藏红花瓣状体的诱导与花柱-柱头状物的定向分化

藏红花(Crocus sativus L.)又名番红花、西红花;藏药中称为苟日苟木.它是鸢尾科草本植物,原产于欧洲、地中海地区.我国长期以来把它作为珍贵的中藏药.其药用部位是柱头,有效成分主要是藏红花素、藏红花酸、藏红花醛和藏红花苦素.丁葆祖等于1979年首次从藏红花的球茎获得完整的植株[1].Sano等人1987年在离体条件下,诱导花柱-柱头状物再生获得成功[2],此后国内外不断有相关报道[3～7].但试验大多集中在由外植体直接或由愈伤组织间接诱导柱头状物,且花柱-柱头状物的频率低和数量少.我们试图先由藏红花花瓣诱导瓣状体,再定向分化花柱-柱头状物,来提高花柱-柱头状物的诱导频率和数量.从而为以后的大规模生产奠定基础.     

离体培养下番红花花柱—柱头状物再生的研究

番红花(Crocus sativus L.)幼花被和幼花柱可以诱导花柱-柱头状物的再生,长度为24mm 的花芽上分离的花被具有最高的诱导频率(37.5%);花被外植体附加 K5 mg/L 和NAA 4mg/L 有利于再生花柱-柱头状物,频率达到35.3%;附加6-BAP 7 mg/L 和 NAA9mg/L 则有利于柱头状物的大量形成。     

藏红花瓣状体的诱导与花柱-柱头状物的定向分化

藏红花 (ＣｒｏｃｕｓｓａｔｉｖｕｓＬ .)又名番红花、西红花 ;藏药中称为苟日苟木。它是鸢尾科草本植物 ,原产于欧洲、地中海地区。我国长期以来把它作为珍贵的中藏药。其药用部位是柱头 ,有效成分主要是藏红花素、藏红花酸、藏红花醛和藏红花苦素。丁葆祖等于 1979年首次从藏红花的球茎获得完整的植株[1 ] 。Ｓａｎｏ等人 1987年在离体条件下 ,诱导花柱 柱头状物再生获得成功[2 ] ,此后国内外不断有相关报道[3～ 7] 。但试验大多集中在由外植体直接或由愈伤组织间接诱导柱头状物 ,且花柱 柱头状物的频率低和数量少。我们试图先由藏红花…     

番红花花瓣分步处理与花柱-柱头状物的高频分化

1 植物名称番红花(Crocus sativus),又称藏红花、西红花,藏药中称为苟日苟木. 2 材料类别番红花的花瓣. 3 培养条件第一步诱导瓣状体,诱导培养基为1/2MS+NAA 4 mg*L-1(单位下同)+ KT 4～8+CH 300+肌醇 200.第二步花柱-柱头状物的定向分化培养,分化培养基的配方是1/2MS+NAA 4+KT 4+CH 300+肌醇 200.上述培养基均加入0.5%琼脂粉,3%蔗糖,pH为5.8.培养温度为(20±1)℃,暗中培养.     

爪哇蒙蒿子(Anaxagorea javanica)内轮退化雄蕊形态结构及功能

利用扫描电子显微镜、光学显微镜对爪哇蒙蒿子（Anaxagorea javanica Blume）可育雄蕊、内轮退化雄蕊和雌蕊的形态、结构进行了观察,并利用组织化学染色法对内轮退化雄蕊和柱头顶端腺毛化学成分进行了检测。结果显示,内轮退化雄蕊顶端为长条状腺毛,柱头顶端有头状和盾状腺毛,两者顶端的腺毛形态和结构明显不同,但分泌物成分类似,都含有蛋白质和脂类物质。内轮退化雄蕊的横切面为一层表皮细胞包围着薄壁组织,中央有一束维管束,与可育雄蕊花丝部位的横切面十分相似,是介于可育雄蕊和雌蕊之间的过渡结构。在雌蕊阶段,退化雄蕊顶端腺体释放的黏液供传粉昆虫觅食;在雄蕊阶段,退化雄蕊顶端覆盖柱头,呈S型,防止自花授粉。爪哇蒙蒿子薄片状可育雄蕊、内轮退化雄蕊以及可育雄蕊和退化雄蕊腹面上存在气孔等原始性状,是连接番荔枝科和其外类群的同源特征。     

番红花中的色素形成机制

番红花(Crocus sativus L.)柱头中所含的黄红色素在医学上被用作止痛药、镇痛剂,同时,还可以用作食品着色剂。番红花色素中含有类相萝卜素、藏花素以及其它一些成分,如苦藏花素——由一种苦苷和藏花醛组成。只有在开花期间,柱头内才含有香料油。番红花的这种色素与苦苷定位产生的现象表明它们只能在与柱头形成有关的特定条件下才会合成。但是,该植物中究竟哪些因素在控制着此种合成,以往并不清楚。日本广岛大学的两位授教最近通过组织培养法弄清了藏花素与苦藏花素在植物体中合成的条件。发现它们是由植物生长素与细胞分裂素所控制的。     

水稻长颖壳突变体的形态发生、解剖结构观察及其遗传鉴定

长颖壳花器官突变体从野生稻(Oryza nivara Sharma et Shastry)和栽培稻(Oryza sativa subsp. indica Kato)杂交后代材料中获得。该突变体的内外稃变长、呈叶状,且顶端表现不同程度的开裂;每朵颖花的雄蕊1~10枚不等;雌蕊1~3枚不等;子房上柱头1~5个不等;有的颖花形成雄蕊/雌蕊嵌合体;子房处常附有瘤状物;此突变体结实率为18.2%;花粉可育率为62.46%。利用扫描电镜观察了该突变体花器官形态发生过程,并经遗传分析鉴定该突变性状由单隐性基因(暂命名为lh)控制。本文讨论了lh基因和以前鉴定的其他突变体基因之间的关系,通过表型分析推测,突变体基因可能影响花器官数目同时具有拟南芥B类基因的部分功能。     

水稻长颖壳突变体的形态发生、解剖结构观察及其遗传鉴定

长颖壳花器官突变体从野生稻(Oryza ntvara Sharma et Shastry)和栽培稻(Oryza sativa subsp.indica Kato)杂交后代材料中获得.该突变体的内外稃变长、呈叶状,且顶端表现不同程度的开裂;每朵颖花的雄蕊l～10枚不等;雌蕊l～3枚不等;子房上柱头l～5个不等;有的颖花形成雄蕊/雌蕊嵌合体;子房处常附有瘤状物;此突变体结实率为1 8.2%;花粉可育率为62.46%.利用扫描电镜观察了该突变体花器官形态发生过程,并经遗传分析鉴定该突变性状由单隐性基因(暂命名为lh)控制.本文讨论了lh基因和以前鉴定的其他突变体基因之间的关系,通过表型分析推测,突变体基因可能影响花器官数目同时具有拟南芥B类基因的部分功能.     

一个新的水稻花器官数目突变体fon(t)的鉴定及分析

水稻花器官数目突变体 fon(t)是在单倍体与二倍体的杂交 F2代发现的,经过多代种植,已稳定遗传。以 fon(t)为父本,以日本晴、93?11 和 R527 为母本配制杂交组合进行遗传分析,根据 F2代表型及χ2测验结果表明,该突变体的性状是由单隐性基因控制的。因为对花器官数目突变体曾有报道如 fon1、fon2 和 fon3,所以该突变体暂定名为 fon(t)。该突变体导致内外稃开裂,花器官外露;雄蕊和雌蕊的数目均增多,雄蕊一般 6~9 枚,雌蕊 1~2 枚;浆片同源转化为类内稃的结构;个别的花器官中还出现花丝上伸出类柱头的结构,浆片上部同源转化为类柱头或者类雄蕊的结构。研究结果表明,fon(t)基因可能影响水稻第三、四轮花器官的数目以及第二轮浆片的发育。     

一种新型矮牵牛花发育突变体的研究

报道了新发现的一种矮牵牛(Petunia hybrida L.)花发育突变体,命名为efficient(eff),并对这一突变体进行了形态学和遗传学分析。eff突变体主要表现为雌蕊心皮数目的增加和雄蕊上长出花瓣状结构,同时,雄蕊、花瓣和萼片数亦有增多,但营养器官无变化。心皮数目的增加导致雌蕊柱头和子房体积的显著增大,并形成较大的果实。雄蕊上花瓣的形成对花粉的产生无明显影响。扫描电镜观察发现,eff突变体在花器官原基形成时发生了相应数目的增加及特征的变化。遗传学分析表明,突变的表现型符合孟德尔单基因遗传规律。     

In Vitro Regeneration of Style-stigma-like Structure from Stamens of Crocus sativus

Style-stigma-like structures were regenerated from stamens of Crocus sativus L. The age of the stamen explant has an obvious effect on the induction rate. Auxin NAA has larger effect on the induction of filament style-stigma-like structure. Auxin NAA of higher concentration can lead to higher induction rate. Temperature and light have different effects on the induction of style-stigma-like structure from anther's filament of C． sativus with exogenous hormones at different levels. Ultraviolet tests show that style-stigma-like structure from anther's filament of C． sativus contains crocin, safranal and picrocrocin, contents of which are obviously more than those contained in the style-stigma-like from style. Floral reversion was observed in the induction of style-stigma-like structure from petals, ovaries and styles.     

应用稀土调控藏红花胚性愈伤组织的生长与分化

为提高藏红花（Crocus sativus）胚性愈伤组织的繁殖系数与出芽率,以建立藏红花离体快繁体系,解决其资源短缺问题,采用两步法,用稀土调控其胚性愈伤组织的生长与分化。结果表明,在添加了0.25mg·L-1NAA、3mg·L-16-BA和400mg·L-1CH的B5固体培养基中,0.04mmol·L-1La3＋促进胚性愈伤组织生长的效果最佳,繁殖系数为12,是不添加稀土处理组的1.48倍;在添加了0.25mg·L-1NAA、3mg·L-16-BA和400mg·L-1CH的1/2B5固体培养基中,0.06mmol·L-1Ce3＋促进胚性愈伤组织分化出芽的效果最佳,出芽率高达84.5%,是不添加稀土处理组的1.81倍,且高于国外报道的出芽率（40%）。初步解决了藏红花胚性愈伤组织生长慢和出芽率低等问题,为建立高效稳定的藏红花离体快繁体系奠定了基础。     

马尾松胚乳愈伤组织发生的初步研究

为获取马尾松(Pinus massoniana)单倍体材料，建立其胚乳组织培养体系，对马尾松胚乳不同的消毒方法进行筛选，并分析不同基本培养基、生长调节剂配比和热激处理对愈伤诱导的影响。结果表明，胚乳的最佳消毒方式为75%酒精处理30 s+2% NaClO消毒15 min，外植体污染率为0，死亡率仅为15.56%；生长素可促进愈伤诱导且是必需的；细胞分裂素浸泡种子可代替培养基中的细胞分裂素，并能取得比较好的胚乳愈伤诱导效果，1.0 mg·mL-1 6-BA浸泡30 min处理的效果最佳，在培养基WPM+NAA 2.0 mg·L-1+2,4-D 1.0 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂7 g·L-1中，愈伤诱导率高达87.78%；培养基DCR+NAA 2.0 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂7 g·L-1的胚乳愈伤诱导率最高(68.75%)；热激处理可提高胚乳愈伤的诱导率和质量，以相对湿度85%下45 ℃热激10 min最佳，总愈伤诱导率为66.25%，成团愈伤诱导率达8.75%；增殖培养以培养基WPM+NAA 0.1 mg·L-1+6-BA 2.0 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂7 g·L-1最佳，增殖率达83.33%。     

Auxin Regulation of Flower Bud Formation in Tobacco Explants

Smulders, M. J. M, Janssen, G. F. K, Croes, A. F., Barendse,G. W. M., and Wullems, G. J. 1988. Auxin regulation of flowerbud formation in tobacco explants.—J. exp. Bot. 39: 451–459. The auxin 1-naphthaleneacetic acid (NAA) induces flower budformation in tobacco explants at concentrations between 0.1and 10 mmol m^–3. This regeneration process is completedin 14 d. The presence of NAA in the medium is required onlyduring the first 4 d of culture. In this period the explantstake up NAA at a very high rate, which is proportional to theconcentration in the medium. Due to the high uptake from a limitedvolume, the external concentration diminishes and, as a consequence,the uptake rate declines rapidly. A negative correlation wasfound between medium volume and the NAA concentration optimalfor bud formation. It is concluded that it is not the concentrationbut the dose of hormone taken up during the induction periodwhich determines the number of flower buds formed. Key words: Auxin, NAA, development, tissue culture     

Auxin up-regulates MtSERK1 expression in both Medicago truncatula root-forming and embryogenic cultures

We have cloned a SOMATIC EMBRYOGENESIS RECEPTOR KINASE (SERK) gene from Medicago truncatula (MtSERK1) and examined its expression in culture using real time PCR. In the presence of the auxin 1-naphthaleneacetic acid (NAA) alone, root differentiation occurs from the proliferating calli in both the cultured highly embryogenic seed line (2HA) and a low to nonembryogenic seed line (M. truncatula cv Jemalong). Auxin stimulated MtSERK1 expression in both 2HA and M. truncatula cv Jemalong. Embryo induction in proliferating calli requires a cytokinin in M. truncatula and unlike root formation is substantively induced in 2HA, not M. truncatula cv Jemalong. On embryo induction medium containing NAA and the cytokinin 6-benzylaminopurine (BAP), expression of MtSERK1 is elevated within 2 d of initiation of culture in both M. truncatula cv Jemalong and 2HA. However, MtSERK1 expression is much higher when both NAA and BAP are in the medium. BAP potentiates the NAA induction because MtSERK1 expression is not up-regulated by BAP alone. The 2HA genotype is able to increase its embryo formation because of the way it responds to cytokinin, but not because of the cytokinin effect on MtSERK1. Although the studies with M. truncatula indicate that somatic embryogenesis is associated with high SERK expression, auxin alone does not induce somatic embryogenesis as in carrot (Daucus carota) and Arabidopsis. Auxin in M. truncatula induces roots, and there is a clear up-regulation of MtSERK1. Although our analyses suggest that MtSERK1 is orthologous to AtSERK1, which in Arabidopsis is involved in somatic embryogenesis, in legumes, MtSERK1 may have a broader role in morphogenesis in cultured tissue rather than being specific to somatic embryogenesis.     

应用稀土调控藏红花胚性愈伤组织的生长与分化

为提高藏红花(Crocus sativus)胚性愈伤组织的繁殖系数与出芽率, 以建立藏红花离体快繁体系, 解决其资源短缺问题, 采用两步法, 用稀土调控其胚性愈伤组织的生长与分化。结果表明, 在添加了0.25 mg·L^–1 NAA、3 mg·L^–1 6-BA和400 mg·L^–1 CH的B₅固体培养基中, 0.04 mmol·L^–1 La³⁺促进胚性愈伤组织生长的效果最佳, 繁殖系数为12, 是不添加稀土处理组的1.48倍; 在添加了0.25 mg·L^–1 NAA、3 mg·L^–1 6-BA和400 mg·L^–1 CH的1/2 B₅固体培养基中, 0.06 mmol·L^–1 Ce³⁺促进胚性愈伤组织分化出芽的效果最佳, 出芽率高达84.5%, 是不添加稀土处理组的1.81倍, 且高于国外报道的出芽率(40%)。初步解决了藏红花胚性愈伤组织生长慢和出芽率低等问题, 为建立高效稳定的藏红花离体快繁体系奠定了基础。     

火百合花器的鳞茎诱导和增殖培养研究

采用4.5 ～6.5cm长、花苞青色未开放的火百合花蕾作材料,切取其子房、花柱、花丝为外植体进行鳞茎诱导,结果表明:花丝的鳞茎诱导率最高,其次是花柱,子房的诱导率最低。以子房和花柱为外植体诱导出的鳞茎个体大小不一(1～7mm) ,以花丝为外植体诱导出的鳞茎则普遍偏小,但较整齐一致(3～4mm) ;小鳞茎诱导的最佳6-BA浓度是1.0mg/L。研究了基本培养基、6-BA浓度、NAA浓度对小鳞茎增殖的效应及不同蔗糖浓度对小鳞茎增重的影响,结果表明:小鳞茎增殖的最佳培养基是:MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L,4 %蔗糖对鳞茎增重效果最好。     

小黑杨快繁与再生体系的优化

利用已获得小黑杨无菌苗叶片,研究不同培养基和植物激素对不定芽诱导、丛生苗抽茎及幼苗生根的影响。结果表明：培养基和激素对小黑杨叶片不定芽的诱导及幼苗生根有一定影响。小黑杨叶片不定芽诱导的最佳培养基：MS+6 BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1,诱导率为100%。丛生苗诱导的最佳培养基：MS+6-BA 0.2 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1。幼苗生根的最佳培养基有两种：MS+NAA 0.25 mg·L^-1或MH+IBA 0.2 mg·L^-1,生根率大于99%。     

红籽鸢尾高频离体再生条件的初步筛选

红籽鸢尾(Iris foetidissima Linn.)为鸢尾科(Iridaceae)鸢尾属(Iris Linn.)多年生草本植物,原产于西欧和非洲北部。该种的叶鞘呈深绿色剑形,蒴果饱满且蒴果成熟开裂后露出红、橙黄和白等不同色泽的种子并一直垂挂到翌年春天,集观花、观叶和观果为一体,观赏价值较高。另外,该种还具有耐寒性好、在长江中下游地区四季常绿、适应性强及耐粗放管理等优