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紫杉醇免疫检测方法的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
紫杉醇是一种有效的抗肿瘤药物,广泛应用于治疗卵巢癌、乳腺癌和肺癌等癌症。紫杉醇在紫杉树皮中的含量极低(仅为0.01%),而且紫杉醇是一种对蛋白质有着高亲和力的小分子,在体液中约有98%的分子与蛋白质结合,因此需要一种高灵敏度、高通量的检测方法对紫杉醇进行鉴定。在分析紫杉醇检测方法的基础之上,综述了紫杉醇免疫学检测方法的研究进展,包括紫杉醇半抗原的分子修饰、蛋白偶联物的构建和鉴定以及免疫学检测方法在植物组织和病人血浆中紫杉醇定性和定量中的应用。 相似文献
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τ干扰素(interferon tau,IFN—τ)作为新发现的一种干扰素,最初发现的作用是反刍动物母体妊娠识别孕体的信号,有抗黄体溶解作用。以后的研究证实,τ干扰素是属于Ⅰ型干扰素,具有抗病毒、抗细胞增生、免疫调节等作用,并且具有较其他干扰素低的细胞毒性。由于τ干扰素的这些特点,为许多疾病的治疗带来新的希望。 相似文献
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蛋白质复性是一个过程,存在中间阶段,此阶段的各种相互作用力决定了蛋白质能否复性。蛋白质复性要求有一定的条件,如pH、温度、离子强度、蛋白质浓度等。另外多种添加剂能促进蛋白质复性,其中包括表面活性剂、低浓度变性剂、分子伴侣蛋白和各种氧化还原对,但对于不同蛋白质,因其结构及理化特性不同,采取不同复性方法,可以使其达到最佳复性效果。 相似文献
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转基因枸杞中蛋白酶体糜蛋白酶样活性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
利用提取的转基因枸杞和正常枸杞蛋白与蛋白酶体的特异性荧光底物Suc-LLVY-AMC室温孵育,于360nm(激发光)/460nm(发射光)波长下测定荧光值的方法,研究了转基因枸杞和正常枸杞中蛋白酶体糜蛋白酶活性的差异及其特异性抑制剂MG115对枸杞中蛋白酶体活性的影响。结果表明表达H IV壳体蛋白的转基因枸杞蛋白酶体活性是空载体对照转基因枸杞蛋白酶体活性的3.6倍,是正常枸杞的4.2倍。10μM的MG115对表达H IV壳体蛋白的转基因枸杞蛋白酶体活性抑制率为87%,携带空载体对照的转基因枸杞抑制率为74%,而对正常枸杞抑制率仅为8.6%;50μM的MG115抑制作用与10μM的相比没有明显变化。这一结果将为利用蛋白酶体抑制剂提高转基因枸杞悬浮细胞H IV-1CA含量的研究提供理论依据。 相似文献
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转基因枸杞表达HIV-1壳体蛋白病毒样颗粒疫苗表达载体的构建 总被引:3,自引:0,他引:3
利用PCR技术扩增出人免疫缺陷病毒HIV-1MA4-CA融合基因,将其克隆到pGEM-T载体中,测定其核苷酸序列,并推导其氨基酸序列。该基因全长为450bp,与已发表的HIV-1的全序列基因(AF324493)完全同源,编码一个含150个氨基酸残基的蛋白质。将该基因与分泌型表达载体pCAMBIA1305.2连接,同时将水稻中富含甘氨酸蛋白的信号肽序列(GRP)引入MA4-CA融合基因,构建了含MA4-CA基因的植物分泌表达载体pCAMBIA1305.2-MA4-CA。 相似文献
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禽流感病毒血凝素疫苗在转基因马铃薯中的表达 总被引:20,自引:0,他引:20
利用转基因马铃薯表达禽流感病毒血凝素疫苗,将含有禽流感病毒血凝素序列的表达载体导入农杆菌,再感染马铃薯的幼茎外植体。转化植株的再生及温室栽培,Western blot分析表明,83%的转化植株在其块茎组织中表达了重组血凝素,表达量占总蛋白量的0.03-0.04%,结果显示用马铃薯生产口服禽流感疫苗是可行的。 相似文献
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离子交换色谱法对大肠杆菌表达的人重组骨形态发生蛋白-7的纯化 总被引:1,自引:0,他引:1
带有BMP 7基因的大肠杆菌可以用来高量表达重组的人骨形态发生蛋白 7。升温诱导表达后 ,每升培养液大约可得到菌体湿重 3g ,其中目的蛋白约占菌体总蛋白量的 40 %。裂解离心 ,用低浓度变性剂洗涤初步纯化包涵体 ,上清中无目的蛋白损失 ,目的蛋白纯度提高到 60 %,将包涵体溶解于高浓度变性剂溶液中 ,然后在不同条件下用离子交换色谱法对变性状态下的蛋白质进行纯化 ,绝大部分杂蛋白被除去 ,目的蛋白纯度达 95 %以上 ,改变条件 ,可以减少rhBMP 7损失。并做Westernblot对目的蛋白进行特异性鉴定。 相似文献
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转基因植物与食用疫苗 总被引:2,自引:1,他引:1
转基因植物与食用疫苗宋长征,韩金祥,王美玲(山东省医学科学院生物技术中心,济南)转基因植物技术是随着DNAI组、基因的遗传转化、植物的组织培养、目的基因的整合与表达的检测等技术手段的建立而发展起来的生物技术。利用转基因植物作为生物反应器,把外源基因引... 相似文献
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重组HIV-1壳体蛋白在转基因枸杞根系中的分泌表达 总被引:7,自引:1,他引:7
P24壳体蛋白(capsid, CA)是HIV¬-1早期感染的一个重要标志.用含有植物表达载体pCAMBIA 1305.2- MA4-CA(包含GRP信号肽和MA4-CA融合基因)的农杆菌菌株侵染枸杞,将转有MA4-CA融合基因的转化株诱导生根,并进行毛状根的培养; western blot证实根系及培养液中的MA4-CA融合蛋白以二聚体的形式存在,分子量为50 kDa;免疫组织化学显示,CA定位在细胞浆、细胞壁和细胞间隙中,充分证实了利用GRP信号肽可以引导重组蛋白分泌表达。建立枸杞中HIV-1壳体蛋白的根分泌表达系统,为研究植物HIV-1 CA-病毒样颗粒(VLPs)疫苗奠定基础。 相似文献