Stathmin/Oncoprotein 18(Op18)基因在人骨肉瘤中的表达及其意义

目的:探讨stathmin/oncoprotein 18(Op18)基因在人骨肉瘤中的表达规律及意义。方法:分别采用免疫组化法和Western blot法检测10例正常骨组织和56例骨肉瘤中stathmin蛋白的表达。结果:免疫组化法检测stathmin蛋白在正常骨组织、低级别骨肉瘤(G1级组)及高级别骨肉瘤(G2级组)中阳性表达率分别为20%、65%、100%。正常骨组织分别与G1级组、G2级组比较,均有显著性差异(P﹤0.05);G1级组与G2级组比较,有显著差异(P<0.05)。Western blot法检测显示,stathmin蛋白在正常骨组织、G1级组、G2级组表达相对值分别为(0.34±0.15)、(0.68±0.21)、(0.90±0.17)。正常骨组织分别与G1级级组、G2级组比较,差异均有显著性(P<0.01),G1级组与G2级组比较,差异有显著性(P<0.01)。结论:Stathmin在骨肉瘤中过表达,与骨肉瘤的发生及发展密切相关。     

慢性低O2高CO2对大鼠海马神经细胞TLR4和NFκB的影响

目的：探讨慢性低O2高CO2对大鼠海马神经细胞TLR4和NFκB的影响及作用。方法：采用慢性低O2高CO2肺动脉高压大鼠模型,30只大鼠随机分为正常对照组（NC）、低O2高CO2 2周组（2HH组）和低O2高CO2 4周组（4HH组）,免疫组织化学法检测海马CA1／3区细胞TLR4和NFκB的表达,TUNEL法检测海马细胞凋亡。结果：模型组大鼠海马CA1／3区TLR4蛋白的表达随着时间延长而显著,2HH组（CA1：0．1275±0．0242,CA3：0．1156±0．0376）,4HH组（CA1：0．1522±0．0187,CA3：0．1427±0．0453）,与NC组比较有显著性差异（P〈0．05,P〈0．01）。NC组大鼠海马CA1／3区可见NFκB／p65少量表达于胞浆,而模型组可见NFκB／p65在细胞核内不同程度表达,2HH组（CA1：0．1326±0．0324,CA3：0．1301±0．0112）,4HH组（CA1：0．1612±0．0428,CA3：0．1578±0．0365）,与NC组比较分别有显著性差异（P〈0．05,P〈0．01）。模型组大鼠海马CA1／3区细胞凋亡明显增多,与NC组比较分别有显著性差异（P〈0．01）,以4HH组为著。结论：TLR4和NFκB激活可能在慢性低O2高CO2大鼠海马神经细胞凋亡中有重要作用。     

FRNK质粒转染抑制肝星状细胞增殖机制研究

目的：探讨黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）质粒瞬时转染肝星状细胞（HSC）,对纤维连接蛋白（FN）刺激的HSC增殖的影响及其机制。方法：应用体外细胞培养技术,脂质体介导法进行FRNK质粒转染;Westernblot技术检测FRNK、黏着斑激酶（FAK）、p-raX（Tyr^397）蛋白的表达情况,鉴定转染效果;改良MTF法测定HSC增殖;流式细胞术（FCM）检测细胞周期时相。结果：FRNK质粒转染HSC48h时,FRNK蛋白表达最强（P〈0．01）;FAK蛋白转染前后无明显差异（P〉0．01）;FRNK质粒组p-FAK（Tyr^397）蛋白含量（0．40±0．14）较空质粒组（1．89±0．25）显著下降（P〈0．01）;FRNK在HSC大量表达后,于转染12h、24h、48h的HSC增殖抑制率分别为20．07％、26．16％和29．77％（P〈0．01）,呈时间依赖性关系;FRNK质粒组G0／G1期细胞数（71．4±2．81）较空质粒组（48．9±1．66）明显增加（P〈0．01）。结论：脂质体介导下FRNK质粒转染,可使外源性FRNK在HSC内大量表达,抑制FAK磷酸化,阻滞HSC周期时相于G0／G1期,抑制HSC增殖。     

MDR3（ABCB4）、BSEP（ABCB11）和FIC1（ATP881）基因在人绒毛和正常妊娠胎盘组织表达的研究

目的检测肝脏胆盐载体FIC1（ATP881）、BSEP（ABCB11）和MDR3（ABCB4）在正常绒毛和胎盘组织中转录水平和蛋白水平的表达情况,探讨肝脏胆盐载体在人类胎盘胆汁酸排泌过程中的作用和功能。方法选择正常妊娠6～12周的孕妇（早孕组）15例和妊娠38～40周的孕妇（晚孕组）20例,采用实时定量逆转录一聚合酶链反应技术（realtimeRT．PCR）检测绒毛和胎盘组织中上3种载体的mRNA,采用免疫组织化学（S-P）法分别检测后两种载体蛋白在上述35例胎盘组织中的表达,并通过免疫印迹技术分析这两种载体在胎盘组织中的含量。结果在所有绒毛和胎盘组织中均检测到3种载体的mRNA。MDR3mRNA在正常绒毛中的表达量较低为（0．15±0．04）,正常晚期妊娠胎盘中表达量为（0．58±0．06）,两者比较有显著性差异（P〈0．05）。与早孕组相比,FIC1mRNA表达水平明显由（0．65±0．03）下降至（0．23±0．04）,差别有非常显著意义（P〈0．01）。而BSEPmRNA表达无改变（0．06±0．01和0．05±0．01）（P〉0．05）。MDR3蛋白、BSEP蛋白在正常绒毛和胎盘组织中均有表达,且两种载体在正常早孕绒毛及晚期妊娠胎盘分布范围基本一致,主要分布在绒毛合体滋养细胞母体面游离缘。MDR3、BSEP蛋白在绒毛和晚期妊娠胎盘中的表达趋势与其mRNA相似,MDR3蛋白Western印迹条带的光密度值为（11357±3618）（早孕组）和（46753±2834）（晚孕组）,两组比较有显著性差异（P〈0．05）。BSEP蛋白早孕组Western印迹条带的光密度值为（1296±436）,晚孕组为（1798±575）,两组比较差异无显著性（P〉0．05）。结论3种肝脏胆盐载体FIC1、MDR3和BSEP在正常绒毛和胎盘组织中均有表达,可能参与了胎盘胆汁酸的排泌功能。妊娠期间MDR3、FIC1和BSEPmRNA和蛋白表达发生变化,可能与胎儿生长发育的需要有关。     

Fascin蛋白在软骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的：分析Fascin蛋白在软骨肉瘤组织中的表达及其与软骨肉瘤临床病理因素的关系。方法：应用免疫组化EnlivionTM法分别检测和比较70例软骨肉瘤和20例软骨瘤中Fascin蛋白的表达情况。结果：（1）Fascin在软骨肉瘤组和软骨瘤组中的阳性表达率分别为64．29％和5．00％,两组相比差异有统计学意义（X2=21．88,P=0．00）;（2）Fascin蛋白的表达与患者的年龄、性别无显著相关性（Xk0．37,P=0．54;X2=-0．29,P=0．59）;Fascin蛋白在肺转移组中的表达为76．32％,显著高于无肺转移组（50．00％）,两组相比差异有统计学意义（XZ=5．24,P=0．02）;Fascin蛋白在间叶性软骨肉瘤、透明细胞软骨肉瘤的中表达分别与普通型软骨肉瘤相比,无统计学意义（P〉0．05）,但去分化软骨肉瘤与普通型软骨肉瘤相比,有统计学意义（P〈0．05）;Fascin在普通型软骨肉瘤的I-III级中的阳性表达率分别为11．1l％、61．90％、75．00％,三者之间的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：Fascin参与了软骨肉瘤恶变的过程,其高表达与软骨肉瘤的分化和转移有关。     

细胞周期素G1、G2在皮肤血管瘤组织中的表达及意义

目的探讨细胞周期素G1、G2与血管瘤发生发展及退化的关系。方法采用免疫组织化学S-P法对50例血管瘤和5例正常皮肤组织检测细胞周期素G1、G2的表达;对所获得的检测结果进行图像分析处理。结果增生期血管瘤内皮细胞胞浆或胞核内cyclin G1呈强阳性表达,退化期血管瘤内皮细胞胞浆内cyclin G1无表达;增生期血管瘤内皮细胞胞浆内无cyclin G2表达,退化期血管瘤内皮细胞胞浆内cyclin G2呈强阳性表达。增生期组与退化期组、正常皮肤组分别相比,细胞周期素G,阳性表达差异有显著性（P〈0．05）,退化期组与增生期组、正常皮肤组之间,细胞周期素G2的阳性表达差异有显著性（P〈0．05）。结论细胞周期素G1、G2在血管瘤发生、发展及退化中起着重要作用。     

多烯磷脂酰胆碱对β-淀粉样蛋白（Aβ 1—40）致阿尔茨海默病模型大鼠的治疗作用

目的：研究多烯磷脂酰胆碱（Polyene Phosphatiayl choline,PPC）对β-淀粉样蛋白（Apl-40）致阿尔茨海默病（Alzheimer＇s Dis．ease,AD）模型大鼠的治疗作用。方法：32只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和处理组,海马内注射淀粉样蛋白（Aβ1—40）,制作大鼠阿尔茨海默病模型,处理组给予多烯磷脂酰胆碱。通过Moms水迷宫实验验检测各组大鼠认知行为学改变,海马组织学及免疫组化染色,观察多烯磷脂酰胆碱对阿尔茨海默病模型大鼠的影响,并进行统计学分析。结果：①Moms水迷宫实验,模型组与正常组、假手术组比较,学习和记忆潜伏期显著增加;处理组与模型组比较,学习和记忆潜伏期显著减少;组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）,提示多烯磷脂酰胆碱使AD模型大鼠的认知行为学功能改善。（2）Nissl染色,模型组与正常对照组、假手术组组织学染色结果有显著性差异（P〈0．05）,PPC处理组与模型组比较有显著性差异（P〈0．05）,PPC处理组与正常组及假手术组比较也呈现出显著性差异（P〈0．05）;提示多烯磷脂酰胆碱可以减少神经元的凋亡。③β-淀粉样蛋白免疫组化染色,模型组与正常对照组、假手术组比较,Aβ沉积明显增加;PPC处理组与模型组比较,Aβ沉积范围明显缩小,PPC处理组与正常对照组、假手术组也呈现出显著性差。结论：多烯磷脂酰胆碱对淀粉样蛋白（Aβ1—40）致阿尔茨海默病模型大鼠有治疗作用。     

冠心病患者血清中炎性因子的检测及其临床意义

目的：探讨血清炎性因子hs—CRP、IL．2在冠心病的发病机制、诊断和治疗中的应用价值。方法：hs．CRP采用免疫比浊法在全自动生化仪上测定,而IL-2采用ELISA法检测,观察其在患者组与正常对照组的浓度变化。结果：冠心痛患者组Its—CRP为（4．81±7．12mg／L）,与正常对照组（0．73±0．80mg／L）比较,有显著性差异（P〈0．05）;同样IL-2为（6．67±4．34ng／m1）,与对照组（2．83±3．27ng／m1）比较有显著性差异（P〈0．05）O相关分析表明IL．2与hs．CRP正相关（r=0．783,P〈0．05）。结论：血清IL．2与CRP在冠心病的发生发展中起着重要的作用,联合检测它们的水平可以判断冠心病的严重程度,对于冠心病的诊断、治疗及预后评估具有重要的临床应用价值。     

二苯乙烯苷对H202诱导血管内皮细胞ICAM-1及VCAM-1表达的影响

目的：通过研究二苯乙烯苷（TSG）对H20：诱导的人脐静脉内皮细胞ICAM-1、VCAM-1表达的影响,探明二苯乙烯苷抗氧化保护内皮细胞的作用机制。方法：体外培养人脐静脉内皮细胞,实验分为空白对照组、H20：组、辛伐他汀组、TSG组,运用逆转录聚合酶链式反应和酶联免疫吸附试验分别检测ICAM-1及VCAM-1mRNA与其蛋白的表达。结果：200μmol·L。的H202作用内皮细胞24h后。ICAM．1和VCAM-1的mRNA和蛋白表达水平均明显上调,与空白对照组比较,差异有显著性（P〈0．01）。而在200μmol·L。的H202作用前用1μmol·L^-1二苯乙烯苷预处理体外培养人脐静脉内皮细胞4h,结果显示二苯乙烯苷能抑制H2O2诱导的内皮细胞ICAM-1、VCAM-1的mRNA和VCAM-1的蛋白水平表达,与H2O2组比较差异有显著性（P〈0．01）;而ICAM-1的蛋白表达水平与H202组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;辛伐他汀组ICAM-1和VCAM-1的mRNA及其蛋白水平表达降低,与H20：组比较差异均有显著性（P〈0．01）。实验结果表明二苯乙烯苷可抑制H2O2诱导的内皮细胞粘附分子ICAM-1、VCAM-1表达。结论：二苯乙烯苷可通过降低细胞粘附分子ICAM-1和VCAM-1的表达保护氧化应激引起的人脐静脉内皮细胞损伤。     

cFLIP在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变组织中表达的意义

目的 研究cFLIP在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）组织中的表达及其临床意义。方法 应用SP免疫组化染色法检测40例宫颈癌,40例CIN和20例正常子宫颈组织中cFLIP的表达情况,并与病理类型、组织学分级、临床分期和是否有淋巴结转移等生物学行为进行相关分析。结果 宫颈癌、CIN及正常宫颈组织中cFLIP的表达阳性率分别为92．5％、70％和10％,三组间两两比较有显著性差异（P〈0．05）。CINⅠ级组与CINⅡ-Ⅲ级组及宫颈癌组比较有显著性差异（P〈0．05）,宫颈癌组与CINⅡ-Ⅲ级组比较差异无显著性（P〉0．05）。cFLIP表达阳性率与宫颈癌病理类型、组织学分级、淋巴结转移及临床分期无关。结论 cFLIP的特异性高表达是宫颈癌变的一个早期事件,可能在宫颈癌癌前病变向宫颈癌的发展过程中起重要作用。     

ROR2在骨肉瘤细胞和组织中的表达及其意义

目的：研究ROR2在骨肉瘤细胞及组织中的表达情况,探讨其表达的临床意义。方法：使用Western-blotting实验方法检测骨肉瘤及骨软骨瘤新鲜原发灶标本中ROR2表达情况;使用免疫组化方法检测骨肉瘤及骨软骨瘤原发灶标本中ROR2表达情况并结合临床资料了解其临床意义;使用RT-PCR实验方法检验SaoS-2骨肉瘤细胞中ROR2mRNA表达情况。结果：①通过免疫组织化学的方法检测骨肉瘤标本ROR2阳性表达率为70.91%,骨软骨瘤标本ROR2阳性表达率为20.00%,两者阳性表达率有显著性差异（x2=12.73 P〈0.05）。②Western-blotting实验检测新鲜骨软骨瘤和新鲜骨肉瘤组织中ROR2蛋白表达有显著性差异（P〈0.05）。③RT-PCR实验检测SaoS-2骨肉瘤细胞株中ROR2基因表达阳性。④检测在有转移的骨肉瘤患者标本中ROR2的阳性表达率为100.00%,在无肿瘤转移患者标本中阳性表达率为61.91%,两者表达阳性率有显著性差异（x2=5.26 P〈0.05）。⑤ROR2在骨肉瘤Enneking分期Ⅰ期表达阳性率为22.22%（2/9）,Ⅱ期表达阳性率为72.73%（24/33）,Ⅲ期表达阳性率为100.00%（13/13）。Ⅰ期与Ⅱ期间有显著性差异（x2=5.66 P〈0.05）,Ⅰ期与Ⅲ期间有显著性差异（x2=11.46 P〈0.05）,而Ⅱ期与Ⅲ期间无显著性差异（x2=2.85 P〉0.05）。结论：ROR2蛋白和基因在骨肉瘤组织及细胞中有较强表达。鉴于ROR2对于骨骼发育的影响及其通过WNT信号通路调节成骨细胞增殖及分化的生物学特点使得我们怀疑ROR2可能在骨肉瘤的发生发展过程中具有一定的作用,其可能促进了骨肉瘤的发生发展及恶性生物学行为。     

survivin在非小细胞肺癌中的表达及其与bcl-2、p63表达的关系

目的：探讨survivin在非小细胞肺癌组织（non small cell lung cancer,NSCLC）中的表达,及其与bcl2、p63蛋白表达的相关性。方法：应用二步法免疫组织化法,检测survivin、bcl-2、p63蛋白在60例NSCLC组织和20例正常肺组织中的表达。结果：肺癌组织中的survivin蛋白阳性率（56．67％）明显高于正常肺组织15％）,有显著性差异;（p〈0．05）Ⅲ期surviving蛋白阳性表达率72．73％（16／22）明显高于Ⅰ＋Ⅲ期survivin47．37％（18／38）。有显著差异;（p〈0．05）survivin蛋白表达与患者年龄、病理类型、组织分化程度,淋巴结转移情况无关（P〉0．05）NSCLC组织bc 1-2蛋白表达阳性、阴性组中,survivin蛋白阳性表达率分别为66．67％（18／27）和48．48％（16／33）,两者比较,差异有显著性（P〈0．05）;p63蛋白表达阳性、阴性组中,survivin蛋白阳性表达率分别为53-33％（16／30）和60％（18／30）,两者比较,差异有显著性（P〈0．05）survivin,蛋白与bc1．2蛋白的表达呈正相关。survivin蛋白与p63蛋白的表达呈正相关。结论：survivin在NSCLC组织中表达上调,通过抑制细胞凋亡,在NSCLC的发生和发展中起到重要作用。survivin,bcl-2与p63它们分别在肺癌发生发展过程中不同途径上抑制肺癌细胞的凋亡,对肺癌早期诊断有一定的意义。对3种蛋白进行联合检测,更有利于肺癌的早期诊断和判断肺癌的分化程度、临床分期、淋巴结是否转移及病人的预后。survivin与bcl-2及survivin与p63可能起协同作用、并可能会成为NSCLC基因治疗的新靶点。     

急性毛细支气管炎并心衰患儿血小板活化因子，血小板源生长因子的表达及临床意义

目的：探讨血小板活化因子（PAF）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及血小板源生长因子（PDGF）水平变化在毛细支气管炎并急性心衰的变化,探讨它们在该病的发病中的作用。方法：58例心衰组患儿分别于治疗前和临床症状消失后采用双抗体夹心ABC．ELISA法检测PAF、TNF-α及PDGF血清含量,设正常对照组40例比较。结果：心衰组PAF治疗前为370．57±23．6ng／L,明显高于对照组的56．78±19．6ng／L,组间比较差异具有非常显著性意义（t=15．95,P〈0．001）;治疗后恢复至49．63±14．5ng／L,与正常对照差异不明显;治疗前后比较,差异具有非常显著性意义（t=3．70,P〈0．001）。TNF-α治疗前为457．4±40．5ng／L,明显高于对照组的148．8±21．6ng／L,组间比较差异具有显著性意义（t=2．135,P〈0．05）;治疗后恢复至162．6±37．61ng／L,与正常对照差异不明显;治疗前后比较,差异具有非常显著性意义（t=7．25,P〈0．01）。PDGF治疗前为596．23±199．43）ng／L,较对照组259．76±69．58ng／L增高,组间比较,差异具有非常显著性意义（t=-25．52,P〈0．01）;治疗后降为272．83±116．96ng／L,较治疗前明显恢复,组间比较差异均具有显著性意义（t=7．66,P〈0．01）。结论：结果表明,PAF、TNF-α、PDGF作为炎症介质不仅参与心衰的发病过程,还提示细胞外基质的异常在心衰发病学中的重要地位。     

上皮性卵巢肿瘤组织MKP-1及p-ERK1/2蛋白表达的研究

研究丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase, MAPK） 相关蛋白丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶（mitogen activated protein kinase phosphatase-1, MKP-1）和磷酸化细胞外信号调节激酶（phosphorylation extracellular signal-regulated kinases, p-ERK1/2）曲在上皮性卵巢肿瘤组织及正常卵巢组织中的表达差异,并探讨其在卵巢癌发生、发展中的作用,为卵巢癌的治疗提供新的思路及实验依据。选取64例上皮性卵巢癌、35例卵巢上皮性交界瘤及32例卵巢上皮性良性肿瘤患者的组织,另选取26例正常卵巢组织作对照,进行MKP-1及p-ERK1/2的免疫组化分析,并同时对其中部分病例进行上述蛋白的Western—blot研究。结果显示正常卵巢、良性肿瘤、交界瘤及卵巢癌组织MKP—1的表达依次递减,各组之间进行两两比较均有显著性差异（P〈0．01）,FIGOⅢ期与Ⅳ期卵巢癌组织MKP-1的表达显著低于Ⅰ期与Ⅱ期卵巢癌组织（P〈0．01）;而p-ERK1/2在正常卵巢、良性肿瘤、交界瘤及卵巢癌组织的表达依次递增．各组之间进行两两比较也均有显著性差异（P〈0．01）。FIGOⅢ期与Ⅳ期卵巢癌组织P～ERK1/2的表达显著高于Ⅰ期与Ⅱ期卵巢癌组织（P〈0．01）。且免疫组化及western—blot均显示MKP-1与p—ERK1/2在卵巢癌组织中的表达存在显著的负相关性,（r=-0．90,P〈0．01及r=-0．78,P〈0．01）。本研究结果表明MKP-1与p—ERK1/2的异常表达可能跟上皮性卵巢肿瘤的发生、发展有关,它们之间的表达失衡可能是卵巢癌发生、发展的原因之一．     

TNF—α对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖及ERK1／2活性的影响

目的探讨TNF—α对哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖及对ASMCs上ERK1／2mRNA、p-ERK1／2表达水平的影响。方法通过对哮喘模型大鼠ASMCs培养,分别以0．2μg／L、1．0μg/L、20μg/L TNF-α干预ASMCs生长。采用流式细胞仪、MTT法检测ASMCs增殖情况,观察不同浓度TNF—α对ASMCs增殖的影响。RT-PCR检测ASMCs上ERK1／2mRNA表达,免疫细胞化学染色法检测磷酸化ERK1／2蛋白的表达及定位。结果哮喘组ASMCsS期比例、A值、ERK1／2mRNA、p-ERK1／2蛋白的表达量分别为（34．45±2．08）％、（0．550±0．010）、（0．995±0．118）、（130．77±4．16）,与对照组（11．17±0．96）％、（0．292±0．008）、（0．576±0．098）、（163．82±1．38）比较均显著增高（均P〈0．01）。各TNF—α干预组ASMCs的S期比例、A值、ERK1／2mRNA和p-ERK1／2蛋白表达量与哮喘组比较均显著降低（均P〈0．01）,0．2μg/L和1．0μg／LTN-α组p-ERK1／2蛋白表达量高于对照组（P〈0．01）,20μg／L TNF-α组p-ERK1／2蛋白表达量与对照组比较无差异（P〉0．05）。结论与正常鼠相比,慢性哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖明显,处于S期的细胞比例明显增高。经TNF—α干预后,慢性哮喘大鼠气道平滑肌细胞处于S期的细胞比例减少,增殖减弱,TNF-α可能抑制慢性哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖。TNF—α可下调慢性哮喘大鼠气道平滑肌细胞上ERK1／2mRNA及p-ERK1／2表达,TNF-α可能通过抑制ERK信号转导通道的活性对气道平滑肌细胞的增殖进行调控。     

基质金属蛋白质酶12在子宫内膜癌中的表达及其意义

目的通过研究基质金属蛋白质酶12（MMP-12）在子宫内膜癌中的表达,探讨其与子宫内膜癌浸润转移的关系。方法应用链霉菌抗生物素蛋白——过氧化物酶免疫组织化学方法（S—P法）和蛋白质印迹（Western—blot）对42例子宫内膜腺癌、12例子宫内膜不典型增生及12例正常子宫内膜组织中的MMP-12的表达进行检测,并分析其与子宫内膜癌临床病理特征之间的关系。结果MMP-12蛋白主要表达于子宫内膜癌细胞胞浆中,在问质中有少量表达。MMP-12在子宫内膜癌、子宫内膜不典型增生的阳性表达率与正常子宫内膜相比差异有显著性（P〈0．05）,但子宫内膜癌与子宫内膜不典型增生中的MMP-12阳性表达率之问差异无显著性（P〉0．05）。MMP-12在子宫内膜癌细胞中病理分级为G3、G2强阳性率分别为80．00％及57．14％,均高于G1者的（17．39％）（P〉0．05）;不同肌层浸润深度（〈1／2、≥1／2）者的强阳性率分别为42．86％及53．85％,均高于无肌层浸润者的0％（P〈0．05）;有淋巴结转移者高于无淋巴结者（P〈0．05）;手术病理分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期者的强阳性率分别为24．14％、57．14％及83．34％,随着手术病理分期的升高,MMP-12表达强阳性率之间差异有显著性（P〈0．05）。结论MMP-12在子宫内膜癌中的表达随着病理分级的升高、肌层浸润程度的加深以及手术病理分期的升高而增强。     

全反式维甲酸联合替莫唑胺对胶质瘤U251细胞增殖与凋亡的影响

目的：研究全反式维甲酸（ATRA）联合替莫唑胺（TMZ）对胶质瘤细胞株U251增殖及凋亡的影响。方法：体外培养胶质瘤细胞株U251,分为ATRA组、TMZ组、ATRA＋TMZ组和空白对照4组,应用MTT法测定U251细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,westernblot法检测细胞维甲酸受体β（RARβ）蛋白和凋亡相关蛋白Caspase．3蛋白的表达情况。结果：对照组、ATRA组、TMZ组及ATRA＋TMZ组的细胞生长抑制率分别为（1．72±0．12）％、（9．87±0．87）％、（23．87＋1．32）％及（35．74±1．44）％,ATRA＋TMZ组的细胞生长抑制率显著高于单独应用TMZ（P〈0．01）。对照组、ATRA组、TMZ组及ATRA＋TMZ组的细胞凋亡率分别为（1．32±0．11）％、（4．16±0．35）％、（8．44±0149）％、（15．27±1．03）％,ATRA＋TMZ组的凋亡率显著高于单独应用TMZ有更高的凋亡率（P〈0．01）。对照组、ATRA组、TMZ组及ATRA＋TMZ组RARp蛋白相对表达量分别0．452±0．054、0．837±0．068、0．195±0．021、0．376±0．039,ATRA＋TMZ组RARβ蛋白相对表达量显著高于TMZ组（P〈0．01）。ATRA＋TMZ组Caspase．的3蛋白表达相对水平为（0．832±0．059）,明显高于ATRA组（0．334±0．041）及TMZ组（0．521＋0．032）,差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论：全反式维甲酸联合替莫唑胺能更有效抑制U251细胞的增殖,增加其凋亡率,这可能与其增加RARβ和Caspase-3蛋白的表达抑制U251细胞增殖、诱导细胞凋亡有关。     

P63在子宫内膜样腺癌的表达及意义

目的检测正常子宫内膜、子宫内膜增生症和子宫内膜样腺癌（endometriod adenocarcinoma,EC）组织中P63的表达,探讨P63与子宫内膜样腺癌发生、发展及预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测正常子宫内膜（20例）,子宫内膜增生症（20例）,子宫内膜样腺癌（50例）组织中P63蛋白的表达。结果（1）正常子宫内膜中仅1例增生期内膜中有P63表达,阳性细胞零星分布于极个别腺体的基底部。子宫内膜增生症和子宫内膜样腺癌组织中,P63阳性细胞常相对集中分布于某一区域的腺体或实性巢,染色强。（2）EC组和子宫内膜增生症组P63的阳性率分别为46％和50％,与正常子宫内膜组（5．0％）比较差异有显著性护〈0．05）。子宫内膜增生症组P63的阳性率与EC组比较差异无显著性（P〉0．05）。（3）P63的表达与EC的分化程度无关（P〉0．05）。结论（1）EC组织中P63阳性细胞可能来源于胚胎时期的未分化细胞,具有多向分化的潜能。（2）P63与EC的发生发展有关,可能起癌基因的作用。（3）P63在子宫内膜增生症组织中高表达,表明P63与子宫内膜的异常增生相关。     

在子宫颈上皮内瘤变和鳞癌组织中CyclinE、Rb基因表达的研究

目的 探讨细胞周期素E（CyclinE）、视网膜母细胞瘤（Rb）基因与上皮内瘤变（CIN）和宫颈鳞癌的关系,及其在癌变过程中的意义。方法 应用免疫组化技术（S-P法）,检测CyclinE和Rb基因产物在各级别CIN77例和宫颈鳞癌40例中的表达状况,并以正常子宫颈鳞状上皮20例做对照。结果 在正常宫颈鳞状上皮、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈鳞癌中,CyclinE的阳性表达率呈逐渐增强趋势,分别为：0．0％、30．0％、75．0％、65．0％、60．0％。正常宫颈鳞状上皮与各级别CIN和宫颈鳞癌之间差异均有显著性（P〈0．01或〈0．005）,CINⅠ与CINⅡ、CINⅢ、宫颈鳞癌组间差异均有显著性（P〈0．005或〈0．01）;Rb基因蛋白的表达率逐渐下调,分别为：100．0％、55．0％、20．0%、24．3%、23．5％,在正常宫颈鳞状上皮与各级别CIN和宫颈鳞癌组间差异均有显著性（P〈0．005）;CINI与CINHI、宫颈鳞癌组间差异有显著性（P〈O．005）。结论CyclinE在正常子宫颈鳞状上皮表达阴性,随着发生CIN从轻到重至宫颈鳞癌,表达呈逐渐增强趋势;表明CyclinE在子宫颈癌变过程中起到重要作用,CyclinE参与CIN的进展及子宫颈癌癌变机制。Rb基因蛋白在正常子宫颈鳞状上皮100％阳性,随着发生CIN从轻到重至宫颈鳞癌,表达呈逐渐下调趋势,甚至消失;表明Rb基因可能主要通过功能性失活参与宫颈鳞癌的发生,并且其在癌变过程中起重要作用。发现CyclinE表达增强和RB基因表达下调或消失,有助于宫颈鳞癌发生的判断及CIN程度和级别的确定。     

VEGF-C和VEGF-D在肝内胆管癌组织中的表达与淋巴结转移的关系及临床意义

目的：探讨胆管癌患者血管内皮生长因子C和D（vascular endothelial growth factor-Cand．D,VEGF．CandVEGF．D）在胆管癌组织中的表达及其与肿瘤淋巴结转移的关系。方法：应用免疫组化SABC法及Real-timePCR法检测57例胆管癌组织和正常胆管组织中VEGF-C、vEGF-D蛋白及其mRNA的表达。结果：胆管癌组织VEGF—C和VEGF．D表达明显高于正常胆管组织（P〈0．叭）,其中淋巴结转移组VEGF-C、VEGF—D的表达与淋巴结未转移组间统计学差异显著（P〈0．05）。VEGF-C和VEGF-D在胆管癌组织中的表达与淋巴结转移有关（P〈0．01）。结论：胆管癌细胞非摄入性高表达的VEGF．C和VEGF．D与淋巴结转移密切相关,可作为评估胆管癌患者预后的重要参考指标。