结直肠癌血清肿瘤标记物液相芯片制备条件的优化及在CEA抗原检测中的初步应用

液相芯片技术由于其高通量,灵敏度高,信噪比高,液相条件下反应,操作简便,耗时短等优点,已被美国FDA批准成为临床的检测手段。本文主要介绍了结直肠癌血清肿瘤标记物液相芯片制备条件的优化及其在CEA抗原检测中的初步应用。本研究首先将CEA抗原的捕获抗体与微球载体进行偶联,制备液相芯片,然后对影响反应的微球与抗原的反应时间,生物素化检测抗体的浓度及avidin-PE荧光染料的反应浓度等因素进行正交设计,确定出最优的反应条件;用该液相芯片反应体系检测55例临床样本,与ELISA试剂盒检测结果相比：在同样的样本浓度范围内,两者的检测结果基本一致,但液相芯片检测的浓度范围更大而且液相芯片可将多种肿瘤标记物在一个反应进行检测,节省检测的时间和人力。     

自身抗体检测蛋白芯片制备条件的优化及初步应用

选择临床上常用的用于自身免疫性疾病抗体检测所对应的12种抗原, 运用NBT/BCIP显色反应策略, 研制一种可同时检测12种常用自身抗体的蛋白芯片检测系统。应用NBT/BCIP终点检测体系对每一种抗原的点样液、点样浓度、血清稀释度进行优化, 制备出可同时检测12种自身抗体的蛋白芯片, 并通过对678例病人血清和120例非病人血清的检测进行敏感度和特异度评价。优化的点样液为0.1%TBST, 血清稀释度为1:4, 12种抗原的最佳点样浓度分别为: ANA 520 mg/mL, Ro-60/SSa 465 mg/mL, La/SSb 530 mg/mL, Jo-1 530 mg/mL, Scl-70 525 mg/mL, Sm 520 mg/mL, Ro-52/SSa 615 mg/mL, RF 340 mg/mL, CCP 465 mg/mL, u1RNP 410 mg/mL, CENP-B 490 mg/mL, dsDNA 580 mg/mL; 通过对678份阳性血清和120份阴性血清的检测, 该蛋白芯片技术对12种自身抗体检测的敏感度在80%~96.3%之间, 特异度在86.7%~100%之间, 与传统的检测技术有较高的符合率。我们研究的自身抗体检测蛋白芯片技术体系具有快速、方便、高通量、廉价等优势, 易于商业化, 适合不同条件的临床需要。     

链霉素耐药结核分支杆菌rpsL基因分析

结核分支杆菌（Mycobacterium tuberculosis.TB)的rpsL基因突变往往与链霉素（Streptomycin.SM)耐药变异有关。选择了77例TB临床分离株,应用BACTEC460快速培养系统进行常规药敏实验,同时针对rpsL基因进行聚合酶链反应（PCR）,对PCR产物进行单链构型多态性（SSCP）分析,MboⅡ酶切后的限制性片段长度分析（RFLP）和序列测定分析。常规药敏实验显示：有20株为SM敏感,57株为耐药。SSCP显示：34株的rpsL基因为野生型,43株为突变型。与常规药敏相比SSCP的特异性与阳性预期值分别为95％和98％。RFLP显示：81.4%的突变类型使其失去MboⅡ酶切位点。序列测定显示：失去MboⅡ酶切位点的突变为rpsL基因43位密码子存有单碱基突变（AAG→AGG）。实验结果表明,TB对SM耐药变异与rpsL基因突变相关,其中第43位密码子的突变是最常见的原因。     

白蚁巢系破坏堤坝稳定性的研究

黑翅土白蚁Odontotermes Formosanus是我国南方诸省严重危害堤坝的主要白蚁种。它的巢居结构严重破坏土质堤坝工程,常常形成险情或“千里金堤,溃于蚁穴”。 我们的试验说明了黑翅土白蚁的巢居结构破坏堤坝工程的原理,为防治白蚁提供理论依据。