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1.
T7启动子具有真核生物聚合酶Ⅱ顺式作用因子的功能 总被引:1,自引:0,他引:1
根据a-鹅膏蕈碱(a-amanitin)对真核生物RNA聚合酶的选择性抑制,以氯霉素乙酰转 移酶基因(CAT)作为报道基因进行体内表达实验,证明T7噬菌体启动子可为真核生物RNA 聚合酶Ⅱ所启动。应用建立的竞争性DNA-蛋白质凝胶泳动技术,分别以TATA框、CAAT 框、GC框和八核苷酸序列(octamer)为竞争性寡核苷酸分子,发现人工合成的T7启动子可能 与 TFⅡD起始转录因子结合,形成 DNA-核蛋白质结合物。将 TATA框和八核苷酸序列分别 接入T7启动子上游,CAT实验显示八核苷酸序列可以增强RNA聚合酶Ⅱ对T7启动子的转录 起始作用。实验结果表明T7启动子可作为RNA聚合酶Ⅱ的顺式作用因子。 相似文献
2.
诱生型一氧化氮合酶基因启动子的结构及其调控 总被引:3,自引:0,他引:3
鼠类NOS2基因5′端1.7kb序列几乎包含了所有的顺式作用元件,其中NFκB结合位点,IRF-RE,CAATbox和GAS4等元件对该在的诱导性转录调控至关重要,人NOS2基因5′端3.7kb范围与鼠类有相似的调控元件,但该区域仅有基础启动子活性,其诱导性调控元件在-3.7kb的上游,其中NFκB结合位点着关键的作用。 相似文献
3.
粘虫核型多角体病毒一个新基因的序列和结构研究 总被引:2,自引:0,他引:2
本文报道TsNPVDNAEcoRV/XhoI的5.5kb片段的克隆及其物理图谱。测定了其中一个819bP片段的全序列。在长346bp的完整ORF的5’端除有TATAbox和CAATbox以外,还发现有典型的早期基因启动子元件ACGT和GC单元以及晚期基因的转录起始保守序列TTAAG。预测的ORF产物为114个氨基酸、分子量为13kD的蛋白质,故命名为p13蛋白。在p13基因的C端和N端分别有一个亮氨酸拉链和两个类亮氨酸拉链结构(我们称为亮氨酸转型结构和LVT重复结构〕.从终止密码起有一个双发卡环结构,p13基因的5’端调控单元及其排列与BmNPV和AcNPV的细胞序死抑制基因(p35)十分相似,但p13基因与已经发现的杆状病毒基因序列和氨基酸序列没有同源性.因此,这是一个新的早晚期基因,其调控元件可能具有重要功能。 相似文献
4.
根据α-鹅膏蕈碱(α-amaintin)对真核生物RNA聚合酶的选择性抑制,以氯霉素乙酰转移酶基因(CAT)作为报道进行体内表达实验,证明T7噬菌体启动子可为真核生物RNA聚合酶Ⅱ所启动。应用建立的竞争性DNA-蛋白质凝胶泳动技术,分别以TATA框、CAAT框、GC框和八核苷权序列(octamer)为竞争性寡核苷酸分子,发现人工合成的T7启动子可能与TFⅡD起始转录因子结合,形成DNA-核蛋白质结 相似文献
5.
CAAT结构是一种在真核生物启动子中普遍存在的顺式作用元件.CBF,又称为NF-Y、CP1,是一个CAAT特异性转录因子.在转录过程中,CBF与CAAT特异性结合,共同调控启动子的转录,本文综述了CBF的结构及其在转录中的作用. 相似文献
6.
人低密度脂蛋白(LDL)受体基因cDNA和氯霉素乙酰转移酶基因(CAT)及polyA信号序列被克隆进行PGEM4载体的T7噬菌避动子下游,构建成质粒PT7LDLR和PT7CAT,两个重组质粒转化CHO细胞,PCR和CAT酶实验显示:两个基因被T7噬菌体启动子所启动,结果证实真核生物RNA聚合酶能够识别T7启动子,转录外源基因,常用的含有T7启动子的质粒可同时的核生物和真核生物的表达载体。 相似文献
7.
人分裂细胞核抗原基因片段的筛选、测序及对启动子的分析 总被引:1,自引:0,他引:1
经6.6×105个克隆筛选,从装在λ噬菌体载体Charon30中的人基因库中筛选到了一个含人分裂细胞核抗原(PCNA)基因的克隆。经Southern杂交分析插入基因长约14kb,有较长的5'上游区,但3'端缺少一部分。经亚克隆和测序已确定从5'上游1263bp到3'端与λ载体接点共4969bpPCNA基因片段的核苷酸序列。将PCNA基因启动子核苷酸序列与DNA聚合酶α,拓扑异构酶Ⅱα,胸苷酸激酶基因的启动子进行比较有30%以上同源性,具有“看家基因”特征。在转录起始点的5'上游几百bp的范围内都有与CAT,SP1,E2F,NFHB,Oct1和ATF等转录因子的结合位点相似的核苷酸序列。 相似文献
8.
9.
为了鉴定人血管紧张肽原(AGT)基因的雌激素调控元件,在AGT基因转录起始点和TATA框之间的一段核苷酸序列与雌激素应答元件共有寡核苷酸序列高度同源,通过电泳迁移率变动分析,证明该DNA序列为雌激素应答元件(HAG ERE)。将带有HAGERE的AGT基因核心启动子同氯霉素乙酰转移酶(CAT)报道基因融合,或将多拷贝HAG ERE同TK核心启动子连接,再与CAT基因融合,构成表达载体,与人雌激素 相似文献
10.
转录因子与DNA的结合是基因转录的关键环节,通过迁移性法分析季转录因子AP1、cDAMP反应元件结合蛋白(CREB)、糖皮质激素反应元件(GRE)结合蛋白在衰老细胞中的结合活性,结果表明,AP1与CREB的结合活性在衰老细胞中对表皮生长因子(EGF)的反应性低于年轻细胞;而GRE结合蛋白的结合活性在衰老细胞中对EGF的反应性无明显变化,这提示EGF不能有效刺激衰老细胞增殖可能与其转录因子结合活性的 相似文献