷酸和氨基酸水平与某疫苗弱毒株、Onderstepoort弱毒株、海豹瘟热病毒2型毒株和海豹瘟热病毒1型的同源性分别为97.5%和96.2%、88.6%和94.5%、92.9%和95.6%、63.2%和76.5%;大熊猫毒株与其它毒株融合蛋白3′端疏水性和二级结构均有一定差异;其非编码区比国外报道的Onderstepoort弱毒株多9个碱基,在非编码区最后58个碱基,两毒株仅有17个相同。至于这种差异的生物学意义尚待进一步的研究 相似文献