Alexion的MAb治疗狼疮相关肾损伤

在Alexion Pharmaceuticals Inc. (NewHaven,TC)开展的临床前研究中,有关抗-C5 Mab试验不断取得喜人结果。去年九月有报道,这种Mab可防止并治疗胶原-诱发的小鼠关节炎。目前Alexion公司的发现是,此Mab具有抗狼疮-相关肾损伤,即肾小球性肾炎的潜力。 用两种小鼠模型进行试验。一种是急性和快速进行性肾炎模型。这种肾炎往往导致狼疮肾炎患者的肾     

转基因小鼠产生全人抗体

GenPharm International Inc.和Cell Genesys Inc.分别研究、但几乎同时报道它们在转基因小鼠中生产了全人抗体。这一成果为利用单克隆抗体(Mab)治疗慢性病开辟了途径,而过去因小鼠的致免疫性、嵌合和“人化”Mab很难考虑这一疗法。     

Glaxo和Gilead合作进行基因靶向研究

Glaxo Group Research Ltd.(Greenford,米德尔塞克斯,英国)和Gilead Sciences(Foster City,加拿大)已同意合作研究基因靶向技术.Glaxo将投资二亿美元,得到Gilead的少量股份.协议包括一个五年的研究项目.与缺陷基因的基因治疗或诊断不同,基因靶向是用合成的分子阻滞产生致病蛋白的基     

生物技术简讯

Allelix Biopharmaceuticals公司与Glaxo Canada公司形成联合企业,临床开发治疗骨质疏松症的甲状旁腺激素(PTH)。PTH是一种在调节人体内骨骼矿物质代谢中起着重要作用的蛋白质。实验室研究表明,PTH每年能修复骨骼5～10％。Allelix-Glaxo联合企业对此将进行Ⅰ期和Ⅱ期临床研究以确定PTH对治疗骨质疏松症的安全性和有效性。项目费用将由两个公司共同承担。Allelin仍将保留PTH的供应权,而Glaxo将有权从事Ⅱ期试验结束后在全世界的临床和商品开发。这样,Allelix将获得专利权税及与加拿大合伙促销的权利。     

卡介苗对癌症和白血病的应用(续二)

<正> 六、BCG来源 几篇报导叙述某些BCG亚林对肿瘤比另一些菌株更有效。Mathe实验室报导了世界范围BCG菌株的比较(法国,英国、芝加哥、巴西、马德拉斯、日本、丹麦)。试验包括溶血斑形成的T和B淋巴细胞试验,T淋巴细胞的移植物抗宿主反应(GVHR)和小鼠对三种鼠肿瘤的免疫予防法。他们指出新鲜法国株在全部试验中都有效,而冻干伪所有菌株,包括法国菌株只对某些实验模型有效。然而,活菌数没进行比较,因而结果不能肯定。比较了Pasteur Phipps,Ticer Rostnthal和Glaxo亚株对豚鼠肝癌的作用,这些菌苗是分散生长并冻干制造的(活菌数相同)头3个菌株具有相等的肿瘤抑制特性而Glgxo亚株的肿瘤抑制作用差。液体-冻干Phipps与Glaxo。冻干菌苗相比较在大田鼠移植 SV 40肿瘤系统中使用BCC与照射肿瘤细胞联合使用,结果Glaxo菌株比Phipps亚株对肿瘤的抑制能力差的     

中药有效成分治疗类风湿关节炎研究进展

中药治疗类风湿性关节炎(RA)有几千年的临床应用历史,积累了丰富的经验.近年来,国内外针对中药复方和单味药的抗RA作用开展了大量的实验研究工作,很多中药的活性成分(组分)和作用机制得到初步阐明,开发出青藤碱注射液、雷公藤多苷片和白芍总苷片等新型RA治疗药物.本文对中药有效成分在治疗RA方面的研究进展进行综述.     

EB病毒与类风湿关节炎的相关性分析

目的:检测EB病毒VCA-IgA抗体在类风湿关节炎(RA)患者外周血中的表达,探讨EB病毒与RA的相关性.方法:分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法和实时定量PCR方法检测EB病毒VCA-IgA抗体和EB病毒DNA载量.同时分析EB病毒VCA-IgA抗体与RA患者的实验室指标抗CCP抗体、类风湿因子(RF)和血沉(ESR)的相关性.结果:223例SLE患者中,32例为EBV-VCA-IgA抗体阳性,259例健康对照者中16例阳性,KA患者阳性率明显高于对照组(14.35%VS 6.17%;P<0.01).RA患者EB病毒栽量也明显高于对照组.EB病毒VCA-IgA抗体阳性与抗CCP抗体、RF和ESR不相关.结论:EB病毒感染与RA相关.EB病毒VCA-IgA抗体阳性者有较高的DNA载量,RA的发病危险性亦高,EB病毒重新活化与RA活动有关.     

Analyzing the H19- and T65-epitopes in 38 kd phosphory-lated protein of Marek’s disease viruses and comparing chicken immunological reactions to viruses point-mutated in the epitopes

DNA sequencing analysis in 38 kd phosphorylated protein (pp38) ORF of Marek's disease viruses (MDV) indicated that all tested 10 virulent strains with different pathotypes had 'A' at base #320 and glutamine at aa#107 while reacted with monoclonal antibody (Mab) H19 in indirect fluorescence antibody test (IFA). However, vaccine strain CVI988 had 'G' at base#320 and arginine at aa#107 instead, when it was negative in IFA with Mab H19. Some strains were also reactive with Mab T65 in IFA while there was 'G' at base #326 and glycine at aa#109, but the other strains, which had 'A' at base #326 and glutamic acid at aa#109, did not react with Mab T65. By comparison of CVI988 to its point mutants CVI/rpp38(AG) and CVI/rpp38(AA) with 1 or 2 base(s) changes at bases #320 and /or #326 of pp38 gene for their reactivity with Mab H19 and T65, it was confirmed that the glutamine at aa#107 and glycine at aa#109 were critical to epi-topes H19 and T65 respectively. Immuno-reactions to MDV were compared in SPF chickens ino     

PAD4:一种治疗类风湿性关节炎的新靶酶

肽酰基精氨酸脱亚氨酶4(PAD4)催化肽酰精氨酸残基转变为肽酰瓜氨酸残基,其活性失调与类风湿性关节炎(RA)的发生与发展有关.目前PAD4被认为是开发新RA治疗药物的一种新靶酶.认识PAD4的结构与可能的作用机制,对于开发新RA治疗药物是重要的.     

英夫利昔单抗治疗类风湿关节炎疗效预测因素研究

目的:分析应用英夫利昔单抗(INF)治疗的类风湿关节炎(RA)患者的临床和实验等指标,筛选出可预测INF疗效的因素.方法:以应用INF治疗的40例RA患者为研究对象,收集基线和第14用的临床和实验等指标.应用聚合酶链反应一限制性片断长度分析法(PCR-RFLP)检测RA患者的肿瘤坏死因子α-308(TNFα-308)A/G的基因多态性.达到ACR50%-70%改善的的被判断为INF治疗反应好.采用Logistic回归模型筛选出可预测疗效的因素.结果:治疗14周后.携带TNF-308G/G基因型的RA患者,达到ACR20、ACR50、ACR70改善标准的患者人数的百分率分别为93%、64%和30%;A/G基因型,ACR20、ACR50、ACR70的百分率分别为60%、40%和20%.多因素Logistic回归分析显示,基线值中高DAS28评分和携带TNF-308G/G基因型的RA患者,对INF治疗反应好,其OR值分别为1.97(95%CI为1.74-3.13,P＜0.01)和2.02(95%CI为1.93-3.91,P＜0.01).结论:高DAS28评分及携带TNF-308 G/G基因型的RA患者对INF治疗有更好的应答.RA患者的DAS28评分及携带TNF-308 G基因型可能可作为INF治疗RA疗效的预测指标.     

英国公司在世界生物技术中的领先地位

两家英国公司,Amersham International plc 及 Celltech Biologics plc,在开发检测直肠结肠癌及卵巢癌的单克隆抗体中占世界领先地位。由 Cytogen Corporation(Princeton,New Jersey)开发的 Onco Scint CR/OV,是首例以单克隆抗体为基础的活体照影技术。该药将与由 Amercham Inte-rnational plc 制造的放射性照影剂 Indiclor 合用。     

表达全人源抗人IgE单抗的细胞株构建及筛选

目的:构建及筛选高效表达原创性全人源抗人Ig E单克隆抗体的重组工程细胞株。方法:将采用核糖体展示技术筛选到的原创性全人源抗人Ig E单链抗体(sc Fv)基因改构设计为Ig G1κ型全长抗体,构建重组真核表达质粒并电转染CHO-S细胞,Dot-blot法选取多株高表达克隆进行40ml摇瓶批次培养,再据细胞生长特征及抗体表达量选取高表达克隆进行40ml摇瓶及3L摇瓶流加培养研究,选取候选细胞株并对改构前后抗体的生物学活性进行比较研究。结果:成功构建了p MH3-H、p MH3-L、p CApuro-H、p CApuro-L四种重组真核表达质粒并成功共转染CHO-S细胞。完成了4次电转染8轮细胞克隆筛选,获得两株表达量较高的候选克隆Mab1#和Mab2#,在3L摇瓶流加培养中抗体表达量分别达到470mg/L及499mg/L。生物膜光干涉技术(Bio-Layer Interferometry,BLI)亲和力结果显示Mab1#及Mab2#两株单抗亲和力均达到nmol/L级(10-9),与现有唯一上市的抗人Ig E单抗药物奥马珠单抗(Omalizumab)的亲和力相当。选取Mab1#全长抗体与其改构前的母本单链抗体的表面等离子共振技术(surface plasmon resonance,SPR)中和活性比较结果显示Mab1#抑制h Ig E与FcεRI结合的EC50为3nmol/L,EC90为9nmol/L,较改造前亲和力提高了4.3倍,中和活性(EC50)提高了23.7倍,中和活性(EC90)提高了41.3倍。结论:成功将表达原创性全人源抗人Ig E的单链抗体(约25k Da)改造为亲和力及中和活性均大幅提升的全长抗体(约150k Da),获得2个候选细胞株。     

人体菌群与类风湿性关节炎相关性的研究进展

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性炎症性自身免疫性疾病,严重影响患者生理以及心理健康。尽管过去20多年RA的治疗进展迅速,但我们对RA的病因学仍知之甚少。研究表明,RA的发病与遗传、环境以及免疫这三大因素息息相关。众所周知,人体菌群与这三大因素亦有着密切的联系。越来越多的临床试验及动物实验指出,人体菌群失调在RA病程的发生发展中起着至关重要的作用。本综述整理近年来人体菌群与类风湿性关节炎相关性的研究进展,通过循证人体菌群,为类风湿性关节炎的诊断、预防和治疗提供新思路。     

RF、GPI、抗CCP抗体联合检测对类风湿关节炎的诊断意义

目的:研究类风湿因子(rheumatoid factor,RF)、葡萄糖-6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphate isomerase,GPI)和抗环瓜氨酸肽(anti-cyclic citrullinated peptide,anti-CCP)抗体联合检测对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的诊断意义.方法:收集未经治疗的128例RA患者(RA组)、117例其他风湿病人(非RA组)、74例健康人(正常对照组)血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测GPI、抗CCP抗体,采用速率散射比浊法检测RF、C反应蛋白(CRP)、补体(C3、C4)、免疫球蛋白(Iga、IgG、IgM),采用魏氏法测红细胞沉降率(血沉,ESR).结果:(1)GPI、抗CCP抗体诊断RA的特异性分别为91.09%、94.14%,与RF(78.53%)比有显著差异(P<0.01),敏感性分别为75.0%、75.8%,与RF(80.47%)比无统计学差异(P>0.05).(2)GPI和RF、抗CCP抗体和RF、GPI和抗CCP抗体两两组合检测,两个指标均为阳性诊断RA的特异性分别为94.24%、95.81%、96.34%,与单独检测RF比有显著差异(P<0.01);两个指标任一阳性诊断RA的敏感性分别为85.16%、85.94%、87.50%,与单独检测RF比无统计学差异(P>0.05),但与单独检测GPI或抗CCP抗体比有统计学差异(P<0.05)计学.(3)三个指标联合检测均为阳性诊断RA的特异性高达98.43%,与单独检测RF、GPI或抗CCP抗体比有统计学差异(P=0.000,P=0.001,P=0.018),任一阳性诊断RA的敏感性为91.41%,与单独检测RF、GPI或抗CCP抗体比有统计学差异(P=0.012,P=0;000,P=0.001).(4)GPI阳性的RA患者关节炎部位数、CRP、ESR水平明显高于GPI阴性RA患者.且差异有统计学意义(P<0.05).结论:GPI、抗CCP抗体诊断RA比RF更具特异性,三者联合检测可显著提高诊断RA的特异性和敏感性.此外,GPI还可作为RA活动性指标.     

B淋巴细胞表面分子靶向治疗类风湿关节炎的研究进展

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性、系统性的自身免疫性疾病,迄今病因尚不明确,且缺乏针对其安全有效的治疗药物.由于B淋巴细胞在RA致病机制中的重要作用,近年来不断有针对B淋巴细胞上不同靶点的治疗药物推出.这些B淋巴细胞靶向生物制剂包括针对CD20分子的抗CD20单克隆抗体,如rituximab、ocrelizumab和ofatumumab等;针对B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLyS)及其受体的belimumab和atacicept等以及处于初期研究阶段的抗CD22单克隆抗体和B、T淋巴细胞之间CD40/CD40L共刺激反应阻断剂等.上述靶向制剂的疗效在对RA及其动物模型的治疗中得到了证实,提示将B淋巴细胞作为RA治疗靶点是一项非常有前景的治疗策略.     

抗-id Mab临床试验显示对治疗黑素瘤的有效性

临床研究证实,抗-遗传型Mab能有效治疗致命性肿瘤黑素瘤。在第Ⅱ阶段的临床试验中,研究者发现Mab MK2-23诱导免疫性并使第Ⅳ期黑素瘤患者中60％延长存活期。除ImClone Systems Inc.发展的抗-idMab外,其它Mab模拟抗原不是特别致免疫的。而MKα-23模拟存在于80～85％黑素瘤细胞上的膜蛋白的高分子量黑素瘤抗体。给予的抗体尚不能消除肿瘤。但其     

单克隆抗体检测糖皮质激素受体的方法

利用两种糖皮质激素受体(GR)的单克隆抗体(Mab)建立了免疫活性糖皮质激素受体(GR_1R)的ELlSA检测法。5只大鼠肝胞液GR_1R/mg蛋白为1.0875±0.0257(扫描值)。本法特异性好,适用于没有GR纯品,而Mab数量不多条件下GR_1R的检测,其原理也适用于其他受体蛋白的测定。     

鸭C4BPα的克隆、表达及其与鸭疫里默氏菌的互作

为研究鸭C4结合蛋白(C4b-binding protein,C4BP)与鸭疫里默氏菌(Riemerella anatipestifer,RA)的相互作用,对鸭C4BPα进行克隆、原核表达,免疫小鼠制备多克隆抗体,并利用间接免疫荧光试验及斑点杂交试验验证C4BP与RA的相互作用。结果显示,鸭C4BPα核苷酸序列全长为1230bp,与鸡C4BPα的相似性最高(82.1%);系统进化树分析发现,鸭C4BPα与鸡C4BPα处于同一系统进化树分支上,两者遗传进化关系最近;C4BPα在大肠杆菌Escherichia coli BL21 (DE3)中能高效表达,重组蛋白以胞内可溶性形式存在;多克隆抗体效价超过1∶10000,并且可以与重组蛋白发生特异性反应;间接免疫荧光试验和斑点杂交试验结果显示RA与鸭C4BP可以发生相互作用。研究结果为进一步揭示RA的致病机制奠定了基础。     

类风湿关节炎中葡萄糖-6-磷酸异构酶诊断的应用价值

目的:探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)中葡萄糖-6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphate isomerase,GPI)的检测及其临床意义.方法:用酶联免疫吸附试(ELISA)检测血清中GPI,其中40例RA患者血清中GPI浓度为(2.67±2.48)μg·ml-1,20例其他免疫疾病患者血清中GPI浓度(0.094±0.063)μg·ml-1、15例健康人对照组GPI为(0.091±0.062)μg·ml-1,RA患者同时还进行了类风湿因子(RF)、血沉(ESR)等检测.结果:RA活动组与RA非活动组比较有统计学意义(P＜0.05).通过回归分析发现关节肿胀、疼痛与GIP浓度正相关.GPI抗原对RA检测的敏感性为63.5%,特异性为96.3%.结论:GPI在部分RA病人血清中显著升高,有可能成为诊断RA及判断其疾病活动性的一个新指标.     

人肺腺癌细胞分化相关基因cDNAs的克隆

在用10^-5 mol/L全反式维甲酸(RA)诱导人肺腺癌细胞系GLC-82分化的基础上,以M13噬菌粒pSPORT1为载体,应用定向克隆技术,分别构建了未经RA诱导和RA诱导1d及4d细胞的3个cDNA文库.以含重组子的诱导文库单链DNA为靶标(Target)同未诱导文库的cDNA驱除子(Driver)进行消减杂交,富集RA特异性单链DNA,将富集的单链DNA回复为双链后转化感受态菌,建立细胞诱导分化过程中活化表达基因的cDNA消减文库,得到124个cDNA消减克隆.经同源性分析和与文库总cDNA作Southern印迹杂交,进而与RA诱导前后细胞的RNA作Northern印迹杂交,筛选出2个(RA5,RA28)诱导后呈早期瞬时表达和1个(RA42)呈早期并持续表达的cDNA克隆,cDNA全长分别为1.8,1.5和0.7kb.序列测定及初步功能分析结果表明,RA5,RA28和RA42这3个首次报道的序列,可能是人肺腺癌细胞分化相关基因的cDNA克隆.