人脐带间充质干细胞微囊减轻小鼠急性肾损伤的研究

目的探讨人脐带间充质干细胞（MSCs）源性细胞外囊泡Oct-4 mRNA对受损的肾小管上皮细胞修复的作用及相关机制。 方法将培养的缺氧损伤肾小管上皮细胞置于含有人脐带MSCs细胞外囊泡及不同对照培养液的培养腔室玻片上孵育48?h,应用BrdU及TUNEL染色,检测各组细胞增殖或凋亡情况。将急性肾损伤模型小鼠分为4组：空白组、EVs组、Oct-4过表达组、Oct-4低敲组。并按照分组分别注射磷酸盐缓冲液（Vehicle）,人脐带MSCs细胞外囊泡（EVs）,过表达Oct-4基因的人脐带MSCs细胞外囊泡（EVs?+?Oct-4）及敲除Oct-4基因的人脐带MSCs外囊泡（EVs-Oct-4）,并在注射48?h及2周后采血测肌酐（Crea）及尿素氮（BUN）,了解肾功能变化;对各组上述处理后的肾组织应用TUNEL与增殖细胞核抗原表达量检测各组肾脏细胞凋亡与增殖情况;通过Masson染色检测了各组肾脏纤维化程度;通过PCR探索肾损伤后肾组织细胞Snail基因的表达变化。数据分析采用方差分析和SNK-q检验。 结果EVs?+ Oct-4处理缺氧的肾小管上皮细胞48?h后,TUNEL染色显示具有最少的凋亡细胞数（0~1）/?HPF,BrdU显示有最多的增殖细胞（7±2）/HPF。EVs,EV-Oct-4以及Vehicle对体外缺氧肾小管上皮细胞的上述作用依次减弱（P?相似文献   

嗜肺军团菌感染小鼠后血清白介素12水平和巨噬细胞功能的变化

摘要：目的 探讨嗜肺军团菌感染Balb/c小鼠后血清白介素12（IL-12）水平和巨噬细胞功能的变化。方法 将36只健康Balb/c小鼠随机分为观察组和对照组各18例,观察组小鼠经腹腔注射嗜肺军团菌菌液0.10 mL,对照组小鼠则经腹腔注射等量的生理盐水,分别于注射后1周和1个月,检测并比较两组小鼠的血清IL-12水平和巨噬细胞功能。结果 注射1周后,观察组小鼠的血清IL-12水平为（14.98±2.90）Lg/mL,巨噬细胞的杀伤活性为（34.71±7.28）%,较对照组均有明显降低,组间比较差异均有统计学意义（P＜0.05）;注射1个月后,观察组小鼠的血清IL-12水平及巨噬细胞杀伤活性均有显著回升,组间比较异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 嗜肺军团菌感染Balb/c小鼠后1周,小鼠的血清白介素12水平及巨噬细胞的功能均有显著下降,且于注射后1个月恢复正常,临床上可将感染后1个月作为相关血清抗体的最佳制备时间。     

微酸性电解水和紫外光结合对采后六妹羊肚菌的保鲜作用

联合使用微酸性电解水和紫外光（SAEW+UV）处理食品是一种延长食品保质期的有效方法。本研究在20℃条件下,观察经SAEW+UV处理六妹羊肚菌Morchella sextelata采后9d内品质的变化。SAEW+UV处理能减少六妹羊肚菌表面附着的细菌和真菌数,提高六妹羊肚菌中超氧化物歧化酶和维生素C含量,降低多酚氧化酶、过氧化物酶含量,并在此基础上改善六妹羊肚菌储存过程中褐变及质地软化,而对六妹羊肚菌失重率、风味和营养成分无明显作用。转录组分析发现,SAEW+UV处理能上调六妹羊肚菌涉及抗氧化酶的基因表达,下调细胞壁降解、细胞凋亡和黑色素合成的基因表达,该结论与上述品质分析结果一致。综上,SAEW+UV处理能够延长六妹羊肚菌的保鲜期。     

猪FcγRIII的原核表达及多克隆抗体的制备

目的：构建猪FcγRIII 基因的原核表达载体,诱导表达重组蛋白,制备鼠抗猪 FcγRIII 抗血清。方法：从质粒pTG19-T-FcγRIII中用PCR方法克隆到编码完整猪FcγRIII蛋白分子的基因片段,将其插入到原核表达载体pET-32a中,构建了猪FcγRIII 原核表达载体pET-FcγRIII ,转化大肠杆菌BL21 (DE3) ,IPTG诱导蛋白表达,经尿素洗涤纯化后,以纯化后的融合蛋白FcγRIII-His 为抗原免疫小鼠,获得抗血清。Western blotting、ELISA 法鉴定获得的抗血清,ELISA 结果显示抗体效价为1∶16000,具有高度特异性,免疫印迹结果显示制备的多抗可以与重组猪FcγRIII蛋白特异性结合。结果：成功构建猪FcγRIII原核表达载体,纯化到融合蛋白FcγRIII-His,用纯化的融合蛋白免疫小鼠制备了多克隆抗体,Western blotting、ELISA 法证实多克隆抗体制备成功。结论：成功获得了猪 FcγRIII 多克隆抗体,为进一步研究猪FcγRIII 蛋白的功能奠定了基础。