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高赖氨酸蛋白基因导入水稻及可育转基因植株的获得 总被引:33,自引:0,他引:33
构建了一个植物高效表达质粒,使来源于四棱豆(Psophocarpus tetragonolobus(L.)DC)的高赖氨酸蛋白基因(lys)受控于单子叶植物ubiqutin强启动子下表达。用基因枪法将其导入水稻(Oryza sativa L.)幼胚诱导的愈伤组织,经潮霉素抗性筛选,得到可育的再生植株。经PCR和Southem blotting检测,表明该基因已整合到水稻的基因组织。GUS组织化学染色表明转基因水稻植株的叶、茎和根中均有gus基因的表达。测定112株转基因水稻叶片中赖氨酸叶量,大部分植株有不同程度的提高,最高幅度为16.04%。 相似文献
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大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因的分离及其在抗虫植物基因工程中的 … 总被引:10,自引:1,他引:9
大豆Kuniz型胰蛋白酶抑制剂属于丝氨酸蛋白酶抑制剂,具有抗虫特性。从未成熟的大豆子叶中提取总RNA,然后转录成单链cDNA,以此为模板,用PCR方法扩增出大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因,并克隆到pBluescript KS的SmaⅠ位点上。序列分析表明:克隆片段大小为663bp,包含了基因完整的编码序列。 相似文献
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大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因的分离及其在抗虫植物基因工程中的应用 总被引:17,自引:0,他引:17
大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂属于丝氨酸蛋白酶抑制剂,具有抗虫特性。从未成熟的大豆(GlycinemaxL.)子叶中提取总RNA,然后反转录成单链cDNA,以此为模板,用PCR方法扩增出大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因,并克隆到pBluescriptKS(+)的SmaⅠ位点上。序列分析表明:克隆片段大小为663bp,包含了基因完整的编码序列。编码多肽由217个氨基酸组成,其中包括N端25个氨基酸组成的信号肽序列,181个氨基酸组成的成熟蛋白序列和C端11个氨基酸组成的液泡定位信号序列。构建了此基因的一系列植物表达载体,用于烟草(NicotianatabacumL.)、水稻(OryzasativaL.)、棉花(GosypiumhirsutumL.)等作物的转化。利用棉铃虫(HeliothisarmigeraHubner)对经PCRSouthern杂交验证获得的转基因烟草进行了抗虫测试,结果表明,转基因烟草和对照烟草相比,具有明显的抗虫能力。 相似文献
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