论文提要

电子显微镜观察应用于组织化孛研究,可以查明生化功能与细胞成分间的失系。由于被脱氢酶系作用后,亚碲酸钾还原成碲或氧化碲,这些产物是不溶性的,并且电子不能透过它,因此这个反应可以应用于电子显微镜观察脱氢酶系活力的分布。内原的脱氢酶系组织化学定位,是将含有亚碲酸钾的反应液直接注射到活体的血管内、体腔内和其他腔内,或将新鲜组织块与反应液保温。琥珀酸脱氢酶系的组织化学定位,是先将新鲜组织块于0.44M蔗糖溶液中洗2小时,或将组织块于低温冰冻,然后融化,使组织中的内原脱氧酶系活力完全消失,而琥珀酸脱氢酶活力仍可保     

焦性磷酸酶的组织化学显示法

甲) 硷性焦性磷酸酶(alkaline pyrophosphase)的显示法: 1) 新鲜组织片固定于冷的5%中性福尔马林液中(此液含有0.9%氯化钠)1小时。 2) 以0.9%氯化钠洗10—20分钟。 3) 冰冻切片(20—35微米),切片径入0.9%氯化钠中或酶作用基液中(Substrate solution)。 4) 切片入酶作用基液内,在37℃下作用3小时,基液之     

微小组织冰冻快速制片技术

目的摸索提高微小组织冰冻快速制片质量的方法。方法针对小组织冰冻切片中常常出现组织切完、多粒组织切片不全、冰晶、染色不均匀等问题,采用预先制作冷冻平台、快速冷冻等方法来制作优质的冰冻切片。结果组织铺平可使组织切片完整,快速冷冻可减少冰晶形成,使组织结构更清晰,及时固定和加温染色可使细胞核染色更鲜艳,核、质对比明显。结论组织铺平、速冻、固定、染色等都是提高微小组织制片质量的关键。     

酶免疫组织化学技术

酶免疫组织化学技术,是以辣根过氧化物酶(Horsenadish peroxidase 简称HRP)结合在抗体、抗原或中间体上,对组织或细胞进行的免疫化学反应。由于酶对底物的对数放大作用和成色反应,增强了分辨力,使抗原抗体反应具有较高的的敏感性和特异性。本法具有操作简便,试剂稳定和不需用特殊设备等优点;在细胞涂片、冰冻切片和石腊切片中,均可在光镜或电镜下定位或定量组织细胞中的各种成份和研究细微结构等。因此,自1966年 Nakane 等建立酶免疫技术以来,发展很快。最初主要是通过化学交联剂将酶与抗体交联,用以检测组织中的相应抗原,相     

植物冰冻切片条件的优化及其与石蜡切片在组织化学应用中的比较

冰冻切片是植物组织学研究中一项重要的实验技术,冷冻温度和冷冻时间是决定切片质量的关键因素。通过比较15种冰冻切片条件,得出植物组织直接冰冻切片较适宜的冷箱温度、冷台温度和冷冻时间。同时,通过对5种植物的不同组织进行组织化学染色,比较了新鲜材料直接冰冻切片与常规石蜡切片在不同化学成分鉴定上的异同及各自的适用范围。结果表明,对于多糖、蛋白质和角质,两种切片方法的鉴定结果比较一致,但对于脂肪只能采用冰冻切片技术。研究结果对植物组织学实验和研究方法的改进具有一定的参考价值。     

植物基因表达的组织原位杂交和原位组织化学分析技术的改进

改良了组织原位杂交和原位酶组织化学分析的方法。主要改进有：原位杂交采用简化的ＦＡＡ固定程序,常规石蜡包埋,切片时采取液氮深冷冻;以随机引物法标记的ＤＮＡ代替转录标记的ＲＮＡ作探针,在保湿盒中进行杂交,而不用矿物油覆盖。组织化学分析中用含铁氰化钾的显色液进行ＧＵＳ染色后再包埋、切片的程序,代替先包埋、切片再显色的常规方法,可最大限度地保持酶活性的真实性。     

植物酶的组织和细胞化学定位研究方法

酶是参与植物体内生化反应的特殊蛋白质。在保持活组织和细胞结构完整性的条件下,利用组织化学、细胞化学、免疫学和显微检测等技术研究酶的即位定位,是了解酶在组织、细胞和亚细胞中的分布、活性动态与定量及酶功能等的重要途径。对植物体中酶定位的组织化学和细胞化学方法的概念、原理与研究进展进行了综述,并根据国际酶化学分类编号顺序,分别介绍了25种酶的组织化学染色定位所用的反应介质和染色方法及46种酶的细胞化学定位方法的参考文献。     

一种冰冻刻蚀装置的设计及应用

冰冻刻蚀(或断裂)技术与其他常规电镜技术相比具有许多优点。样品的快速冰冻可起到物理固定的作用这不仅减少了化学固定引起的人为改变,而且也省去了固定和脱水等步骤;对生物标本进行不同时期的冰冻可以得到不同阶段的细胞复型;在膜的研究方面;它可与生物化学方法相辅,同样起到生物化学方法所起的弱化膜疏水键的作用,从而使两层疏水性面的任何侧面的三维结构暴露出来,远比超薄切片所得到的两维片层结构要丰富。     

新鲜冰冻肌肉的纵切方法与同时显示肌原纤维三磷酸腺苷酶-乙酰胆碱酯酶的细胞化学技术

我们介绍一种用冷刀纵切新鲜冰冻肌肉的方法。此种冷刀由半导体致冷器致冷,并附有冷却的防卷板。为了得到满意的切片,必须在冷刀面上立即再次冻结由载玻片或盖玻片粘贴的切片,并且在作组织化学处理以前经冰冻干燥。然后,我们又介绍了在上述的纵切片上同时显示肌原纤维三磷酸腺甙酶和乙酰胆碱酯酶的细胞化学技术。在经过肌原纤维三磷酸腺甙酶-乙酰胆碱酯酶反应的切片上,所见运动终板的数目和形态,与仅有乙酰胆碱酯酶反应的连续切片相比较似乎没有明显差异。这一技术将使某一特定肌纤维有可能同时显示出其组织化学类型和运动终板。     

抗原修复技术在免疫组织化学中的作用

免疫组织化学是一门免疫学与病理形态学相结合的新兴学科 ,是现代生物医学的一项重要方法学 ,具有操作简单、敏感性高、特异性强等特点 ,已经广泛应用于临床病理及其相关学科的研究之中 [1,2 ] 。目前采用甲醛为常规标本固定剂 ,醛基与组织蛋白质中的氨基形成交联使抗原决定簇被遮蔽 ,从而影响免疫组织化学结果 ,而且这种作用随着固定时间增长而加重 [3 ]。抗原修复技术的出现 ,使得原来许多只能在冰冻切片作免疫组织化学得以在石蜡切片上实现 ,抗原修复技术在免疫组织化学中的作用愈加明显 ,并且对免疫组织化学方法的敏感性起着决定性作用[…     

冰冻切片染色方法的改进

冰冻切片染色方法的改进熊正文,胡海霞,苏红,商磊岩（张家口解放军二五一医院病理科,０７５０００）冰冻切片是肿瘤病理快速诊断不可缺少的手段,目前,常用的固定染色方法存在着对组织结构、核染色质颗粒不清晰等缺点,针对上述缺点,经参考有关文献,对ＡＡＦ液进行...     

脊髓组织内微血管过氧化物酶组织化学染色方法的实验研究

本文以正常及损伤脊髓组织为材料,对内源性过氧化物酶染色显示微血管的方法进行了实验研究。结果,组织用10％缓冲福尔马林4℃固定6—12小时,或微波固定40～120秒,冰冻切片30～50μm、DAB-NiCl显示血管最好。该方法不用灌注,对血管无扩张、破裂作用,无人为改变,可以定量或半定量判定组织器官活体时的血液循环,可用于正常及损伤脊髓组织内微血管形态学研究和定量分析。     

几种冰冻切片固定液固定效果的比较

<正>冰冻切片具有方便快捷的特点,对手术中的的快速病理诊断具有重要的意义。冰冻切片质量的好坏直接关系到术中病理诊断的结果,制做高质量的冰冻切片要求每一环节都要做到精益求精,尤以固定液的选择更为至关重要[1]。为了选择一种固定效果较为理想的固定液,我们选择了几种较为常用的固定液,切片染色后对比观察各自的固定效果对染     

一种冰冻切片漂片法免疫反应后再用石蜡切片的方法

本文采用组织冰冻切片５０μｍ进行双重标记的免疫组织化学漂片染色后,将其贴在塑料包埋盒内,脱水,经石蜡包埋切为１－３μｍ的薄片贴于载玻片上,干燥后脱水透明封片,最后进行切片观察,免疫阳性产物被准确定位于所观察的细胞或纤维上,得到满意的结果。为免疫组织化学形态学研究工作提供了新的手段。     

冰冻切片技术在植物显微结构和组织化学中的应用

介绍了冰冻切片法研究植物显微结构和组织化学的一般程序。结果表明,冰冻切片过程简单有效且图版清晰,在1d内可获得高质量图片,解决了利用普通石蜡切片观察植物样品需要进行脱水、浸透、包埋操作且耗时长的问题,在植物显微结构和组织化学研究中具有广阔的应用前景。     

固定对免疫组织化学反应的影响

为在组织固定过程中最大程度地减少固定剂对抗原性和组织结构的破坏,使免疫组织化学反应清晰可靠,我们观察研究了１０％中性缓冲福尔马林（ＮＢＦ）、酒精－甲醛（ＡＦ）、甲醛钙（Ｆｃａ）、Ｃａｒｎｏｙ氏液、Ｂｏｕｉｎ氏液、Ｋａｒｎｏｖｓｋｙ氏液和Ｈｅｌｙ氏液,分别对ＡＢＣ法显示基底膜Ⅳ型胶原,ＳＰ法显示血管内皮第Ⅷ因子和小肠固有层浆细胞的影响。结果表明用同一免疫组织化学方法显示不同固定剂固定的同一抗原物质可出现明显差异。本文还简要阐述了有关固定剂的作用机理与免疫组织化学染色的相关性。为观察研究组织和细胞的某种或某些抗原物质,而准确选择适当固定剂提供了一定依据     

组织保护液在NADH-TR组织化学方法中的应用

还原型辅酶 四唑氮还原酶 (NADH- TR)组织化学方法是区别肌肉 、 型纤维的重要技术 ,该酶的显示对神经肌病的病理诊断和鉴别诊断具有实用意义。传统的酶组织化学方法 ,染色前多采用 1 %甲醛 -钙液及丙酮等固定液在 4℃下对组织进行处理 ,而后冰冻制片。实际应用中发现 ,经这些方法处理的组织 ,染色后酶活性明显降低 ,且容易扩散。我们经大量实验 ,在酶显色前 ,改用自行研制的组织保护液 (Tissue Protection Solution,TPS)对组织进行前期处理 ;同时对孵育液的配方进行改良 ,收到了理想染色效果。现将此法介绍如下 :1 .材料和方法1 .1…     

冰冻切片法制作家兔眼球切片

用Ｓｚｅｎｔ－Ｇｙｏｒｇｙｒｉ液固定,明胶包埋,冰冻切片法制作 家兔眼球切片,获得了完整球壁的理想切片,其中睫状体,睫状突和睫状小带的形态结构更为理想。     

冰冻切片中用糊精对小昆虫上样

冰冻切片中用糊精对小昆虫上样冰冻切片法独特而简便。有节省时间,不改变组织和细胞形态,能保存脂肪、类脂等许多方面的优点,所以冰冻切片法常常被用于组织化学、组织学（尤其是神经组织学）、临床病理等多方面的研究。在操作过程中,对大的样品可以直接冻到样品台上,...     

ADA-LacZ融合基因直接注射导入小鼠皮肤组织后的表达

将ADA－LacZ融合基因经直接注射导入小鼠皮肤组织,用注射点处的皮肤组织制作冰冻切片,经组织化学方法显示：此融合基因可在皮肤成纤维细胞中表达一种具有腺苷脱氨酶（ADA）和β-半乳糖昔酶（β-gal）双重酶活性的融合蛋白,这种直接将融合基因导入体内进行表达的方式．为在基因治疗和基因疫苗研究中探索一条新的简便可行的外源基因在体内表达的途径,提供了有益的实验依据。