一种高精度微芯片用于微环境中细胞温度波动监测

温度是生物体中重要的参数,准确测量细胞在代谢过程中的温度波动可为更深入地探究细胞的能量产生和扩散过程提供有价值的信息,从而促进癌症和其他疾病的研究. 本文基于微机电加工和微流控技术制备一批可在微环境下监测细胞代谢过程中温度波动的微芯片. 微芯片由捕获细胞的C形“微坝”结构、供液体流动的“微缝”和监测温度波动的电极结构组成. 可将细胞培养、温度监测在微芯片上完成. 将有细胞贴壁生长的微芯片放置在37℃恒温环境中,采用恒电流法实时在线连续监测细胞在代谢过程中的温度波动. 该芯片共有9个检测单元,每个单元的检测都是完全独立的,可同时检测多个结构上的细胞温度波动情况. 微芯片的准确度优于0.013℃,精度为±0.014℃,响应速度约0.1 s,不同厚度Ti/Pt温度传感器的温度-电阻之间的线性拟合参数R²大于0.999. 在（37±0.015）℃的恒温环境下监测细胞,发现人肺腺癌细胞系（human lung adenocarcinoma cell,H1975）在代谢过程中温度波动的极差（0.173℃）大于肝星状细胞（hepatic stellate cell,HSC）的极差（0.127℃）. 癌细胞H1975的平均温度（37.001℃）高于正常细胞HSC的平均温度（36.989℃）. 该芯片为细胞代谢监测、药物筛选等方面提供了新的研究平台.     

ADAM17通过EGFR-PI3K/Akt/p27通路调控前列腺癌细胞增殖

ADAM17是金属蛋白酶家族(ADAMs)成员之一,研究发现ADAM17可以通过水解细胞表面蛋白的胞外结构域导致肿瘤细胞的增殖和转移.本课题前期研究结果显示,与LNCap细胞相比,ADAM17在DU145细胞中高表达,且与细胞增殖相关.为了研究ADAM17与前列腺癌细胞增殖相关基因p27表达的关系及调控机制,我们采用RNAi技术下调ADAM17的表达,加入PMA(一种ADAM17的激活剂)上调ADAM17的表达,通过细胞计数和CCK-8方法检测细胞增殖,RT-PCR检测p27mRNA的表达,Western印迹检测ADAM17的表达;进一步阻断EGFR和PI3K/Akt信号转导,RT-PCR方法检测p27mRNA的表达,Western印迹检测ADAM17、EGFR、pEGFR、Akt和pAkt的表达.结果显示ADAM17的表达与前列腺癌细胞的增殖呈正相关(P0.05);p27mRNA的表达与ADAM17的表达呈负相关(P0.05);分别阻断EGFR和PI3K/Akt信号转导通路,同时使ADAM17表达增加,与对照组(单独PMA处理组)相比,p27mRNA的表达均增加(P0.05).提示ADAM17调控前列腺癌细胞增殖相关基因p27表达是通过EGFR-PI3K/Akt信号通路实现的.     

左乙拉西坦治疗小儿癫痫的临床疗效及对血清IgA、IgM、IgG水平的影响

目的:探讨左乙拉西坦用于治疗小儿癫痫的临床疗效及对血清IgA、IgM、IgG含量的影响。方法:选择2014年1月-2017年1月在我院就诊的癫痫患儿102例为研究对象,按治疗方式不同将其分为各51例患儿的观察组与对照组,观察组给予患儿左乙拉西坦片进行治疗,对照组给予患儿丙戊酸钠口服液进行治疗,两组患儿均治疗时间为24周。对比两组患儿的临床疗效、不良反应发生率、治疗前后血清IgA、IgM、IgG水平、认知功能评分和癫痫发作次数变化。结果:治疗后,观察组的总有效率96.09%(49/51)高于对照组84.31%(43/51)(P0.05);两组患儿的IgA、IgM和IgG含量均比治疗前有所下降,且观察组IgA和IgM含量低于对照组(P0.05),两组IgG含量无差异(P0.05);观察组的不良反应发生率11.76%(6/51)低于对照组25.49%(13/51)(P0.05);观察患儿的FIQ、PIQ和VIQ评分均比治疗前有所升高,对照组患儿的FIQ、PIQ和VIQ评分均比治疗前有所下降,观察组评分高于对照组(P0.05);治疗后,两组各类型癫痫患儿的发作次数均比治疗前有所降低(P0.05),且观察组各类型癫痫患儿的发作次数均明显少于对照组(P0.05)。结论:左乙拉西坦治疗小儿癫痫的疗效显著,可显著降低癫痫患儿的血清免疫球蛋白水平,改善认知功能,降低癫痫的发作次数,且安全性较高。     

不同NaHCO3碱度对瓦氏雅罗鱼鳃组织结构的影响

研究采用组织学方法观察和比较了达里诺尔湖瓦氏雅罗鱼(Leuciscus waleckii, 碱水种)和松花江瓦氏雅罗鱼(淡水种)在相同碳酸盐碱度胁迫下(C_A0、C_A30和C_A50)鳃组织结构的差异, 探究瓦氏雅罗鱼碱水种耐高碱特性与鳃组织结构微观调整的适应性关系。结果显示, 随着碱度增加, 碱水种鳃丝变宽、鳃小片变长、鳃小片间距变大(P<0.05); 淡水种鳃丝变宽、鳃小片间距变大(P<0.05), 鳃小片长度在C_A30时显著变长(P<0.05), 而在C_A50时与对照组无明显差异(P>0.05)。碱水种在C_A30和C_A50的氯细胞数量与对照组相比明显增加, C_A50的氯细胞排列更加紧密并且有叠加现象, 扁平上皮细胞变大, 细胞表面增厚; 淡水种在C_A30时的氯细胞数量明显多于C_A50, 但在碱度胁迫下, 鳃小片出现破损, 扁平上皮细胞、柱细胞和血细胞融合、脱落现象严重。另外, 在碱水种和淡水种鳃耙上皮细胞中发现了大量黏液细胞分泌, 随着碱度增加, 黏液细胞由大而稀疏变为小而密集, 其中碱水种的黏液细胞数量较淡水种多, 而且排列更为整齐、密集。鳃组织学研究结果表明, 瓦氏雅罗鱼碱水种通过保持鳃组织结构和生理功能的完整性达到对高碱环境的长期适应, 而淡水种则因鳃细胞融合、脱落造成生理功能丧失, 不能长期适应高碱环境。研究结果可为淡水鱼类在盐碱水的移植驯化提供依据和指导。