Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶在细胞增殖中的作用

钙调蛋白(calmodulin,CaM)是Ca2 的受体蛋白,活化的CaM经Ca2 /CaM依赖性蛋白激酶(Ca2 /calmodulin dependent protein kinases,CaMKs途)径,影响细胞的生长和分裂。CaMKs在调节不同组织正常细胞及恶性细胞的细胞周期进程、核转录及信号转导的过程中发挥重要作用,通过不同机制及Ca2 /CaM依赖性激酶激酶诱导的相关级联反应影响多种细胞的增殖。对CaMKs主要成员CaMKI、CaMKII、CaMKIII、CaMKIV的生物学特点以及其在细胞增殖中作用的最新研究进展进行了综述。     

Ca^2＋／钙调蛋白依赖性蛋白激酶在细胞增殖中的作用liferation

钙调蛋白（calmodulin,CaM）是Ca^2＋的受体蛋白,活化的CaM经Ca^2＋／CaM依赖性蛋白激酶（Ca^2＋／calmodulin dependent protein kinases,CaMKs）途径,影响细胞的生长和分裂。CaMKs在调节不同组织正常细胞及恶性细胞的细胞周期进程、核转录及信号转导的过程中发挥重要作用,通过不同机制及Ca^2＋／CaM依赖性激酶激酶诱导的相关级联反应影响多种细胞的增殖。对CaMKs主要成员CaM KⅠ、CaM KⅡ、CaM KⅢ、CaM KⅣ的生物学特点以及其在细胞增殖中作用的最新研究进展进行了综述。     

基因表达转录分析中内参基因的选择

目前基因表达的转录分析多采用单一看家基因作为内参来校正目标基因的表达量.实验中以人肝癌BEL-7402细胞为研究对象,应用实时荧光定量PCR技术,观察了新型三肽化合物酪丝缬肽作用后RPL13A、UBC、EIF4A、B2M、GAPDH和ACTB共6个看家基因mRNA水平的表达情况.经过geNorm程序统计学分析处理,结果表明,这6个看家基因的表达存在差异,确定了RPL13A、UBC2个看家基因用于校正目标基因的表达量.基因表达转录分析中内参基因选择的必要性在实验中得以证明,更重要的是为各种实验因素影响下(尤其是新物质作用下)内参基因的选择介绍和提供了一种行之有效的方法.     

酪丝亮肽荧光标记物的合成及其在肿瘤治疗靶点研究中的应用

酪丝亮肽是一种具有抗肿瘤活性的小分子三肽,它可以诱导造成肝癌细胞发生凋亡坏死,从而杀伤肿瘤细胞,但是酪丝亮肽在肝癌细胞的亚细胞定位尚不十分明确．为了达到对酪丝亮肽进行示踪进而观察其亚细胞定位的目的,使用荧光物质（5（6）－羧基叫甲基罗丹明琥珀酰业胺酯,5（6）－TAMRASE）对酪丝亮肽进行丫标记,应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、毛细管电泳和荧光分光光度法对标记酪丝亮肽进行纯化和鉴定．并在激光扫描共聚焦显微镜下观察了荧光标记酪丝亮肽在人肝癌BEL－7402细胞中的分布．结果显示,合成的酪丝亮肽荧光标记物性质稳定,标记的酪丝亮肽在人肝癌BEL－7402细胞的胞浆中呈聚集分布．     

酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402细胞钙稳态影响的实验研究

目前寻找有效的药物仍是治疗肿瘤的关键环节之一. 酪丝亮肽为中国新近研发并具有自主知识产权的三肽化合物. 观察了酪丝亮肽的抗肝癌作用, 并研究了其对肿瘤细胞钙稳态的影响, 以初步探讨它的抗肿瘤作用机制. 结果发现, 酪丝亮肽能显著抑制人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤的生长, 160 mg/(kg·d)治疗组肿瘤生长抑制率可达41.34%, 电子显微镜观察发现酪丝亮肽可引起移植瘤细胞的坏死和凋亡, 细胞器线粒体和内质网损伤, 并出现钙沉积. 应用激光扫描共聚焦显微镜及流式细胞仪观察发现, 10 mg/mL酪丝亮肽在400 s内可引起体外培养BEL-7402细胞胞浆钙离子浓度迅速升高, 最高幅度可达239.13%; 持续作用1 h后BEL-7402胞浆钙离子维持在高水平, 作用2 h后胞浆钙离子浓度开始下降, 4和24 h时的胞浆钙离子水平均低于对照, 相同剂量的药物对人正常肝细胞株Chang氏肝无明显影响; 酪丝亮肽还可使体外培养的BEL-7402细胞线粒体跨膜电位明显下降, 提示其抗肝癌机制可能是通过影响肿瘤细胞的钙稳态, 诱导其发生坏死或凋亡.