从新型冠状病毒疫情看生物安全三级实验室的应急能力及内涵建设

面对突发疫情,生物安全三级（biosafety level 3,BSL-3）实验室是否能及时启动并稳定、安全运行,为科研攻关提供安全、可靠的技术平台,是对实验室应急能力的考验。针对2019年12月爆发的2019冠状病毒病疫情,复旦大学BSL-3实验室在接到任务后,立即按照国家规定,启动实验室冠状病毒新实验活动申请流程。经国家合格评定认可委员会（China National Accreditation Service for Conformity Assessment,CNAS）和国家卫生委员会批准,实验室在开展实验活动一周内就从来自上海患者标本中分离到新型冠状病毒毒株,体现了平时实验室内涵建设的重要性。BSL-3实验室的内涵建设包括实验室风险评估及管理、不同人员针对性培训、设施和设备管理等生物安全管理体系的建设。本文将介绍复旦大学BSL-3实验室在应急能力及内涵建设方面的经验和体会,期望对BSL-3实验室的建设和管理提供参考。     

上海市（复旦大学附属）公共卫生临床中心生物安全三级实验室

上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心生物安全三级实验室(简称中心BSL-3实验室)于2005年建造,同年通过国家建筑工程质量监督检验中心对实验室建筑结构的设计、实验室规范等各项指标的验收,获得<上海市公共卫生中心BSL-3实验室工程>检验报告.中心BSL-3实验室位于科研中心二楼北侧自成隔离区的建筑物内,周围最近的居民居住区在180m外.     

生物安全三级实验室的工作满意度现状及其与职业紧张程度的关联

因生物安全三级(BSL-3)实验室工作人员需在特殊工作环境中对高致病性病原微生物进行操作,其心理健康状态可影响实验室生物安全。本研究以工作满意度作为早期心理健康状况的评估指标,对江苏、浙江、上海、福建、湖北5个省市6家BSL-3实验室工作人员进行调查,分析工作满意度与职业紧张程度的关联。调查结果显示,BSL-3实验室人员的工作满意率为32.2%。职业紧张程度与工作满意度呈负相关。工作要求-自主(JDC)模式中"社会支持"是提高工作满意度的因素,高社会支持组比数比(OR)值为4.60(95%CI为1.25~16.97)。付出-回报失衡(ERI)模式中"内在投入"是降低工作满意度的因素,高内在投入组OR值为0.03(95%CI为0.00~0.28)。分析结果提示,可通过加强"社会支持"和解除过度"内在投入"等措施,降低BSL-3实验室人员的职业紧张程度,从而提高工作满意度。     

生物安全三级实验室人员管理相关问题的探讨

在生物安全三级(BSL-3)实验室日常管理工作中,实验人员的管理是实验室安全运转的关键,可保证生物安全管理体系文件的准确执行,减少安全隐患.我们总结了数年来管理BSL-3实验室的经验和教训,对人员管理有关问题提出想法和建议,以供参考.     

实验室生物安全备案及管理系统模型的建立与应用研究

目前对BSL-1和BSL-2级病原微生物实验室国家规定需向市级政府卫生主管部门或者兽医主管部门备案,对其实验操作内容、仪器设备情况、人员培训考核等均有相应的考核监督机制,但强调不够。病原微生物实验室生物安全管理工作是关系到经济发展、社会稳定、人民群众身体健康和生命安全的大事,任何疏忽都可能造成难以弥补的损失。本研究借鉴、整合目前国际上较有效的病原微生物实验室生物安全管理方法、制度等,根据国内病原微生物实验室的实际情况,利用先进的计算机技术,针对BSL-1和BSL-2级病原微生物实验室建立一套能够对实验室生物安全进行规范化管理的系统模型,根据本单位内部考核相关指标验证体系,使得病原微生物实验室的生物安全问题得到统一规范管理。     

埃博拉假病毒小鼠攻毒模型的建立与评估

埃博拉病毒具有极大的危险性,对其活病毒相关的操作必须严格限制在生物安全四级实验室（BSL-4）中,阻碍了疫苗和治疗药物的研发进程。本研究将扎伊尔埃博拉病毒（EBOV）膜表面糖蛋白（GP）表达质粒与携带荧光素酶报告基因的pNL4-3.Luc.R-E-慢病毒载体共转染至HEK293T细胞,包装HIV骨架的EBOV GP-Fluc假病毒颗粒,建立了BSL-2条件下基于假病毒和生物发光成像（BLI）技术的BALB/c小鼠EBOV感染模型,并通过不同给药时间、途径和抗体种类的系统评估对其可靠性进行了验证。腹腔注射包含GP全长的假病毒在第4d可检测到集中于胸腺部位的最大发光信号,测试抗体在预防性静脉给药时可完全阻断假病毒的感染,在暴露后腹腔给药时表现出与其在活病毒小鼠模型中一致的保护效力。该模型为埃博拉病毒以及类似烈性病原体防治药物研发提供了一种简单有效的前期筛选方案。     

医学病毒学生物安全三级动物实验室的建立

目前国内多个机构已建立了BSL-3实验室,这些实验室能够满足细胞水平和动物水平的病原微生物实验活动.医学病毒学生物安全三级动物实验室(ABSL-3)可分为小动物实验室和中(大)动物实验室.小动物实验室主要开展小鼠、大鼠、仓鼠等啮齿类动物的感染性实验活动;中(大)动物实验室主要开展小型猪、猴等实验.动物三级实验室特别是开展中(大)动物实验的高等级实验室,其实验室布局,设备设施,管理体系及流程会有很大的差别.本文从使用者的角度,通过所在机构医学病毒学生物安全三级动物实验室(ABSL-3)的建设与实践,对于筹备和建立以及使用过程中的所面对的问题以及应对,进行了提炼和归纳,分析和探讨,旨在为建设和使用医学病毒学高致病性生物安全三级动物实验室提供借鉴和参考.     

美国能源部与风险投资公司合作推动清洁能源技术实用化进程

美国能源部（DOE）于2008年选择了3家风险投资公司参与其新设立的入驻企业家（Entrepreneur in Residence，EIR）风险投资模式的试验性项目。这些EIR项目于2007年10月设立，是为了加速DOE旗下的3家美国国立实验室开发的先进清洁能源技术的商业化进程。每家风险投资公司可选派一名具有筹办企业能力的人才前往3家实验室中的一家。     

老年慢性心力衰竭患者甲状腺激素水平与认知功能、心功能及心血管事件的关系研究

摘要 目的：探讨老年慢性心力衰竭（CHF）患者甲状腺激素（TH）水平与认知功能、心功能及心血管事件的关系。方法：将我院2018年6月～2020年6月收治的140例老年CHF患者纳入研究,检测患者TH指标[血清三碘甲状腺原氨酸（T₃）、游离三碘甲状腺原氨酸（FT₃）、甲状腺素（T₄）、游离甲状腺素（FT₄）、促甲状腺激素（TSH）]水平。按蒙特利尔认知评估量表（MoCA）评分将患者分为认知障碍组（MoCA评分＜26分）、非认知障碍组（MoCA评分≥26分）,比较两组各TH指标与MoCA评分。比较不同纽约心脏病协会（NYHA）分级患者的TH指标与心功能指标[左室射血分数（LVEF）、左室舒张末期内径（LVEDD）、左室收缩末期内径（LVESD）]。根据患者住院期间是否发生心血管事件分为心血管事件组和非心血管事件组,比较两组各TH指标。经Pearson线性相关分析TH指标与MoCA评分、心功能指标的相关性。结果：认知障碍组血清T₃、FT₃水平及MoCA评分较非认知障碍组明显降低（P＜0.05）。Ⅲ级、Ⅳ级组的血清T₃、FT₃水平及LVEF较Ⅰ级、Ⅱ级组显著降低,其中Ⅳ级组低于Ⅲ级组（P＜0.05）。Ⅲ级、Ⅳ级组的LVEDD、LVESD较Ⅰ级、Ⅱ级组明显升高,且Ⅳ级组高于Ⅲ级组（P＜0.05）。心血管事件组血清T₃、FT₃水平较非心血管事件组显著降低（P＜0.05）。Pearson线性相关分析显示：血清T₃、FT₃水平与MoCA评分、LVEF呈正相关（均P＜0.05）,与LVEDD、LVESD呈负相关（均P＜0.05）。结论：老年CHF患者血清T₃、FT₃水平下调与其认知功能、心功能降低及心血管事件的发生密切相关,通过检测其血清T₃、FT₃水平,有利于进一步了解其病情变化。     

慢性乙肝肝硬化患者肝性脑病不同分级与肝脏储备功能的相关性

目的 回顾性研究分析慢性乙肝肝硬化并发不同分级的肝性脑病（HE）患者的临床特点，探究影响HE患者预后的因素。方法 将380例HE患者根据临床症状进行分级，分为1～4级。分析各级HE患者的性别、年龄、实验室检查情况、终末期肝病模型（MELD）、谷草转氨酶与血小板计数比值（APRI）及白蛋白与总胆红素比值（ALBI）。采用Spearman相关性分析轻、重型HE的影响因素，并使用多因素Logistic回归法分析HE预后的影响因素，最后选用ROC曲线来评估各种独立变量对HE预后的预测价值。结果 1～4级HE患者组间性别、年龄差异均无统计学意义（均P>0.05），而血氨、MELD、APRI和ALB差异均有统计学差异（均P<0.05）。轻、重型HE患者中性粒细胞计数和淋巴细胞计数的比值（NLR）、血氨、总胆红素（TBil）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、MELD、APRI及ALBI差异有统计学意义（均P<0.05）。相关性分析显示，NLR、PLR、血氨、TBIL、ALT、AST及TNF-α是重型HE的独立影响因素。血氨及MELD评分与肝脏...     

从“废弃”DNA中寻宝

从“废弃”ＤＮＡ中寻宝人类基因组研究是举世闻名的生命科学中的最大研究课题，目前正在加速进行。自美国能源部（ＤＯＥ）首先发起后，美国卫生署（ＮＩＨ）也成立了国家人类基因研究中心，除原来３个实验室外，还要建立２０个实验室从事此项研究。英、法、日等国也成立...     

血清Gal-3、NT-pro-BNP及hs-CRP水平与慢性心力衰竭超声心动图指标的相关性研究

摘要 目的：探讨血清半乳糖凝聚素-3（Gal-3）、氨基末端脑钠肽前体（NT-pro-BNP）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）水平与慢性心力衰竭超声心动图指标的相关性。方法：选择2018年2月～2019年10月我院收治的慢性心功能衰竭患者112例作为研究组,按美国心脏病协会（NYHA）分级分为Ⅱ级组43例、Ⅲ级组39例、Ⅳ级组30例,另选择同期我院体检的健康人员60例作为对照组,比较研究组和对照组及不同心功能分级的慢性心力衰竭患者血清Gal-3、NT-pro-BNP、hs-CRP 水平和超声心动图指标,分析慢性心力衰竭患者上述指标之间的相关性。结果：研究组血清Gal-3、NT-pro-BNP、hs-CRP水平显著高于对照组,E峰与A峰比值（E/A）及左心室射血分数（LVEF）显著低于对照组（P＜0.05）。随NYHA分级增加,慢性心力衰竭患者血清Gal-3、NT-pro-BNP、hs-CRP水平逐渐升高,E/A和LVEF逐渐降低（P＜0.05）。经Pearson相关性分析显示,慢性心功能衰竭患者血清Gal-3、NT-pro-BNP、hs-CRP分别与E/A、LVEF水平呈负相关关系（P＜0.05）。结论：慢性心力衰竭患者血清Gal-3、NT-pro-BNP、hs-CRP水平异常升高,与超声心动图指标相关,检测Gal-3、NT-pro-BNP、hs-CRP有助于慢性心力衰竭的诊断和病情评估。     

蛋白质双向电泳双胺染色方法的改进

讨论了蛋白质双向电泳检测的各种方法,并对本实验室使用过的两种银染方法（非双胺银染及双胺银染）进行对比研究。发现本实验室改进的双胺银染色方法具有以下特点：（1）背景异常清晰,蛋白质与底色反差大;（2）敏感度大大提高,检测最低蛋白质量可达fg级,对微量表达的蛋白质具有极好分离效果。能清晰地检测出低丰度表达的蛋白质。     

50例食管癌住院患者营养状况评价及影响因素分析

目的：了解食管癌住院患者营养状况及其影响因素,为改善其营养状况提供临床依据。方法：收集2015年3—5月期间新桥医院胸外科食管癌住院患者共50例,患者入院后2d内对其进行连续3d 24h膳食回顾调查、SGA评价、人体测量和实验室检查等。结果：参照中国居民膳食营养素推荐摄入量（DRIS）,被调查患者能量、蛋白质、碳水化合物、脂肪、VA当量、VE、VC、VB1、VB2、VB3、Ca、Fe、Zn、Se等营养素的摄入量严重不足;SGA 分级营养良好A级13例（26%）,轻、中度营养不良B级27例（54%）,重度营养不良C级10例（20%）;不同营养状况分级患者与血清前白蛋白、白蛋白、BMI相关性较好（P＜005）,与皮褶厚度、上臂围、总蛋白、淋巴细胞计数等相关性较差,差异无统计学意义（P>005）。结论：食管癌住院患者营养不良的发生率为74%,亟需进行营养干预,同时,SGA可作为一种相对简便行之有效的评价工具用于临床评价肿瘤患者营养状况和预后。     

第七届中国国际科学仪器及实验室装备展览会顺利闭幕

中国国际科学仪器及实验室装备展览会（英文缩写CISILE）依托快速发展且前景广阔的新兴中国市场，力求全面反映科学仪器及实验室研发与应用的最新产品、技术成就，全方位展示国内外分析测试、实验室装备、材料力学性能试验设备、光学仪器、生物技术、质量控制等领域的先进技术及产品。     

让基因探究实验、细胞探究实验轻松走进中学生物课堂

凯普中学生物探究实验室以[先进的生物仪器设备]＋[丰富的实验资源]组合，包含了拥有两项美国专利（美国专利号：6020187和5741647）的核心技术设备DNA探究实验仪，     

Stathmin／Oncoprotein 18（Op18）基因在人骨肉瘤中的表达及其意义

目的：探讨stathmin／oncoprotein18（Op18）基因在人骨肉瘤中的表达规律及意义。方法：分别采用免疫组化法和Western blot法检测10例正常骨组织和56例骨肉瘤中stathmin蛋白的表达。结果：免疫组化法检测stathmin蛋白在正常骨组织、低级别骨肉瘤（G1级组）及高级别骨肉瘤（G2级组）中阳性表述率分别为20％、65％、100％。正常骨组织分别与G1级组、G2级组比较,均有显著性差异（P〈0．05）;G1级组与G2级组比较,有显著差异（P〈0．05）。Westernblot法检测显示,stathmin蛋白在正常骨组织、G1级组、G2级组表达相对值分别为（O．34±0．15）、（0．68±0．21）、（O．90±0．17）.正常骨组织分别与G1级级组、G2级组比较,差异均有显著性（P〈0．01）,G1级组与G2级组比较,差异有显著性（P〈0．01）。结论：Stathmin在骨肉瘤中过表达,与骨肉瘤的发生及发展密切相关。     

生物安全三级实验室核心区排风高效空气过滤器原位消毒的研究

<实验室生物安全通用要求>(GB19489-2008)要求生物安全三级实验室"应可以在原位对排风高效空气(HEPA)过滤器进行消毒灭菌".BSL-3实验室核心区排风HEPA过滤器是保证实验操作过程中产生的感染性气溶胶不外泄的最后防线,为了保障环境安全,需在原位实现HEPA过滤器的消毒.本研究设计并制作了循环消毒样机,与排风HEPA过滤器排风箱体的消毒接口连接,利用循环气流带动甲醛蒸汽循环实现原位消毒.结果显示,室温条件下甲醛蒸汽浓度16 mg/L,相对湿度70%,持续熏蒸循环穿透运行12 h,布置于HEPA过滤器排风箱体内用于指示消毒效果的金黄色葡萄球菌、耻垢分枝杆菌、枯草芽胞杆菌及嗜热脂肪芽胞杆菌均被完全杀灭,从设备及方法学两方面实现了排风HEPA过滤器的原位消毒.     

冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血浆BNP、HCY、CysC水平与左心结构及功能的相关性分析

摘要 目的：摘要 目的：探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病（CHD）患者血浆脑肽钠（BNP）、同型半胱氨酸（HCY）、胱抑素C（CysC）表达水平及与左心结构及功能的相关性。方法：选择2018年12月至2021年4月本院收治的CHD患者80例（CHD组）和同期在本院进行体检的健康者80例（对照组）为研究对象,对比CHD组与对照组、不同美国纽约心脏病学会（NYHA）心功能分级的CHD患者血浆BNP、HCY、CysC水平及左心结构和功能指标,分析血浆BNP、HCY、CysC水平与左心结构和功能指标的相关性。结果：CHD组患者血浆BNP、HCY、CysC水平及室间隔厚度（IVS）、左室舒张末期内径（LVEDd）、左室收缩末期内径（LVESd）、左室收缩末期容积（LVESv）、左室舒张末期容积（LVEDv）、左心室质量（LVM）水平高于对照组,左室射血分数（LVEF）水平低于对照组（P<0.05）;血浆BNP、HCY、CysC及IVS、LVEDd、LVESd、LVESv、LVEDv、LVM水平Ⅰ级组低于Ⅱ级组,Ⅱ级组低于Ⅲ级组,Ⅲ级组低于Ⅳ级组（P＜0.05）;LVEF水平Ⅰ级组高于Ⅱ级组,Ⅱ级组高于Ⅲ级组,Ⅲ级组高于Ⅳ级组（P＜0.05）;血浆BNP、HCY、CysC水平与IVS、LVEDd、LVESd、LVESv、LVEDv、LVM水平呈正相关,与LVEF水平呈负相关（P＜0.05）。结论：CHD患者血浆BNP、HCY、CysC水平异常升高,与左心结构及功能呈明显的相关性,BNP、HCY、CysC可能参与了CHD的病理过程。     

木质素合成酶C3H基因的生物信息学分析

应用生物信息学的方法对GenBank中拟南芥、火炬松、胡麻、紫花罗兰等植物香豆酸-3-羟基化酶（c3h）基因以及本实验室克隆的欧美杨107的c3h基因（AM920690）核苷酸序列以及翻译的氨基酸序列的组成成分、导肽、跨膜结构域、疏水性／亲水性、蛋白质二级结构及功能域等进行了初步分析预测。分析表明欧美杨107的C3H氨基酸序列不存在导肽,无跨膜结构域,肽链表现为亲水性;二级结构域与P450高度匹配,其高级结构中含有由含铁血红素和半胱氨酸组成的活性中心,并构建了c3h进化树,对其分子进化进行了探讨。