大肠杆菌抗药性质粒pFD11结合转移的一些特性

当pFD11质粒由转化或转导途径转移给大肠杆菌C_(600)后,都失去结合转移能力。而抽提C_(600)(pFD11)的DNA,经琼脂糖凝胶电泳,仅保留分子量最大的一条质粒DNA带,估计就是抗性决定因子。     

表达乙肝病毒融合表面抗原基因SA-28的二倍体酵母工程菌的选育

将乙肝病毒融合表面抗原基因SA-28的单倍体酵母工程菌Y19/YFD158和与其不同接合型的单倍体酵母菌Y95接合,筛选到二倍体酵母工程菌Y95xY19/YFD158。对两种工程菌的研究表明：二倍体工程菌发酵密度为单倍体工程菌的3倍;表达质粒在二倍体酵母中的稳定性明显高于单倍体工程菌;二倍体工程菌对融合抗原的表达量为单倍体的3倍以上;表达质粒在二倍体细胞中的平均拷贝数略低于单倍体工程菌。     

大肠杆菌抗药性质粒pFD3的链霉素抗性表达

Cohen等‘31研究大肠杆菌抗药性质粒R6 （此质粒携带卡那霉素、新霉素、氯霉素、四环 素、链霉素抗性）,发现在用卡那霉素抗性、新 霉素抗性或氯霉素抗性作为选择性标记进行转 化时,极少数转化子失掉链霉素抗性。本文报 道大肠杆菌抗药性质粒pFD 3（此质粒携带四 环素、链霉素、氯霉素、氨苇青霉素、磺胺抗性） 在经结合转移或转化途径传递给大肠杆菌C'₆₀₀ 时,所得的转移子、转化子中四环素、氯霉素、氨 苇青霉素及磺胺抗性都能正确表达,而链霉素 抗性则不能完全表达。     

表达乙肝病毒融合表面抗原基因SA-28的二倍体酵母工程菌的选育

将乙肝病毒融合表达抗原基因ＳＡ－２８的单倍体酵母工程菌Ｙ１９／ＹＦＤ１５８和与其不同接合型的单倍体酵母菌Ｙ９５接合,筛以二倍体酵母工程菌Ｙ９５ｘＹ１９／ＹＦＤ１５８。对两种工程菌的研究表明：三倍体工程菌发酵密度为单倍休工程菌的３倍;表达质粒在二倍体酵母中的稳定性明显高于单倍体工程菌;二倍体工程菌对融合抗原的表达量为单倍体的３倍以上,表达质粒在二倍体细菌中的平均拷贝数略低于单倍体工程菌。     

大肠杆菌的一个转座子Tn2981的特性

在复旦大学校园分离到1株带有抗药性质粒pFD13(Sm~RSu~RCm~RTc~RHg~R)的大肠杆菌B7,并在pFD13上发现1个转座子,它带有链霉素(Sm~R)、汞盐(Hg~R)、磺胺嘧啶(Su~R)抗性基因,定名为Tn2981。Tn2981可以从质粒pFD13转座到质粒R144drd3上,也能从质粒转座到大肠杆菌的染色体上。这种转座作用不依赖于宿主细胞reeA的基因产物。经电子显微镜测量质粒pBR322::Tn2981及质粒pBR322的长度,换算后得到Tn2981分子量是12.48×10~6道尔顿,并经限制性内切酶酶切说明它含有6个EeoRI切点。     

几种常見微生物的遺传学研究方法簡介

微生物在工农医各方面的实践意义愈来愈显得重要。不论是工业微生物的选育也好,细菌的抗药性所引起的医疗上的麻烦也好,都涉及微生物的遗传学问题。微生物也是研究遗传学基础理论的理想材料。微生物遗传学的研究也推进了微生物学和生物化学的研究工作。微生物种类繁多,可是从遗传学的观点看,它们的区別是次要的,而它们的共同性却是主要的。这里我们选择三种较为常见的微生物作为代表,来说明研究微生物遗传学和培育微生物优良品种的最基本的方     

大肠杆菌抗药性质粒pFD11温度敏感突变型的分离

温度敏感突变型一般可用于研究DNA复制的控制机制,而质粒温度敏感突变型更可用于测定质粒的拷贝数。我们已报道过从人的粪水中分离到带有抗药性质粒pFD11的大肠杆菌,为了研究pFD11质粒的拷贝数,进行了抗药性质粒pFD11的温度敏感突变型的分离工作。大肠杆菌K12W1485 hisyvl(F~-)(pFD11)的培养物经离心收集菌体,然后悬于pH6.0的磷酸缓冲液中,用NTG200微克/毫升37℃处理30分钟,用0.05M硫     

质粒R144drd3对于基因工程载体pHC79和pCB2诱动的研究

质粒的诱动作用包括两个方面,一个是诱 动供体细胞染色体的转移,这我们已有报道［121. 另一个是诱动非结合质粒的转移。有些质粒可 以通过细胞结合进行转移,这就是结合质粒;而 非结合质粒,是不能靠质粒本身媒介自己在细 胞间进行转移的。这种非结合质粒有许多在细 胞同时携带结合质粒时,可以通过结合质粒的 诱动,结合转移进人受体细胞。从安全性角度 考虑,作为基因工程载体的质粒,应该既不能自 身转移,又不能被诱动转移。     

北京动物园动物肠道菌携带抗药性质粒的分离

分离了254种动物的肠道菌,其中兽类127种、鸟类78种、爬行类33种、两栖类4种、鱼类12种。用5种抗生素进行抗性测定后,分离到271株抗性菌株。用接触转移实验测定,其中41株的抗性可以转移,抗性不能转移的菌株经SDS消除实验测定,结果有154株的抗性可以消除。将抗性能转移的菌株和10％的抗性不能转移但经SDS可以消除的菌株,用抽提DNA或制备溶菌物进行DNA琼脂糖凝胶电泳测定,除染色体带外,均有质粒带,说明这些可转移和消除的抗性都是由抗药性质粒所控制。其中P族质粒4个,能启动染色体转移的质粒4个。     

大肠杆菌青霉素酰胺酶高产菌株的选育

应用青霉素酰胺酶裂解青霉素制备半合成青霉素原料6-氨基青霉烷酸(简称6-APA),具有安全、节省费用等优点。为了提高青霉素酰胺酶活力,我们开展了大肠杆菌青霉素酰胺酶的菌种选育工作。