嗜肺军团菌感染小鼠后血清白介素12水平和巨噬细胞功能的变化

摘要：目的 探讨嗜肺军团菌感染Balb/c小鼠后血清白介素12（IL-12）水平和巨噬细胞功能的变化。方法 将36只健康Balb/c小鼠随机分为观察组和对照组各18例,观察组小鼠经腹腔注射嗜肺军团菌菌液0.10 mL,对照组小鼠则经腹腔注射等量的生理盐水,分别于注射后1周和1个月,检测并比较两组小鼠的血清IL-12水平和巨噬细胞功能。结果 注射1周后,观察组小鼠的血清IL-12水平为（14.98±2.90）Lg/mL,巨噬细胞的杀伤活性为（34.71±7.28）%,较对照组均有明显降低,组间比较差异均有统计学意义（P＜0.05）;注射1个月后,观察组小鼠的血清IL-12水平及巨噬细胞杀伤活性均有显著回升,组间比较异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 嗜肺军团菌感染Balb/c小鼠后1周,小鼠的血清白介素12水平及巨噬细胞的功能均有显著下降,且于注射后1个月恢复正常,临床上可将感染后1个月作为相关血清抗体的最佳制备时间。     

银杏叶提取物对豚鼠哮喘模型血红素氧合酶-1表达的影响

目的探讨银杏叶提取物(Egb761)对豚鼠哮喘模型血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响.方法 将30只豚鼠随机分为3组(n=10)(1)正常组;(2)哮喘组;(3)治疗组.测定全血一氧化碳血红蛋白(COHb)的百分比含量、气道阻力并观察气道壁嗜酸性粒细胞(EOS)浸润情况, 用免疫组织化学染色方法观察HO-1在豚鼠肺组织中的表达变化.结果各组气道上皮细胞HO-1阳性表达的平均吸光度分别为 0.170±0.020、0.707±0.058、0.397±0.034.哮喘组HO-1的表达水平显著高于正常组(P<0.01).治疗组HO-1的表达水平显著低于哮喘组(P<0.01). 结论银杏叶提取物能显著抑制哮喘豚鼠气道壁内上皮细胞HO-1的表达,提示银杏叶提取物抑制HO-1的表达可能是银杏叶提取物治疗哮喘的作用机制之一.     

维生素C多聚磷酸酯对小鼠生长、淋巴细胞转化以及血清皮质酮含量的影响

目的探讨维生素C多聚磷酸酯对小鼠生长、淋巴细胞转化及血清皮质酮含量的影响以及淋巴细胞转化和血清皮质酮含量在热应激条件下的变化。方法在4组小鼠的饲料中依次添加35%的维生素C多聚磷酸酯,添加剂量分别为0(对照组)、500(实验Ⅰ组)、2500(实验Ⅱ组)和5000mg/kg(实验Ⅲ组),在(21±1)℃下饲养4周,对照组和实验Ⅱ组各取一半小鼠经(35±1)℃热应激处理24h。用特定生长率的方法测定小鼠的生长,用噻唑蓝还原法测定淋巴细胞转化,用荧光法测定血清中皮质酮的含量。结果各组间ICR小鼠的生长、淋巴细胞转化无明显差异;实验Ⅱ组的血清皮质酮含量明显低于对照组,其他组间差异无显著性。热应激后,淋巴细胞转化无明显变化;血清皮质酮含量较应激前有显著上升,但实验Ⅱ组仍显著低于对照组。结论在饲料中添加维生素C多聚磷酸酯对小鼠的特定生长率和淋巴细胞转化均无显著影响,但会降低小鼠血清皮质酮的含量。     

半胱胺盐酸盐减缓山羊手术后细胞免疫抑制效应的实验研究

16只摄食干草+精料日粮的成年阉公山羊随机分为试验(n=8)和对照组(n=8)分别接受瘤胃、十二指肠两次瘘管安装手术.试验组自手术前至试验结束给予口服半胱胺(15 mg·kg·goat-1·d-1)处理.两组分别于手术前1天、第一次(瘤胃瘘管)手术后第8天,第二次(十二指肠瘘管)手术后第4天和第13天经颈静脉采血,测定血清白细胞介素-2(IL-2)、考的松(Cortisol)浓度和淋巴细胞转化率(SI).手术前,试验和对照组之间IL-2(0.82±0.1 vs1.03±0.22 μg/L)、Cortisol浓度(20.48±4.52 vs20.80±9.93μg/L)、淋巴细胞转化率(90.72±7.25 vs 129.22±18.59)没有显著差异(p＞0.05).手术后对照组血清IL-2浓度(p＜0.05)和外周淋巴细胞转化率(p＜0.05)严重下降,Cortisol浓度上升(p=0.08);试验组各指标变化不大.两组相比,试验组IL-2浓度高于对照80-90%(p＜0.05),淋巴细胞SI高3倍左右(p＜0.05);Cortisol浓度则呈减少趋势(p=0.11).结果表明半胱胺制剂阻止手术后山羊外周白细胞介素-2和淋巴细胞的降低,减轻手术应激对细胞免疫的抑制.     

侧脑室注射R-α-四基组胺对哮喘豚鼠呼吸道P物质样免疫反应物的影响

目的　应用免疫组织化学方法观察侧脑室注射组胺H3 受体激动剂R α 甲基组胺对哮喘豚鼠气道内P物质样免疫反应物的影响。方法　豚鼠首先腹腔注射卵蛋白致敏 ,给药组给予豚鼠股静脉注射卵蛋白激发哮喘发作后 ,再侧脑室注射组胺H3 受体激动剂R α 甲基组胺 (5 μg)。哮喘组豚鼠在诱发哮喘发作后侧脑室注射等量生理盐水。对照组豚鼠腹腔注射等量生理盐水。经肺动脉灌注 4 %多聚甲醛 ,取气管、支气管和肺组织 ,冰冻切片 ,做P物质免疫组织化学染色。结果　气管、支气管和肺泡间隔内的P物质样免疫反应物在哮喘发作组明显多于对照组 ,在给药后 10min组明显少于哮喘组 ,给药后 2 0min组已接近正常组。结论　经侧脑室途径激动中枢组胺H3 受体后 ,哮喘豚鼠呼吸道内神经源性炎症介质P物质减少 ,提示中枢组胺H3 受体参与对哮喘气道神经源性炎症的调控。     

MAGE-3 DNA疫苗的构建及其免疫效果的观察

通过RTPCR方法扩增MAGE-3 cDNA,以pcDNA3.1+为载体,构建重组表达质粒pcDNA3-1/MAGE-3。重组质粒用脂质体转染鼠B16细胞,经RT-PCR、细胞免疫染色及免疫印迹法鉴定转化细胞中MAGE-3的表达。以100μg质粒剂量肌肉注射接种小鼠,间隔10天,共3次,以空载体和PBS为对照。结果,重组质粒免疫的小鼠,其脾淋巴细胞对MAGE-3阳性靶细胞的杀伤活性为51.08±7.41%,与空载体组（8.44±1.89%）及PBS组（5.76±1.75%）相比,差异有显著性（P<0.01）,而对MAGE-3阴性靶细胞的杀伤活性分别为8.21±1.65%,7.68±1.56%和5.13±1.42%,其差异无显著性;MAGE-3 DNA疫苗组免疫血清1∶15稀释时能检测到抗MAGE-3抗体,脾细胞培养上清中Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2水平明显升高,外周血中CD4+、CD8+T细胞也提高,小鼠肿瘤的生长速度明显减慢,与对照组相比,差异显著（P<0.01）。说明MAGE-3重组质粒免疫小鼠可以诱导小鼠产生特异性的体液和细胞免疫应答。     

MAGE-3 DNA疫苗的构建及其免疫效果的观察

通过RT PCR方法扩增MAGE 3cDNA ,以pcDNA3 1+为载体 ,构建重组表达质粒pcDNA3 1 MAGE 3。重组质粒用脂质体转染鼠B16细胞 ,经RT PCR、细胞免疫染色及免疫印迹法鉴定转化细胞中MAGE 3的表达。以 10 0 μg质粒剂量肌肉注射接种小鼠 ,间隔 10天 ,共 3次 ,以空载体和PBS为对照。结果 ,重组质粒免疫的小鼠 ,其脾淋巴细胞对MAGE 3阳性靶细胞的杀伤活性为 51 0 8± 7 41% ,与空载体组 (8 44± 1 89% )及PBS组 (5 76± 1 75% )相比 ,差异有显著性 (P <0 0 1) ,而对MAGE 3阴性靶细胞的杀伤活性分别为 8 2 1± 1 65% ,7 68± 1 56%和 5 13±1 42 % ,其差异无显著性 ;MAGE 3DNA疫苗组免疫血清 1∶15稀释时能检测到抗MAGE 3抗体 ,脾细胞培养上清中Th1类细胞因子IFN γ、IL 2水平明显升高 ,外周血中CD4+、CD8+T细胞也提高 ,小鼠肿瘤的生长速度明显减慢 ,与对照组相比 ,差异显著 (P <0 0 1)。说明MAGE 3重组质粒免疫小鼠可以诱导小鼠产生特异性的体液和细胞免疫应答     

不同病毒载量慢性乙型肝炎患者树突状细胞 B7-H1 表达及对 免疫功能的影响 *

摘要 目的： 观察慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞表面共刺激分子 B7-H1 的表达及对免疫功能的影响。方法： 检测慢性乙型 肝炎患者肝功能、 HBV-DNA 水平, 将患者分为高病毒载量高 ALT 组 （ A 组） 、 高病毒载量低 ALT 组 （B 组） 、低病毒载量组 （C 组） 及正常对照组 （D 组）。 流式细胞术检测各组患者外周血树突状细胞表面 HLA-DR、 CD80、 CD86、 CD83、 CD1a、 B7-H1 表达, 酶联免 疫吸附试验 （ELISA ） 检测 DC 培养上清液和混合淋巴细胞培养上清液中细胞因子 IL-12、 IL-10 水平。结果： 慢性乙肝患者的树突 状细胞膜表面分子 HLA-DR、 CD80、 CD86、 CD83、 CD1a 的表达均明显降低 (A、 B、 C 组与 D 组比较分别为 42.3± 4.9%、 46.7± 7.0 %、 52.5 ± 6.3 % vs 94.5± 3.5%; 34.5 ± 5.3%、 39.9 ± 6.4%、 45.6 ± 5.2 % vs 90.6± 6.5%; 38.2 ± 8.6%、 36.1 ± 5.4%、 42.5 ± 6.8 % vs 87.7 ± 5.1%; 28.3 ± 6.5%、 25.6 ± 3.4%、 33.5 ± 4.3% vs 82.6 ± 4.8%; 32.3 ± 5.8%、 29.3 ± 5.3%、 48.3 ± 4.9 % vs 68.2 ± 5.2 % P< 0.05), B7-H1 表达水平明显升高(27.48± 21.4%、 21.83± 20.2%、 15.43± 10.32 % vs 4.23± 2.2 % P<0.05)。B7-H1 表达水平与 ALT 呈正相关, 与 IL-12 水平呈负相关。 结论： 慢性乙型肝炎患者树突状细胞功能低下, 其机制可能与树突状细胞高表达 B7-H1 有关。 B7-H1 高表达抑制了淋巴细胞的功能, 导致乙型肝炎病毒持续感染。     

侧脑室注射R-α-甲基组胺对哮喘豚鼠呼吸道P物质样免疫反应物的影响

目的:应用免疫组织化学方法观察侧脑室注射组胺Hs受体激动剂R-α-甲基组胺对哮喘豚鼠气道内P物质样免疫反应物的影响。方法：豚鼠首先腹腔注射卵蛋白致敏,给药组给予豚鼠股静脉注射卵蛋白激发哮喘发作后,再侧脑室注射组胺Hs受体激动剂R-α-甲基组胺(5μg)。哮喘组豚鼠在诱发哮喘发作后侧脑室注射等量生理盐水。对照组豚鼠腹腔注射等量生理盐水。经肺动脉灌注4％多聚甲醛,取气管、支气管和肺组织,冰冻切片,做P物质免疫组织化学染色。结果：气管、支气管和肺泡间隔内的P物质样免疫反应物在哮喘发作组明显多于对照组,在给药后10min组明显少于哮喘组,给药后20min组已接近正常组。结论：经侧脑室途径激动中枢组胺Hs受体后,哮喘豚鼠呼吸道内神经源性炎症介质P物质减少,提示中枢组胺Hs受体参与对哮喘气道神经源性炎症的调控。     

低铅暴露对大鼠海马突触可塑性范围的影响

长时程增强(LTP)和长时程抑制(LTD),作为突触可塑性变化的两种主要形式,被认为是学习记忆的可能机制.突触可塑性范围可以定量的表征突触可塑性的变化.应用在体电生理技术,在同一只动物上记录LTP和LTD,研究了发育过程中慢性铅暴露对大鼠海马齿状回颗粒细胞突触可塑性范围和双脉冲易化的影响.对照组的LTP、LTD的幅度分别是187.9±6.2%(n＝7),85.2±1.6%(n＝7),而铅处理组分别为140.5±1.2%(n＝7),102.8±3.8%(n＝7).与对照组相比,铅处理组的LTP的幅度降低了47.4%,LTD的诱导几乎完全被铅损伤.先诱导出LTP后再通过低频刺激则可以在铅处理组诱导出LTD(81.5±2.2%(n＝7)),但远远小于对照组(66.8±4.3%(n＝7)).对照组突触可塑性范围是103.1±11.5%(n＝7),是铅处理组突触可塑性范围(37.7±9.6%(n＝7))的2.7倍.在对照组,双脉冲易化反应是从脉冲间隔20ms时开始,而铅处理组则是从50ms开始.当脉冲间隔为70ms时,两组的双脉冲易化幅度均达到最大值,但易化的强度有显著的差异,分别为211.6±32.2%(n＝7),11.1±26.9%(n＝7).结果表明铅显著地抑制了大鼠海马齿状回颗粒细胞的双脉冲易化效应,降低了双脉冲易化的间隔范围和突触可塑性范围.这可能是铅损伤学习记忆功能的机制之一.     

免疫核糖核酸研究的进展

从定型的免疫活性细胞中抽提出的核糖核酸制品称为免疫核糖核酸。各种体内或体外的试验证明免疫核糖核酸能超越种间屏障特异地传递免疫反应。现在有证据表明,免疫核糖核酸可能具有信息核糖核酸的分子特征;它的主要来源是巨噬细胞,而受其作用后产生效应的细胞是 T 淋巴细胞或 B 淋巴细胞。免疫核糖核酸研究是一项意义重大而探索性较强的工作,本文着重讨论了关于其化学本质、细胞来源和作用机理等方面的新近进展,并且指出了今后工作中有待解决的若干关键问题。     

抗豚鼠IgG1单克隆抗体的制备

本研究应用B淋巴细胞杂交瘤技术,建立了能持续稳地分泌豚鼠IgG1 McAb的杂交瘤细胞株NB_(11)B_6和NB_(11)N_3。两株细胞分泌的单克隆抗体(MeAb)经间接血凝检测效价均达到1:12400以上,本McAb经检测属小鼠IgG_1亚类。该杂交瘤细胞株染色体的数目为93.12±12.3和103.25±11.2对,经半年的冻存与复苏分泌McAb性能稳定。     

大鼠心肌缺血再灌注模型中低温处理对心肌无复流的影响分析

摘要 目的：探究低温治疗对大鼠心肌缺血模型再灌注后组织无复流的相关影响。方法：选择标准成年Sprague Dawley大鼠40只（雄性雌性各20只）,平均体重（205.6±1.5）g,随机分为对照组和观察组,每组各20只,建立心肌缺血再灌注模型,对照组给予常温处理,观察组则在再灌注结束时晚期给予低温干预,对两组大鼠心肌组织无复流的差异及相关变量进行比较分析。结果：观察组的心肌缺血高危区域所占的百分比平均水平为（16.7±3.5）%,低于对照组的（35.6±2.5）%（P<0.05）;观察组的组织坏死区域所占的百分比平均水平为（23.8±5.1）%,低于对照组的（56.4±3.9）%（P<0.05）。与对照组相比,观察组再灌注结束时心率降低,收缩压和平均血压升高（P<0.05）;两组大鼠心肌染色宏观评价显示心肌梗死面积无明显差异,但观察组无复流的区域小于对照组。结论：在大鼠心肌缺血动物模型中通过再灌注后晚期给予治疗性的低温处理能够显著改善微血管的堵塞,并且此效应与心肌梗死的面积无关。     

hsBAFF对小鼠脾脏B淋巴细胞增殖与免疫应答及胞内Ca2+水平的影响

目的：探讨大肠杆菌表达的人源可溶性B淋巴细胞激活因子hsBAFF对小鼠脾脏B淋巴细胞免疫反应及其对胞内游离Ca^2＋信号变化的影响。方法：选择20只健康ICR小鼠,雌雄各半,随机分成两组（n=10）：①对照组;②hsBAFF实验组。实验组小鼠腹腔注射含hsBAFF（0．1mg／kgbw）的PBS溶液,对照组注射同等剂量的PBS溶液．连续8d。用MTT法检测小鼠脾脏B淋巴细胞的增殖及其对LPS刺激的免疫反应,并用激光共聚焦显微镜分析脾脏B淋巴细胞胞内钙离子水平（[Ca^2＋]i）变化。结果：hsBAFF注射小鼠的脾脏B淋巴细胞增殖和对LPS刺激的免疫反应均明显高于对照组（P〈0．05）;hsBAFF注射组[Ca^2＋]i荧光强度维持在相对稳定的高水平上波动,平均荧光强度显著高于对照组（P〈0．01）,且荧光强度变化率小于对照组。结论：大肠杆菌表达的hsBAFF能促进B淋巴细胞的增殖和免疫应答,从而增强机体免疫功能。hsBAFF激活小鼠脾脏B淋巴细胞可能与[Ca^2＋]i升高有关。     

时间分辨免疫荧光分析测定人血清铁蛋白

用一种新型非放射性免疫分析——时间分辨荧光免疫分析法测定人血清铁蛋白含量。方法灵敏度达2ng/ml;测量范围5—1500ng/ml;批内、批间变异系数分别为7.1±0.8％和10.0±1.3％(x±SD);回收率为98.4±7.4％。测定值与RIA法测定值比较,相关性良好。     

雌激素受体在肺腺癌A549细胞系EMT过程中的作用

摘要 目的：探讨何种雌激素受体在肺腺癌A549细胞系上皮间质转化（EMT:Epithelial-mesenchymal transition）过程中发挥作用。方法：用雌激素受体拮抗剂分别抑制A549细胞系中的雌激素 和 受体,再用浓度为1×10-8 mol/L的雌激素刺激抑制前后的各组细胞系,用q-RT-PCR及Western blot实验检测各组细胞中EMT标志物的表达量,用Transwell实验检测各组细胞迁移量,计算各组间有无统计学差异。结果：雌激素组细胞中Vimentin的mRNA表达量为5.81±0.71,显著高于空白对照组,E-cadherin的mRNA表达量为0.43±0.07,显著低于空白对照组,细胞迁移数量为80.17±8.82,显著高于空白对照组,组间有统计学差异。用雌激素 受体拮抗剂MPP处理前后Vimentin的mRNA表达量分别为7.63±0.92和6.29±0.73,均显著高于空白对照组,组间有统计学差异;E-cadherin的mRNA表达量分别为0.39±0.05和0.42±0.06,均显著低于空白对照组,组间有统计学差异;细胞迁移数量分别为85.21±11.56和78.69±9.63,均显著高于空白对照组,组间有统计学差异。雌激素加雌激素 受体拮抗剂PHTPP组及雌激素加雌激素 和 受体拮抗剂组Vimentin的mRNA表达量分别为1.21±0.15和1.17±0.13,E-cadherin的mRNA表达量分别为0.86±0.12和0.93±0.11,细胞迁移数量分别为39.85±5.22和37.21±4.95,与对照组无统计学差异。各组细胞中EMT标志物蛋白表达量与mRNA表达量趋势相同。结论：雌激素?茁受体是雌激素促进A549细胞系发生EMT过程的重要靶点,在肺腺癌的肿瘤发生和发展过程中发挥了主要作用,可以作为进一步靶向治疗的研究方向。     

噪声对豚鼠内耳组织能量代谢的影响——噪声致聋机理

豚鼠暴露于125dB SPL噪声下1小时后即刻、1天内耳组织中葡萄糖(46.0±18.3μg/mg蛋白,102.2±56.3μg/mg蛋白)及丙酮酸量(30.6±8.4μg/g蛋白,47.1±15.7μg/g蛋白)均显著地高于对照组(葡萄糖26.4±8.9μg/mg蛋白,丙酮酸23.7±8.9μg/g蛋白),p<0.05。与此同时豚鼠听功能耳廓反射阈衰减dB值(30.0±12.2dB,44.8±2.5dB)显著地低于暴露前水平(49.4±2.9dB,46.2±1.9dB),P相似文献   

妊娠和激素干预对豚鼠卵巢囊淋巴孔的影响

本实验以台盼蓝为示踪剂,观察成年雌豚鼠在妊娠、注射促排卵激素和雄激素时,卵巢囊淋巴孔对示踪剂的吸收情况,并结合扫描电镜和计算机图像处理,对豚鼠卵巢囊内壁的淋巴孔进行观察和统计,以研究妊娠和激素干预对豚鼠卵巢囊淋巴孔开放和淋巴吸收功能的影响。结果表明,妊娠组卵巢囊吸收示踪剂的量最多,促排卵组次之,雄激素组最少,且组间两两比较均有显著性意义(P<0.05)。在每1000μm~2的视野中,妊娠组卵巢囊淋巴孔的开放面积为189.9±48.7μm~2,促排卵组为104.4±31.2μm~2,雄激素组为40.5±18.7μm~2,组间两两比较均有显著性意义(P<0.05)。妊娠组卵巢囊内层纤毛柱状上皮的分泌颗粒数量最少,而促排卵组的分泌颗粒较多,且纤毛最活跃。本实验研究结果表明,妊娠和激素干预能影响豚鼠卵巢囊淋巴孔的开放和吸收,囊内卵巢的功能状态与豚鼠卵巢囊淋巴孔的调控密切相关。     

哮喘大鼠肺泡巨噬细胞蛋白激酶C-α表达及丹参对其影响

探讨蛋白激酶 C (Protein Kinase-α,PKCα)在大鼠哮喘模型肺泡巨噬细胞中的表达及丹参的治疗作用。哮喘模型大鼠分为四组。 A组正常对照 ;B组即刻激发组 ;C组哮喘发作一周组 ;D组丹参治疗组。每组分别测定肺功能 ,支气管肺泡灌洗液 (BAL F) ,分离巨噬细胞作免疫细胞化学染色 ,观察 PKCα在大鼠哮喘模型肺泡巨噬细胞中的表达及丹参对其影响。结果发现 A组中肺泡巨噬细胞见 PKCα少量表达 ,而 B、 C、 D组则见大量巨噬细胞 PKCα表达 ,但 D组巨噬细胞 PKCα表达比例显著低于 B、 C组 (P<0 .0 1 )。四组肺泡巨噬细胞 PKCα表达百分比分别为 A组 3.49± 2 .40 % ,B组 85 .0 6± 5 .46 % ,C组 90 .2 3± 2 .87% ,D组 37.89± 7.2 1 %。且 A、 B、 C组肺泡巨噬细胞 PKCα表达比例与气道阻力呈正相关 (n=2 1、 r=0 .74　 P<0 .0 1 ) ,结果说明丹参对哮喘大鼠 BAL F中巨噬细胞 PKCα表达有抑制作用 ,提示肺泡巨噬细胞 PKCα表达参与哮喘发病过程 ,而丹参则对这一过程有抑制作用。