人红细胞生成素单克隆抗体的制备、鉴定及应用研究

用rhEPo作为抗原,免疫BALB／c小鼠,取其脾细胞与x63Ag8．653小鼠骨髓瘤细胞融合,再碱性PAGE方法进一步分离并纯化的rhEpo,包被Pvc板,对杂交瘤用ELlSA方法进行筛选,获得两株稳定分泌抗hEPO单抗的杂交瘤细胞株。经鉴定分别属于IgG1、IgG2b,轻链均为k链,Kd分别为5．53×10^-10mol／L和1．34×1O^-10mol／L．用western blot方法证明两者对hEPO具有高度韵专一性．能特异地识别rhEPO和尿源hEPO。所制备单抗可作为亲和层析的配体,用于再生障碍性贫血病人尿中EPO及哺乳类工程细胞所表达的hEPO的分离、纯化,并可用于hEPO的定量检测．     

厚叶景天组织传感器的研究

利用厚叶景天的叶和茎组织作为生物催化材料,分别同二氧化碳气敏电极和氨气敏电极组合,研制了L－精氨酸传感器及,L－赖氨酸传感器。两种传感器的线性范围分别为1.0×10^-4 1.O×10^-3mol/L和8．0×10^-5—3.0×10^-3mol/L．检测下限分别为3．2×10^-5mol／L和2.2×10^-5mol/L,响应斜率分别为42.2mV／dec和41．4mv／dec。考察了两种传感器的回收率．结果表明,L－精氨酸传感器和L－赖氨酸传感器的回收率平均值分别为98．6％和101.6％,标准偏差分别为4.6％和4.0％。     

2.5次微分伏安法对生物样品中丙二醛的测定

以0.1mol/L NH₄Cl溶液为介质, 用2.5次微分伏安法测定了丙二醛, 线性范围为1.0×10^-6至1.0×10^-3 mol/L, 检测限达1.0×10^-7 mol/L. 并测定了细胞培养液介质中新生SD大鼠心室肌细胞样品中的丙二醛.     

用Blue Sepharose CL-6B快速纯化天花粉蛋白

差光谱显示染料cibacron blue F3GA与天花粉蛋白(TCS)有特异性结合,复合物在可见光部分的最大吸收波长在690 nm,摩尔消光系数ε=2.6×10^-3(mol/L)^-1·cm^-1,解离常数K_d=1.8 μmol/L,0.5 mol/L NaCl可使复合物解离.根据这一特点,用Blue-Sepharose CL-6B凝胶从栝篓块茎中亲和纯化了TCS.此法快速、简便、高效,易于大量制备.     

微生物传感器测定维生素B12的研究

将大肠杆菌(Escherichia coli)215用吸附法固定于醋酸纤维素膜上,与氧电极配合组成微生物电极,建立了对维生紊B₁₂的快速测定系统。测定浓度范围5×10^-6mg—2．5×10^-5mg／ml;测定温度范围在28—39℃;最适Ph为6．7—7．8,测定一个样品所需时间为2h,比常用的生物学测定方法所需时间缩短10倍以上。该系统对维生素B₁₂重复测定的相对误差为±3％。固定化菌体在－25℃保存25天后再进行测定,应答电流不低于初始值的92%。     

用荧光分光光度法测定组织和血液中一氧化氮

利用NO^－₂对4-羟基香豆素的荧光增强效应,建立了生物样本中NO荧光分光度测定法,其检测浓度范围为2×10^-5～2×10^-8 mol/L,采用该方法检测了大鼠大脑皮层和海马组织、细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的巨噬细胞培养上清和血清中NO含量.     

谷氨酸棒状杆菌尿素传感器的研究

基于腺酶催化尿素分解产生氨,以氨气敏电极为基础电极,用含脲酶丰富的谷氨酸棒状杆菌研制成测定尿素的微生物传感器.在30℃、pH8.0、0.1mol/L磷酸盐缓冲液中,该传感器的线性范围为1.1×10^-4～1.4×10^-2mol/L,斜率为51.2mV/decade,检测下限为1.0×10^-5mol/L,寿命可达45d.考察了传感器响应初速和底物浓度之间的关系,测定了微生物膜中脲酶的表观米氏常数K_m及最大响应初速v_m.     

促甲状腺激素单克隆抗体的制备

获得了抗促甲状腺激素(TSH)单克隆抗体杂交瘤细胞20株,其中T₇₄A₁₀小鼠腹水滴度为1:50 000,亲和常数为7.15×10⁹L/mol,T₇₁B₁₁小鼠腹水滴度为1:150000,亲和常数为8.75×10⁹L/mol.两个抗体与人绒毛膜促性腺激素(HCG)、促卵泡激素(FSH)和促黄体生成激素(LH)的交叉反应分别小于1.1×10^-6%、0.01%和0.016%.将T₇₄A₁₀和T₇₁B₁₁应用于TSH免疫放射分析中,得到了满意的结果.     

紫罗酮和麦角固醇对酵母生长及产辅酶Q10的影响

研究了β-紫罗酮和麦角固醇对酵母生长及产辅酶Q₁₀的影响。研究发现,β-紫罗酮能促进菌体积累辅酶Q₁₀,当培养基中β-紫罗酮的添加量为0.208×10^-3mol/L时,菌体中CoQ₁₀的含量提高了28.3%;少量麦角固醇能促进菌体产辅酶Q₁₀,当麦角固醇的添加量为0.15×10^-4mol/L时,菌体中CoQ₁₀的含量提高了31.8%,而增加麦角固醇的添加     

CellCul－20A反应器的丝网间液体交换速率及氧传递模型

针对笼式通气搅拌生物反应器的特点,本文提出了一种简单可信的测量丝网内外液体交换速率的实验方法,根据此方法,在CellCul-20 A生物反应器中得出了通过丝网的液体交换速率关联式: 单层丝网：Qs=1．93×1O^-5N^1.81+1．13×10^-4UG^0.61(Ⅰ) 双层丝网：Qs=3．42×10^-5N^1.49+1．46×10^-4UG ^0.68 (Ⅱ)并在此基础上,建立了台适的深层通气的氧传递模型,得到： 1- 1- 1- (K_La)d.Vc Qs + Vb.[(K_La)b-(K_La)d](Ⅲ)理论分析和实验结果表明,增大丝网内的液体体积和提高丝网内的氧传递速率,可以有效地提高反应器的体积氧传递系数。     

棉酚抗生育新机制——对磷脂酶A_2活力的抑制作用(英文)

 采用微孔比色法及荧光分析法 ,研究抗男性生育化合物棉酚与猪胰腺磷脂酶A2 (phospho lipaseA2 ,PLA2 ,EC3 1 1 4 )温育并透析前后对酶活力及荧光的影响 .结果表明 ,棉酚与PLA2 不可逆地结合明显地降低了PLA2 活力及荧光强度 .棉酚对酶活力抑制作用的IC50 为 35μmol L ;当其浓度达到 80 μmol L时 ,能够完全抑制PLA2 ( 4 11μmol L)对合成底物 2 硫代十六酰乙基磷酸胆碱(HEPC ,0 .2 5mmol L)的水解作用 .PLA2 的最大激发波长与发射波长分别为 2 75nm ,34 3nm ,荧光强度与酶浓度呈良好的线性关系 .棉酚对PLA2 的荧光具有较强的淬灭作用 .由于PLA2 与男性生育密切相关 ,棉酚对PLA2 活力的影响可能是其避孕作用及伴随的副作用的一种新的重要机制     

[A_(15)Asn,A_(17)Pro,A_(21)Ala]-胰岛素的体内外生物活性

对胰岛素的研究使得许多生命科学中的重要问题被认识．然而对于胰岛素结构和功能关系,仍有许多不清楚的地方．在胰岛素Ａ链的Ｎ端和Ｃ端各有一个螺旋区：Ａ２－８和Ａ１２－１８．杨士珍［１］的研究表明：缺失Ａ１２－１８肽段的Ａ链类似物虽然能和天然Ｂ链重组,但其重组产物只保留了天然胰岛素的约６％的体内外生物活性．这说明Ａ１２－１８对胰岛素的生物活性十分重要．但是这一结果还不能说明是Ａ１２－１８螺旋还是Ａ１２－１８肽段对胰岛素的生物活性十分重要．根据Ｃｈｕｏ－Ｆａｓｍａｎ法,在含有Ａｓｎ和Ｐｒｏ的肽段中不能形成…     

GA_1和GA_3在樱桃幼果及枝条中的代谢

ＧＡ_１和ＧＡ_３在樱桃幼果及枝条中的代谢马焕普（中国农业科学院果树研究所,兴城１２５１００）ＢｌａｋｅＰＳＢｒｏｗｎｉｎｇＧ（国际园艺研究中心,东茂林,英国）关键词：樱桃,赤霉素,代谢最近,Ｂｌａｋｅ等（１９９３）从樱桃（Ｗ。ｕｓａｕｎ）幼果中分离出...     

用GC－MS检测苹果种子层积过程中内源MeJA、GA_3、GA_4和GA_7的变化

苹果种子层积４０ｄ后,萌发率及胚轴鲜重随着层积日数的增加而迅速增加。层积５０ｄ时,ＧＡ３和ＧＡ７含量分别达到高峰,在子叶中以ＧＡ３为主,在胚轴中则以ＧＡ７含量最高。层积对ＧＡ４的含量变化影响不大。表明不同种类ＧＡ对低温处理的反应不同,发生器官和作用部位也有区别。ＭｅＪＡ在５℃和１７℃条件下其含量变化无明显区别,但受湿度的影响较大。     

野生大豆(Glycine soja Sieb et ZUCC)球蛋白A_5 A_4 B_3 cDNA的研究(简报)

大豆球蛋白是大豆种子中主要的贮藏蛋白。它们在某些作物中占种子干重20%以上。已经知道大豆球蛋白由6个亚基组成。每个亚基由一或两个酸性多肽(A)和一个碱性多肽(B)组成,多肽之间由二硫键联结。这些亚基是从编码A-B亚基前体的mRNA合成,然后经过转录后加工剪切形成A肽和B肽。至今所有关于球蛋白的基因结构与表达的报道都集中于栽培大豆上。由于我国有丰富的大豆     

大鼠延髓A5区降压、降心率效应的机制及其与A1区之比较

在与上一篇论文(关于A_1区)相同的条件下,(1) 用谷氨酸钠兴奋大鼠A_5区,和A_1区类似,也产生明显的降压、降心率效应。(2) 切断双侧颈迷走神经也明显衰减兴奋A_5区的心血管作用。(3) 将不同受体阻断剂注入延髓头端腹外侧区对兴奋A_5区引起的降压,降心率反应之影响,与A_1区比较有所不同:酚妥拉明、心得安、纳洛酮和荷包牡丹碱均能明显衰减A_5区的降压、降心率效应(心得安和荷包牡丹碱甚至反转之),表明除α-,β-,GABA受体之外,阿片受体也中介A_5区的降压降心率作用。     

亲和层析法分离大鼠脂肪细胞膜上腺苷A_1受体

本文采用腺苷亲和层析法从大鼠脂肪细胞膜上分离出了一种亚基分子量为38kD的腺苷结合蛋白质。此蛋白在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上显示单一带,糖蛋白染色阳性;能与[8-~3H]腺苷特异结合(Kd=0.269nmol/L,Bmax=6.05pmol/mg.Pr);结合抑制实验表明它与腺苷A_1受体激动剂R-PIA、A_2受体激动剂NECA和腺苷的亲和力大小顺序为:R-PIA>腺苷>NECA。这表明所分离出的38kD蛋白是大鼠脂肪细胞膜上的腺苷A_1受体。     

博安霉素与DNA相互作用的分子机理研究

通过光谱分析、粘度测定及~１ＨＮＭＲ研究证实：博安霉素（ＢｌｅｏｍｙｃｉｎＡ_６,ＢＬＭＡ_６）是通过双噻唑基嵌插入碱基对之间与ＤＮＡ结合的。同时测定了ＢＬＭＡ_６与ＤＮＡ的结合常数、结合位点数并与博莱霉素Ａ_２（ＢＬＭＡ_２）、Ａ_５（ＢＬＭＡ_５）进行了比较,证实了末端胺基对ＢＬＭＡ_６与ＤＮＡ结合的贡献,琼脂糖凝胶电泳对ＢＬＭＡ_６及其Ｃｕ（Ⅱ）、Ｆｅ（Ⅱ）络合物断裂ＤＮＡ的研究表明,在ＤＮＡ断裂中某种氧自由基的存在及金属螯合部位与ＤＮＡ嵌插部位之间的相互影响,对于ＢＬＭＡ_６及同系物对小鼠肺毒性的差异与不同尾链结构的关系进行了探讨。     

磷脂酶A2对中性粒细胞趋化和粘附的影响

胰源性１４×１０￣３ｕ磷脂酶Ａ＿２（ＰＬＡ＿２）在体外同大鼠中性粒细胞（ＰＭＮ）培养６０ｍｉｎ后,细胞对ＴＮＦ趋化增强,培养１０ｍｉｎ后上清液中血栓素（ＴＸＢ＿２）含量比正常增高（Ｐ＜０．０１）。前列环素（ＰＧＩ＿２）含量不变。ＰＬＡ＿２激动剂Ａ２３１８７也能显著加强中性粒细胞对ＴＮＦ的趋化,并伴有ＴＸＢ＿２释放增多（Ｐ＜０．０１）。此外,ＰＬＡ＿２和Ａ２３１８７还显著增强ＰＭＮ对玻璃珠的粘附活性。使用ＰＬＡ＿２抑制剂二溴苯乙酮（ＰＢＰＢ）和ＰＬＡ＿２多克隆抗体可抑制外源性ＰＬＡ＿２对ＰＭＮ趋化和粘附的增强作用,但对Ａ２３１８７的调节作用无效。以上结果表明ＰＬＡ＿２激活及其代谢产物可能介导ＰＭＮ趋化和粘附作用。