CD109的生物学功能及其与乳腺癌的关系

CD109是细胞的一种表面抗原,通过TGF-β信号通路传导来调控细胞的增殖与分化,CD109还同时参与JAK-STAT和表皮生长因子受体（EGFR）信号通路调节细胞增殖与分化功能,与一些疾病及肿瘤的发生与发展密切相关。近年来研究发现CD109在基底细胞样乳腺癌中呈明显高表达,并且与基底细胞样乳腺癌易复发及转移相关,导致治疗和预后效果差。因此CD109检测分析对乳腺癌的诊断及治疗具有重要意义,CD109与乳腺癌的关系成为当前研究的热点。本文综述了CD109的生物学功能及CD109与乳腺癌的关系。     

应用牙源干细胞进行组织损伤修复的研究进展

牙源干细胞是由人类牙齿及其周围相关组织中分离出的间充质干细胞。自2000年从牙髓组织中发现和分离出牙髓干细胞以来,已有7种牙源干细胞被分离和鉴定。近年来,学者不但对这些干细胞的分离、鉴定、生物学特征和功能进行了大量基础方面的研究,而且对其临床应用也作了广泛的探讨。该文对牙源干细胞在口腔科学领域的应用,如牙体、牙髓和牙周组织的修复和再造的最新研究进行综述,并对它们在全身疾病的治疗潜能方面作概括的介绍,如在治疗脑血管意外损伤、脊髓神经损伤、帕金森氏病、心肌梗死、糖尿病和免疫缺陷性疾病等方面的研究,以促进牙源干细胞在基础与临床应用方面的深入研究。     

Epha4基因通过FGF信号通路调节大脑皮层发育

目的阐明Epha4基因在大脑皮层发育早期放射性胶质细胞(RGCs)命运决定中的功能。方法利用Cre-loxp技术分别在孕龄为11.5 d或13.5 d的小鼠皮层细胞中敲掉Epha4基因。根据小鼠的基因型分为3组:对照组、Nestin;Epha4fx/fx及GFAP;Epha4fx/fx,分别通过尼氏染色、免疫荧光共染色及免疫印迹分析了突变小鼠大脑皮层表现型、大脑皮层RGCs增殖和分化及皮层细胞信号通路。组间比较利用F检验进行统计学分析。结果尼氏染色结果表明,与正常新生小鼠皮层(709±30)μm相比,在孕龄11.5 d Epha4基因敲除新生小鼠大脑皮层厚度减少至(475±66)μm,差异具有统计学意义(t=7.252,P<0.05),而孕龄13.5 d Epha4基因敲除新生小鼠大脑皮层厚度(727±37)μm,差异无统计学意义。Brd U标记及免疫荧光共染色结果表明,在孕龄14.5 d两种突变小鼠中RGCs增殖能力减弱(46±1)%vs Epha4fx/fx(58±2)%,t=10.72,P<0.05;GFAP;Epha4fx/fx(50±2)%vs Epha4fx/fx(58±2)%,t=5.575,P<0.05),而向神经元分化能力增强(Nestin;Epha4fx/fx(34±5)%vs Epha4fx/fx(25±1)%,t=4.269,P<0.05;GFAP;Epha4fx/fx(35±2)%vs Epha4fx/fx(25±1)%,t=12.48,P<0.05。Western blotting分析表明分离的皮层细胞经成纤维生长因子(FGFs)作用时ERK及FRS2α磷酸化减弱。结论 Epha4基因决定大脑皮层发育早期RGCs的命运,这一过程是通过FGFs信号通路完成的。这些发现为临床治疗脊髓损伤及阿尔茨海默症等神经疾病提供了理论依据。     

人体牙髓干细胞的分离与鉴定

目的探讨牙髓干细胞（DPSC）对牙周病,外伤及肿瘤等造成下颌骨缺损、口腔软组织与神经损伤的修复治疗作用。方法本研究利用组织块培养法分离出人体DPSC,用流式细胞仪进行了鉴定,并进行DPSC成骨、成脂、成神经的分化研究。结果分离出3株DPSC,流式细胞分析表明DPSC表达CD73和CD90标志物,但不表达生血干细胞标志物CD34。用茜素红染色表明DPSC能分化成骨细胞,油红O染色表明DPSC能分化成脂肪细胞,免疫免疫荧光染色表明DPSC分化的细胞表达神经细胞特异标志物TUJ1。结论组织块培养能够高效快速分离表达CD73和CD90的DPSC,在体外诱导条件下DPSC能分化为成骨细胞、脂肪细胞和神经细胞,此研究为DPSC在治疗和修复骨组织缺损和神经损伤中的临床应用提供了实验依据。     

诱导多能干细胞及其在神经退行性疾病研究中的应用

用干细胞转录因子OCT4、SOX2、c-MYC和KLF4进行体细胞重编程产生具有胚胎干细胞特性的诱导多能干细胞(iPS细胞)是干细胞研究领域的突破性进展。近年来,iPS细胞的研究从产生方法、重编程机理及实际应用方面不断取得进展。由于iPS细胞的产生可取自体细胞,因而克服了胚胎干细胞应用的伦理学和免疫排斥等缺陷,为iPS细胞的临床应用开辟了广阔的前景。该文将对iPS细胞的产生方法、重编程机理及其在神经性退行性疾病的研究与应用进行文献综述,反映近几年iPS细胞最新研究成果,并阐述了用病人iPS细胞模型探讨帕金森氏病、老年性痴呆症、脊髓侧索硬化症、脊髓肌肉萎缩症及舞蹈症等5种常见神经性退行性疾病发病机理的研究现状。     

神经祖细胞与纤维蛋白支撑物移植对老年痴呆模型鼠的记忆认知功能改善及其机理探究

目的探讨阿尔茨海默病（AD）模型鼠双侧海马区移植含多因子孵育的神经祖细胞（NPCs）后记忆认知功能改善情况及NPCs移植后迁移定位和分化能力。 方法取胎龄10?d的C57BL/6J孕鼠,分离得胎鼠NPCs,NPCs体外分化及鉴定,AD模型鼠分3组：NPCs+因子组、因子组及PBS组,对照组为同月龄C57BL/6J小鼠;Morris水迷宫及新物体识别实验检测AD模型鼠移植NPCs细胞前,及移植1至6个月后记忆行为变化情况;通过免疫荧光,免疫组化和Western-blot检测海马区移植的NPCs向神经元和胆碱能神经元分化及迁移能力。组间比较采用F检验。 结果Morris水迷宫实验中,NPCs+因子组找到平台前的逃避潜伏期时间（14.12±7.45）s要明显低于注射PBS的AD模型鼠组[（39.65±4.64）?s,F = 2.578,P = 0.0094],因子组时间（15.68±5.34）s同样低于PBS组[（39.65±4.64）s,F?= 1.324,P = 0.0016],24 h撤去平台后,NPCs+因子组逃避潜伏期时间（15.12±3.52）s仍低于PBS组[（37.17±2.18）?s,F = 2.598,P = 0.0003],因子组时间（16.62±3.23）s同样低于PBS组[（37.17±2.18）s,F = 2.186,P = 0.0004）];新物体识别实验中,各实验组对新物体探究时间占总探究时间百分比结果中,NPCs+因子组（68.46±2.4）%要高于PBS组[（54.47±4.79）%,F =3.983,P = 0.018],因子组（65.20±1.03）%同样高于PBS组[（54.47±4.79）%,F = 21.63,P = 0.042];实验结果表明,通过移植细胞与因子AD模型鼠的记忆认知功能在早期均得到改善,随着时间的增长,移植NPCs组的记忆改善情况持续时间更长久;Western blot结果显示AD模型鼠海马区胆碱能神经元与正常C57BL/6J鼠相比表达减少,移植NPCs后,AD模型鼠脑内胆碱能神经元增多;免疫荧光与免疫组化结果显示,移植的NPCs在AD模型鼠脑内移植区存活,并向胆碱能神经元分化。 结论AD模型鼠双侧海马区移植的含多因子孵育的NPCs,通过分化成功能性的胆碱能神经元来改善AD鼠的记忆认知功能。     

人体皮肤成纤维细胞的快速分离及多向分化能力鉴定

目的建立快速分离人皮肤成纤维细胞的方法,并探讨成纤维细胞在成脂、成骨、成软骨和成神经的多向分化潜能。 方法利用组织块培养法分离人体皮肤成纤维细胞,通过形态学观察、流式分析、Vimentin蛋白染色鉴定成纤维细胞;再利用生长曲线、核型分析、线粒体染色分析不同传代细胞的增殖速度,线粒体及染色体形态的改变;最后进行成纤维细胞成脂、成骨、成软骨和成神经的诱导分化实验,鉴定其多向分化潜能。两代细胞增殖速度及线料体相对量的比较采用t检验统计分析。 结果分离的皮肤成纤维细胞呈典型梭状及多角形;高表达细胞表面标记物CD90 （NCF1,NCF2占比分别为99.9%,98.7%）和CD73 （NCF1,NCF2占比分别为98.2%,85.6%）,但极少表达造血干细胞标记物CD34 （NCF1,NCF2占比分别为1.8%,2.6%）;细胞Vimentin蛋白表达呈阳性,阳性率为100%;对细胞生长曲线进行分析,表明分离后不同代次细胞增殖差异无统计学意义（t?= 1.586,P?= 0.1567）;线粒体相对含量统计分析,同一株细胞系第5代（相对荧光强度值：6876±577.8）与第10代（相对荧光强度值：7371±471.9）之间的差异无统计学意义（t?= 0.664,P?= 0.543）;核型分析分别显示传代后保持染色体数目为正常46条且形态无明显异常;经诱导后成纤维细胞可向成脂、成骨、成软骨和类神经分化。 结论利用组织块培养法分离出的人体皮肤成纤维细胞状态稳定,增殖能力强,具有成脂、成骨、成软骨和成神经多向分化诱导潜能,为细胞移植修复骨损伤、软骨损伤和神经损伤性疾病的临床研究提供细胞来源及实验依据。