基于CRISPR/Cas系统的生物传感策略研究进展

CRISPR/Cas9系统是继锌指核酸内切酶、类转录激活因子效应物核酸酶之后的第三代基因组定点编辑工具,因其具有特异性切割双链DNA的能力,被广泛应用于基因编辑、生物传感等领域。Cas12a(Cpf1)、Cas13a(C2c2)等蛋白"附属切割"活性的发现,拓展了CRISPR/Cas系统在生物传感中的应用。近年来,研究人员开发出一系列快速、超敏、高特异性的生物传感系统用于分子检测,如SHERLOCK,DETECTR等。本文主要综述了基于CRISPR/Cas系统的生物传感策略的研究进展,并展望了其未来发展的方向。     

西双版纳传统利用的野生药食两用植物

2010年3月至2011年7月对西双版纳少数民族传统利用的药食两用植物进行民族植物学调查,通过访谈和野外调查工作,收集并记录了关于当地社区传统利用药食两用植物的传统知识以及其他相关信息,并选择了其中20种植物进行抗菌活性的筛选。共调查统计了43科95种西双版纳传统利用的药食两用植物,从分类学角度来看,以茄科（6种）和唇形科（6种）最多,其中草本植物占了最大比例,为49．5％。对其中20种植物的抗菌活性筛选结果显示,只有马蓝（Baphicacanthus cusia）和旋花茄（Sola-humspirale）对金黄色葡萄球菌有抑菌活性。从调查中可以看出：药食两用植物的利用在当地人的日常生活中仍占有相当重要的分量。但随着近年来经济快速发展导致的传统知识的急剧流失和森林的大面积砍伐,很多植物已经逐渐从人们的生活中淡出．如何保护这些传统知识并使其能够可持续发展下去是一个值得思考的问题。     

西双版纳传统利用的野生药食两用植物

2010年3月至2011年7月对西双版纳少数民族传统利用的药食两用植物进行民族植物学调查,通过访谈和野外调查工作, 收集并记录了关于当地社区传统利用药食两用植物的传统知识以及其他相关信息,并选择了其中20种植物进行抗菌活性的筛选。共调查统计了43科95种西双版纳传统利用的药食两用植物,从分类学角度来看,以茄科（6种）和唇形科（6种）最多,其中草本植物占了最大比例,为495%。对其中20种植物的抗菌活性筛选结果显示,只有马蓝（Baphicacanthus cusia）和旋花茄（Solanum spirale）对金黄色葡萄球菌有抑菌活性。从调查中可以看出：药食两用植物的利用在当地人的日常生活中仍占有相当重要的分量。但随着近年来经济快速发展导致的传统知识的急剧流失和森林的大面积砍伐,很多植物已经逐渐从人们的生活中淡出,如何保护这些传统知识并使其能够可持续发展下去是一个值得思考的问题。     

黔产青钱柳化学成分及α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

为了阐明青钱柳中的降血糖功效成分,实验对黔产青钱柳进行了系统化学成分研究和α-葡萄糖苷酶抑制活性评价。利用各种色谱学手段和波谱学方法,从青钱柳叶80%乙醇提取物中分离鉴定出13个化合物,分别为阿福豆苷(1)、山柰酚3-O-(4″-O-乙酰基)-α-L-吡喃鼠李糖苷(2)、juglanoside J(3)、1α,2α,4β-3羟基-1,2,3,4-四氢萘酮(4)、青钱柳苷III(5)、青钱柳苷J(6)、黄体酮(7)、去酰基萝藦苷元(8)、20-乙酰氧基-4-烯-3-酮(9)、齐墩果酸(10)、5-O-P香豆酰奎宁酸甲酯(11)、亚麻酸甲酯(12)、软脂酸(13)。其中,化合物9为新天然产物,化合物2~4、7、8、11、13均为首次从该植物中分离得到。用PNPG法对化合物1~10进行了α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选,结果显示,化合物1、2有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,表明黄酮类成分是青钱柳降血糖功效的物质基础之一。     

TLR4基因启动子区多态性及其对蛋白表达的影响

目的:检测中国人群Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)基因5′调控区的单核苷酸多态性(single nucleotidepolymorphisms,SNPs),探讨其与TLR4蛋白表达的关系.方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)对正常汉族人群样本TLR4启动子区-2242、-1892和-1837这3个可能有意义的SNP位点进行基因分型,以确定中国人群中TLR4基因启动子区SNP基因型和发生频率.取其中89例全血标本用全血培养模型检测内毒素刺激前后TLR4蛋白的表达变化,进一步探讨TLR4启动子区单核苷酸多态性对其蛋白表达的影响.结果:TLR4启动子区-2242、-1892和-1837这3个可能有意义的SNP住点等位基因频率分别是43.27%、27.70%和42.75%.TLR4蛋白表达检测结果表明内毒素刺激后-2242位点TC与CC基因型TLR4蛋白的表达显著高于TT基因型(P<0.05),其它位点则没有影响.结论:中国汉族人群中TLR4基因启动子区-2242位点可能是脓毒症关联分析重要的遗传标记.     

隔山牛皮消、耳叶牛皮消和戟叶牛皮消中四个C_(21)-甾体苷元含量比较研究

传统中药或民间应用对隔山牛皮消(Cynanchum wilfordii)、耳叶牛皮消(Cynanchum auricutalum)和戟叶牛皮消(Cynanchum bungei)三种药材基元植物基本上做白首乌或隔山消混用,其主要活性成分为C_(21)-甾体类成分。三种药材均含有告达亭(caudatin)、去乙酰萝藦苷元(deacymetaplexigenin)、开德苷元(kidjolanin)和加加米宁(gagamine),本文利用HPLC分析技术,检测四个C_(21)-甾体化合物在三种药材中的含量,为合理使用三种药材提供依据。平均每克药材中C_(21)-甾体含量(mg/g)研究结果表明:告达亭在隔山牛皮消中含量(水解前/水解后=0.3542/9.7142)最高、耳叶牛皮消(水解前/水解后=0.2577/4.0825)次之、戟叶牛皮消(水解前/水解后=0.0734/0.1895)最少;其次开德苷元在耳叶牛皮消中含量(水解前/水解后=0.1102/0.6094)比戟叶牛皮消(水解前/水解后=0.0751/0.3225)和隔山牛皮消(水解前/水解后=0.0736/0.2813)高,而后两者含量相近;加加米宁、去乙酰萝藦苷元在三种药材中含量差别不明显。     

RP-HPLC法测定不同产地及不同部位马蓝中六种活性成分的含量

建立了RP-HPLC法测定马蓝中色胺酮、2-苯并噁唑酮、靛玉红,靛蓝、阿克苷和角胡麻苷六种活性成分含量的方法,并对不同产地及不同部位药材含量进行了分析。采用ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6×250 mm,5μm),以乙腈和水为流动相梯度洗脱,流速为1 m L/min;检测波长280 nm;柱温30℃。马蓝中六种化学成分分离良好,各成分含量与峰面积在测定范围内均呈良好的线性关系(r≥0.999 1),加样回收率分别为100.25%、99.93%、100.46%、99.94%、99.92%、100.02%,RSD值分别为1.46、0.13、0.52、0.09、0.16、0.40。该方法简便快捷、重现性好,可为南板蓝根药材的品质评价和质量控制标准提供科学依据。     

CXCL10-CXCR3在急性肺损伤中的作用

急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是一种临床常见的肺部感染危重疾病，其核心是过度的炎症反应。新冠病毒导致ALI的发生，临床针对ALI的治疗措施是抑制过度炎症，促进损伤修复。趋化因子CXCL10和CXCR3受体与ALI密切相关，在ALI中CXCL10-CXCR3作用于肺巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等免疫细胞的激活和迁移，从而影响ALI的进展。本文阐述CXCL10-CXCR3通过肺巨噬细胞、中性粒细胞、自然杀伤细胞等多种细胞影响ALI的进展，探讨CXCL10-CXCR3作为抑制炎症反应的靶点，为ALI的治疗提供新的策略。