γ-微管蛋白在猪卵母细胞成熟和活化中的分布

微管蛋白(tubulin)是一蛋白质超家族,其中α-,β-微管蛋白是主要的微管蛋白,而γ-微管蛋白主要在微管组装中起作用. 我们利用蛋白质印迹和激光共聚焦技术研究了γ-微管蛋白在猪卵母细胞成熟、受精和活化中的分布. γ-微管蛋白存在于猪卵母细胞中,并且在减数分裂成熟各个时期的量保持不变. 它聚集在微管上,特别是中期纺锤体的两极和后末期的中板. 体外受精和孤雌活化后,γ-微管蛋白聚集在雌雄原核的周围.另外它也存在于精子的顶体帽和颈部.在早期卵裂中,γ-微管蛋白聚集在胚胎的细胞核周围.实验结果表明,γ-微管蛋白在猪卵母细胞、精子和胚胎的微管组装中起重要的调节作用,在猪受精过程中,精子和卵子都向受精卵贡献中心体物质.     

6—DMAP和胚胎干细胞代数对异种重构卵体外发育的影响（简报）

The development of reconstructed oocytes and the survival rate of cloned animal were affected by many factors during nuclear transfer. The genetic constitution and the genetic state of donor nucleus were proposed to be primary factors, which affected the survival rate of cloned animal. In addition, the survival rate of cloned animal might be influenced by nuclear transfer technique itself and passages of donor cells as well as the activation methods of oocytes. We reconstructed oocytes with outbreeding Kunming albino mouse ES cells and enucleated rabbit oocytes, and analyzed the effects of the passages of ES cells and 6-DMAP on the development of interspecific reconstructed oocytes. The interspecific reconstructed ES-rabbit oocytes were activated either by combined two set electric pulses and 6-DMAP or by two set electric pulses alone. The rate of cleavage was significantly higher for the group (86.2%) treated with 6-DMAP than the group (64.2%, P < 0.05) treated with electric pulses only, and the rate of blastocysts was 17.0% and 13.4% respectively, which were not significantly different between two groups. When ES cells that had been passed for 24 and 14 generations were used as donors, the cleavage rates of the reconstructed oocytes were 88.5% and 82.1%, respectively (P > 0.05), and the rates of blastolation were 16.7% and 15.4%, respectively (P > 0.05). The results show that 6-DMAP increases the cleavage rate of reconstructed oocytes derived from ES cells, and affects slightly the developmental rate of blastocysts. There are no differences when high passage and low passage ES cells are used as nuclear donors.     

体细胞来源及培养代数对核移植重构胚发育的影响

为探讨体细胞来源及培养代数对核移植重构胚发育的影响,实验采用电融合法将小鼠2—细胞胚胎卵裂球、胚胎干细胞(ES)、胎儿成纤维细胞、耳成纤维细胞、尾尖成纤维细胞、睾丸支持细胞和精原细胞以及不同培养代次的胎儿成纤维细胞进行了核移植。结果显示：2—细胞胚胎卵裂球供核重构胚发育最好,囊胚率为7．4％;ES细胞重构胚虽然发育率低,但仍有囊胚出现,比例为0．7％;胎儿成纤维细胞重构胚最高发育阶段为桑椹胚,比例为0．2％;精原细胞重构胚只能发育到8-细胞阶段,比例为0．3％;其他几类细胞重构胚则仅能发育至4-细胞阶段。不同培养代数的胎儿成纤维细胞重构胚除第3代外都可发育到8-细胞阶段,且发育率差异不显著,但第一代细胞重构胚2-细胞发育率(40．7％)显著低于2、3和4代细胞重构胚。结果表明：不同分化程度的细胞核移植后,重新编程的难易程度是不一样的,分化程度越高则重新编程越难;未调整细胞周期的ES细胞由于多数处于S期,所以重构胚发育率很低;体外培养传代有利于体细胞核移植后重新编程。     

泛素-蛋白水解酶复合体通路在卵母细胞减数分裂和受精中的作用

泛素—蛋白水解酶复合体通路(Ubiquitin-proteasome pathway,UPP)高效快速并高度选择性地降解特定的蛋白质,从而参与控制多种重要的细胞生物学过程。在卵母细胞减数分裂和受精过程中,该通路通过降解细胞周期中的关键因子,如细胞周期蛋白、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制图子等细胞周期调控因子,从而参与卵母细胞生发泡破裂、第一极体排放、MII阻滞的维持和克服等过程,使细胞通过特定的检验点。此外,UPP也与丝裂原活化蛋白激酶通路、Polo样激酶、成熟促进因子、蛋白激酶C、钙调蛋白依赖激酶Ⅱ等减数分裂关键调节因子相互作用来参与卵母细胞减数分裂成熟和受精。一些周期蛋白(如后期促进复合体的某些亚单位等)还充当泛素连接酶成分,直接参与泛素化过程。     

动物克隆机理研究进展

目前动物克隆技术的应用因低效和后代生长发育异常等缺陷而受到限制。问题的根源在于对克隆基础的分子机理缺乏了解。为更好地了解该领域当前的进展,我们研读了相关的文献,包括核移植过程中核质互作、核重编程、线粒体命运、端粒变化以及X染色体失活等机理方面的著述。看来,生物芯片等新兴技术的应用将有助于问题的解决。     

不同激素和注射方式对家猫超排效果的比较

比较了PMSG／hCG和FSH／hCG两种方案以及PMSG的不同剂量和注射方式对家猫的超排效果的影响。用100IU的PMSG超排家猫所得到的排卵点数及平均每只猫获得的卵数显著低于200IU处理组或300IU处理组（P＜0．05）,但200IU处理组与300IU处理组之间的超排效果也无显著差异（P＞0．05）;用皮下注射200IU的PMSG或用肌肉注射200IU的PMSG对超排效果无差异（P＞0．05）;用200IU PMSG／200IU hCG和1.5mg FSH/200IU hCG两种方案对家猫超排,发现不论是每只猫的排卵点数、卵子获得数,还是卵子的第一极体排放率都没有显著差异（P＞0．05）。实验说明,PMSG的注射方式不影响对家猫的超排效果,用200IU的PMSG超排家猫是较适合的剂量,FSH和PMSG都可用于家猫的超排,但PMSG使用更为方便。     

家猫的胚胎工程

家猫是惟一一种没有被列为珍稀或濒危的猫科动物。通过家猫的胚胎工程研究,对保护其它濒危猫科物种有重要的借鉴意义。本文描述了家猫的一般生殖特点,着床前的胚胎在体内的发育概况;综述了近年来对家猫的超数排卵,卵母细胞的体外成熟,体外受精,胚胎的体外培养,胚胎移植,冷冻保存和胚胎克隆等方面的研究进展。     

2n/4n嵌合体胚胎的发育特点及其应用

2n/4n嵌合体是指用二倍体的胚胎细胞和四倍体的胚胎细胞聚合所形成的嵌合体。这种嵌合体在胚胎的发育过程中。四倍体来源的细胞在分布上具有一定的倾向性,即倾向于分布在胚外组织,如胎盘;而在胎儿本身的组织中,很少能找到四倍体细胞的存在,就2n/4n嵌合体胚胎的制作、嵌合体胚胎的发育特点及该技术的可能应用进行了综述。     

超排SD大鼠卵母细胞减数分裂中期Ⅰ的阻滞和恢复

超排SD大鼠卵母细胞减数分裂中期Ⅰ的阻滞和恢复@谭信$北京师范大学生命科学学院!　　中国北京100875中国科学院动物学研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室　中国北京100080 @彭安$北京师范大学生命科学学院!　　中国北京100875 @王永潮$北京师范大学生命科学学院!　　中国北京100875 @孙青原$中国科学院动物学研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室!　中国北京100080 @何大澄$北京师范大学生命科学学院!　　中国北京100875 @陈大元$中国科学院动物学研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室!　中国北京100080…     

cAMP和卵丘细胞对大鼠卵母细胞的GVBD,p90rsk和MAPK磷酸化的调节作用

cAMP和卵丘细胞对大鼠卵母细胞的GVBD,p90rsk和MAPK磷酸化的调节作用@谭信$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室!　中国北京100080北京师范大学生命科学学院　中国北京100875 @孙青原$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室!　中国北京100080 @王永潮$北京师范大学生命科学学院!　中国北京100875 @彭安$北京师范大学生命科学学院!　中国北京100875 @陈大元$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室!　中国北京100080 @何大澄$北京师范大学生命科学学院!　中国北京1008…