眼镜蛇毒中一个新的抗补体蛋白的分离纯化和性质研究

免疫性疾病、急性肺损伤、缺血再灌注损伤等病征的发生与补体异常激活密切相关。抗补体药物研究是新药开发的热点之一。本研究旨在从中华眼镜蛇毒中发现并分离纯化获得新的抗补体活性蛋白质,并对其理化性质和生物学活性加以研究。在抗补体活性追踪的指导下,采用蛋白质层析技术对眼镜蛇毒进行分离纯化;利用MALDI-TOF-MS、SDS-PAGE和葡聚糖凝胶过滤法测定目标蛋白质的纯度及分子量;等电聚焦凝胶电泳法测定其等电点;采用Edman降解法测定目标蛋白质的N-端氨基酸序列;测定目标蛋白质对补体经典途径和旁路途径的抑制活性以及可能的机制;采用MTT法和SRB法检测目标蛋白质对肿瘤细胞的杀伤作用;测定目标蛋白质对多种来源红细胞的溶血活性;采用KB平板扩散法检测抗菌活性。结果表明,通过SP Sephadex C-25阳离子交换层析和RP-HPLC C18反相层析,从中华眼镜蛇毒中分离纯化获得一个均一的抗补体蛋白质,将其命名为CTX-CI。还原性SDS-PAGE测得CTX-CI的表观分子量为12.7 kD,凝胶过滤法测得分子量为9.7 kD,MALDI-TOF-MS测得精确分子质量为7.0 kD;变性条件下测得CTX-CI的等电点为9-81;N-端氨基酸序列为LKCH。相关活性测定结果表明,CTX-CI能有效抑制人血清补体经典途径,其IC50为0.046 g/L,但对补体旁路途径无明显抑制作用;机制研究表明,CTX-CI能抑制补体经典途径C3转化酶的形成。同时,CTX-CI对肿瘤细胞株A549、K562和MCF-7细胞表现出抑制作用,其IC50分别为0.32 g/L、0.58 g/L、0.63 g/L;对豚鼠红细胞有轻微的溶血作用;能抑制枯草芽孢杆菌和藤黄微球菌的生长。综上所述,本研究从中华眼镜蛇毒中分离纯化出一个新的抗补体蛋白质CTX-CI,其理化性质和生物学活性表明其属于细胞毒素,CTX-CI能明显抑制补体经典途径,其机制与抑制经典途径C3转化酶的形成有关。     

西双版纳传统利用的野生药食两用植物

2010年3月至2011年7月对西双版纳少数民族传统利用的药食两用植物进行民族植物学调查,通过访谈和野外调查工作, 收集并记录了关于当地社区传统利用药食两用植物的传统知识以及其他相关信息,并选择了其中20种植物进行抗菌活性的筛选。共调查统计了43科95种西双版纳传统利用的药食两用植物,从分类学角度来看,以茄科（6种）和唇形科（6种）最多,其中草本植物占了最大比例,为495%。对其中20种植物的抗菌活性筛选结果显示,只有马蓝（Baphicacanthus cusia）和旋花茄（Solanum spirale）对金黄色葡萄球菌有抑菌活性。从调查中可以看出：药食两用植物的利用在当地人的日常生活中仍占有相当重要的分量。但随着近年来经济快速发展导致的传统知识的急剧流失和森林的大面积砍伐,很多植物已经逐渐从人们的生活中淡出,如何保护这些传统知识并使其能够可持续发展下去是一个值得思考的问题。     

西双版纳传统利用的野生药食两用植物

2010年3月至2011年7月对西双版纳少数民族传统利用的药食两用植物进行民族植物学调查,通过访谈和野外调查工作,收集并记录了关于当地社区传统利用药食两用植物的传统知识以及其他相关信息,并选择了其中20种植物进行抗菌活性的筛选。共调查统计了43科95种西双版纳传统利用的药食两用植物,从分类学角度来看,以茄科（6种）和唇形科（6种）最多,其中草本植物占了最大比例,为49．5％。对其中20种植物的抗菌活性筛选结果显示,只有马蓝（Baphicacanthus cusia）和旋花茄（Sola-humspirale）对金黄色葡萄球菌有抑菌活性。从调查中可以看出：药食两用植物的利用在当地人的日常生活中仍占有相当重要的分量。但随着近年来经济快速发展导致的传统知识的急剧流失和森林的大面积砍伐,很多植物已经逐渐从人们的生活中淡出．如何保护这些传统知识并使其能够可持续发展下去是一个值得思考的问题。     

花叶山姜挥发油化学成分及抗菌活性研究

采用气相色谱与质谱联用技术分析花叶山姜地上与地下部分挥发油的化学成分.分别从两种挥发油中鉴定了82和52种化合物,包括42种共有成分,其中α-乙酸葑酯为主要化合物,含量分别为22％和13％.通过三种革兰氏阳性细菌和三种革兰氏阴性细菌的筛选,两部位挥发油显示较好的抗枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的作用,同时地下部分挥发油显示抗枯草杆菌活性.以上结果显示,花叶山姜是山姜属植物中优良的抗革兰氏阳性菌药用资源.     

广西苦丁茶的挥发油成分

在我国广西作为苦丁茶饮用的一种植物是冬青科冬青属苦丁茶 (ＩｌｅｘｋｕｄｉｎｃｈａＣ .Ｊ .Ｔｓｅｎｇ)的叶。化学成分及活性研究表明 (Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ等 ,1999) ,广西苦丁茶中三萜类成分具有显著抑制酰基辅酶Ａ -胆固醇酰基转移酶 (ＡＣＡＴ)活性 ,可用于防止动脉粥样硬化症。在我们开展相关的研究工作时注意到 ,其挥发油具有清香香气 ,但成分未见报道。本文利用气相色谱 -质谱联用仪 ,对其成分进行了全面、系统的分析 ,为该种植物的综合开发利用提供了部分科学依据。1　仪器和样品气相色谱 -质谱联用仪 :ＨＰ6 890 /ＨＰ5 973ＧＣ…     

眼镜蛇毒中一个弱纤维蛋白原水解活性金属蛋白酶的纯化和性质研究

通过蛋白层析从中华眼镜蛇毒中分离纯化出一个新的纤维蛋白原水解酶atrase A. Atrase A是一个分子量为64.6 kD,等电点为pH 9.6和中性糖含量为4.16%的碱性单链糖蛋白.它具有弱的纤维蛋白原α链水解活性.该活性能被金属螯合剂EDTA, EGTA,1,10 phenanthroline和还原剂DTT完全抑制,而PMSF只能部分抑制该活性,大豆胰蛋白酶抑制剂对其没有影响, 表明atrase A属于金属蛋白酶. Atrase A具有水肿活性和金黄色葡萄球菌抑制活性.它对A549 和K562 细胞没有细胞毒性,但能使贴壁生长的A549细胞解离悬浮. Atrase A没有纤维蛋白、azocasein 、BAEE水解活性,对ADP、胶原诱导的血小板聚集没有明确的抑制作用. 经小鼠皮下注射后没有发现其有出血毒活性.     

苗药岩豇豆化学成分的研究

从黔产苗族习用药材岩豇豆(Lysionotus pauciflorus Maxim)中分离得到了5个化合物,经波谱数据分析,它们的结构分别为：二十九烷醇-15(nonacosan-15-ol,1),正三十烷醇(n-triscontanol,2),β-谷甾(β-stitosterol,3),岩豆素(7-dihydrox-4,6,8-trlmethoxyflavone or nevadensin,4),熊果酸(ursolic acid,5),除化合物4外,其它成分在该植物中均为首次报道。