Effects of Protein Synthesis on the Maturation of Mouse Oocytes in vitro

卵母细胞成熟过程中伴随有多种蛋白质的合成与磷酸化,蛋白质的合成对卵细胞的成熟具有重要作用。本实验较系统地阐述小鼠卵母细胞体外成熟培养的不同阶段蛋白质合成对卵母细胞成熟的影响。放线菌酮是肽链延伸的抑制因子。将生发泡（ＧＶ）期的卵母细胞分别于Ｔ６成熟培养液中培养０、４、６、９小时后,转至含有１０ｍｇ／ｍｌ放线菌酮的Ｔ６成熟培养液继续培养１２１５小时。固定、染色、观察卵母细胞。结果如Ｔａｂｌｅ１。０小时实验组：抑制处理４小时,其生发泡破裂（ＧＶＢＤ）发生率与对照组无明显差异。表明：卵母细胞ＧＶＢＤ所需蛋白质（如：成熟促进因子ＭＰＦ等）是在卵巢的卵泡卵母细胞生长过程中完成的。４、６小时实验组：笫一极体的释放被完全抑制,卵母细胞不能达到ＭＩ期,染色质处于凝集状态（Ｆｉｇ．３＆４）。表明：ＧＶＢＤＭＩ期间所需蛋白质的合成对卵母细胞ＭＩ期中期纺缍体的形成与维持具有重要作用。９小时实验组：可能由于卵母细胞发育速度存在个体间的差异。没有进入ＭＩＩ期的便停滞于ＭＩ期以前。进入ＭＩ期的则能排出笫一极体。因此,笫一极体的释放总体上呈不完全抑制状态,其释放率低于对照组。但是,后者虽然弪过恢复培养至１５小时,可能由于微管蛋白的合成     

大熊猫供核体细胞在兔卵胞质中可去分化而支持早期重构胚发育

体外培养的成年大熊猫骨骼肌细胞、子宫上皮细胞和乳腺细胞 ,分别作为供核细胞移植进入去核兔卵母细胞中以构建异种重构胚 .3种组织来源的体细胞在去核兔卵质中均可去分化、恢复全能性和替代合子核进行卵裂 ,并支持早期重构胚发育 .其中以乳腺细胞效果最好 ,子官上皮细胞次之 ,骨骼肌细胞最差 .对比实验表明 ,胞质直接注射法结合重构卵在体培养可比电融合法加体外培养方案获得更大比例的囊胚率 .染色体分析表明异种重构胚的核遗传物质来自大熊猫供体体细胞核 .线粒体DNA分析表明重构囊胚中存在有大熊猫线粒体 .这些结果初步说明 :( 1 )卵胞质使体细胞核去分化不具种特异性 ;( 2 )哺乳动物异种重构胚早期发育中 ,异种细胞核与细胞质之间是相容的 .     

豚鼠精子信号通路的研究

钙调素(CaM)拮抗剂三氟拉嗪(TFP)在10~100 μmol/L浓度范围内对豚鼠精子获能和顶体反应具有极显著的促进作用,且不依赖于外源Ca²⁺的存在.Forskolin,dbcAMP和咖啡因对非同步培养系统获能早期豚鼠精子的顶体反应有显著的促进作用,但对同步培养系统获能早期精子的顶体反应无显著影响.若在同步培养系统获能培养较长时间(15h)使精子获能,则这3种药物对顶体反应均具有显著的促进作用,且不依赖外源Ca²⁺的存在.蛋白激酶C(PKC)激活剂PMA和PDB对获能前期豚鼠精子的顶体反应无显著影响,但对获能精子的顶体反应有显著的促进作用,且这种促进作用也不依赖于外源Ca²⁺的存在.相反,PKC抑制剂stau-rosporine对顶体反应有显著的抑制作用.     

6－Dimethylaminopurine（6－DMAP） Spontaneously Induces Interphase Transition Of Metaphase Mouse Oocytes

６－Ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｐｕｒｉｎｅ（６－ＤＭＡＰ）ＳｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙＩｎｄｕｃｅｓＩｎｔｅｒｐｈａｓｅＴｒａｎｓｉｔｉｏｎＯｆＭｅｔａｐｈａｓｅＭｏｕｓｅＯｏｃｙｔｅｓ￥ＳＵＮＱｉｎｇ－ｙｕａｎ（孙青原）;ＧＡＯＳｈａｏ－ｒｏｎｇ（高...     

胞质钙信号

胞质钙作为信使对细胞各种生理活动具有广泛调控作用。早期的研究揭示,钙在肌肉收缩,激素、消化酶类和神经递质的释放中起重要作用;近期的研究发现,钙参与更广泛的生理过程,如生物膜通透性及细胞兴奋性的控制、细胞代谢、细胞形态的维持、细胞周期的调控以及生殖细胞...     

小鼠精子睾丸后成熟过程中单克隆抗体MSH27抗原表位的显露

MSH2 7是一株抗小鼠精子的单克隆抗体 ,此抗体及其纯化的抗原分子在体外受精实验中均可以阻止精卵膜融合 ,因而推测其抗原在精卵膜融合过程中具有重要的作用 .这里探讨了抗原分子在精子睾丸后成熟过程中MSH2 7识别表位的显露条件 .MSH2 7抗原分子在睾丸中产生 ,定位于精子顶体后区的质膜上 ;但MSH2 7所识别的抗原表位只在顶体反应后的精子上表露 .在受精过程中 ,精子必须完成顶体反应并穿过卵子的透明带才能接近卵子质膜并与之融合 .同时还研究了顶体反应和穿透明带作用对MSH2 7表位显露的影响 .在附睾成熟过程中 ,随着精子在附睾中的转运 ,它们发生顶体反应的能力不断增加 ;精子抗原表位的显露呈现顶体反应依赖性 ,且两者呈现线性回归关系 .钙离子载体A2 3 187诱发顶体反应后 ,MSH2 7染色阳性的精子远远少于顶体反应的精子 ;但穿过透明带后绝大多数精子 ( 98% )呈现MSH2 7染色阳性 .总之 ,在睾丸后成熟 (附睾成熟、获能、顶体反应 )和精子穿透明带的过程中 ,对整个精子群体来讲 ,单抗MSH2 7所识别的抗原表位的显露和精子最终获得穿入卵子质膜的能力是同步发生的 .     

哺乳动物克隆的原理与途径

在近年来哺乳动物克隆技术研究的基础上,阐述了克隆的定义及其原理。叙述了作为核供体与受体细胞周期的协调性问题,列出了使供体细胞处于特定细胞周期的一些处理方法。同时也叙述了针对不同时期的供体核对受体卵母细胞采取的不同处理。简述了不同类型的显微操作、去核、电融合及化学激活等方法,提出了哺乳动物克隆所面临的一些重要问题。     

大熊猫卵巢的滤泡闭锁和囊肿的研究

大熊猫卵巢的生长滤泡闭锁,形成闭锁滤泡黄体化和滤泡囊肿,严重影响大熊猫的生殖能力,其原因很复杂,可能与生殖内分泌失调有关,尤以垂体促性腺激素的分泌失调至为重要。     

背瘤丽蚌(Lamprotula leai)的外套膜组织液对皮肤创伤愈合的初步探讨

珍贵药材之一的珍珠,根据记载(时逸人,1954;Jameson,1902;小串次郎,1938),系由贝类的外套膜上皮受刺激而分泌形成。中医用其为滋养强壮和补充组织亏损之药物。因此,推想在其组织的分泌液中可能存在有促进创伤愈合的化学物质,而初步实验结果也似乎证明了这一点。 材料与方法 外套膜组织液的制备,是在无菌条件下进行的。首先将新鲜背瘤丽蚌贝壳打开,去其积水,然后取出二侧之外套膜组织,经电动组织捣碎机搅成乳糜状,并离心15分钟,取出清液,去其沉淀,继用细菌漏     

抗精子单克隆抗体6B10的免疫定位及其相应抗原分析

利用杂交瘤技术制备小鼠抗精子单克隆抗体 6B1 0 ,为IgG型免疫球蛋白 .通过 (NH4) 2 SO4盐析并结合蛋白A SepharoseCL 4B亲和层析法纯化单克隆抗体6B1 0 ,用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析抗体纯度 .采用金霉素荧光染色法 (CTC)检测精子顶体反应 ,发现单克隆抗体 6B1 0可以显著地抑制孕酮诱导的精子顶体反应 .采用间接免疫荧光法和胶体金免疫电镜观察发现单克隆抗体 6B1 0的相应抗原定位于精子顶体质膜上 .用 1 %TritonX -1 0 0抽提精子全蛋白 ,采用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳结合免疫印迹实验 (Westernblot)发现单克隆抗体 6B1 0所识别的抗原为 5 0ku的蛋白 ,此蛋白为精子顶体反应发生过程中的关键蛋白之一 ,可能成为免疫灭鼠与免疫避孕的候选疫苗