链霉菌葡萄糖异构酶的研究——Ⅰ、链霉菌336的诱变育种

食糖是人类生活的必需品。近十多年来,利用葡萄糖异构酶菌种由粮食制备高甜度的果葡糖浆(异构糖),在国际上正发展成为一种方兴未艾的新技术。其目的就在于为人类开辟新的糖源。随着能源危机的加深,食糖进口国力图克服或减少对糖价上涨的关连性。果葡糖浆甜度高,成本低;发热量低,因而可减少因食用糖量的增加而引起的肥胖病、心脏病、糖尿病和牙病。因此,在美、日、欧洲共同体等发达国家里,这项技术不仅迅速发展,并取得了工业化和商品化的成就。在美国,到1980年止,果葡糖浆的年产量。     

携带反义凝血酶受体和p21双基因共表达腺病毒伴随病毒载体的构建与包装

为探讨双基因共表达对再狭窄的防治作用,分别构建了含反义凝血酶受体(ATR)或/和p21单、双基因及报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒伴随病毒(AAV)载体.上述载体经脂质体介导转染BHK-21细胞, G418筛选获得整合有外源基因的细胞株.克隆形成过程中显示单、双基因转染后细胞增殖受到了不同程度的抑制,克隆形成速度减慢,细胞形态改变,且双基因的作用明显大于单基因.以绿色荧光出现说明报告基因得到表达后,又以DNA印迹证实ATR和p21单、双基因已整合于细胞基因组中,并维持了凝血酶受体(TR)基因的反义位置.半定量RT-PCR证实TR基因表达降低,p21基因表达升高,ATR和p21(AP)双基因得到了共表达.以具有可提供复制和包装功能的重组单纯疱疹病毒rHSV-rc/ΔU12分别感染载有不同基因的BHK细胞株,包装产生重组AAV(rAAV)病毒, 并经点杂交法测定其滴度(每毫升病毒液中所含病毒颗粒数).rAAV/AP中ATR与p21的病毒颗粒数分别为1.02×10¹³/ml和1.08×10¹³/ml, 单基因rAAV/ATR的滴度为6.54×10¹²/ml,rAAV/P21为1.06×10¹³/ml,为进一步的体内外实验奠定了物质基础.     

抗寒剂CR－4在山东胜利油田东安农场水稻上的应用效果

抗寒剂ＣＲ－４在山东胜利油田东安农场水稻上的应用效果赵秀文,李会平（山东胜利油田东安农场,东营市２５７０６４〕ＴＨＥＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＥＦＦＥＣＴＳＯＦＴＨＥＣＯＬＤ－ＲＥＳＩＳＴＥＲＣＲ－４ＩＮＲＩＣＥＣＵＬＴＵＲＥＩＮＤＯＮＧＡＮＦＡＲＭＯＦ...     

大鼠侧脑室注射高渗盐水引起血压上升过程中心房钠尿肽和血管升压素的变化

为研究中枢渗透压刺激升压的机制,在大鼠侧脑室内给予高滲人工脑脊液,记录颈动脉压和心率变化,给药10min 后,用放射免疫法测定血浆、下丘脑和垂体中的心房钠尿肽和升压素。结果表明:中枢给予高渗人工脑脊液后,血浆中升压素水平明显增加,心房钠尿肽没有明显改变,下丘脑和垂体中的心房钠尿肽含量增加,而升压素含量下降。     

猫颈部和腹部迷走神经加压反应的比较研究

刺激麻醉猫颈部和腹部迷走神经中枢端引起的升压反应,不但反应模式有别,其升压机制也不同。颈部迷走加压反应是在出现快速降压之后的一个缓慢持续的血压升高,而腹部迷走加压反应则是一个快而短暂的升压反应。在颈迷走加压反应出现的同时伴有血浆加压素(AVP)的增加,但血浆肾素活性(PRA)及血管紧张素 Ⅱ(ANG Ⅱ)和肾神经放电(RND)都有不同程度的下降。腹部迷走加压反应的出现则伴有 RND,PRA 和血浆 ANG Ⅱ 水平的增加,但 AVP 无明显改变。兴奋同一迷走神经颈腹段传入纤维引起的升压效应之所以不同主要是由于传入纤维的来源和在中枢的投射部位不同,因而升压机制也各异。     

延髓孤束核微量注射可乐宁对自发性高血压大鼠血压和心房钠尿因子的影响

将卒中型自发性高血压大鼠(SHR_(sp))和正常血压对照大鼠(WKY)随机分为可乐宁、α_1受体拮抗剂育亨宾加可乐宁及对照组,进行孤束核(NTS)内微量注射。实验观察到,在SHR_(sp)中,可乐宁的降压效应及外周 ANF 释放减少的效应比 WKY 大鼠更明显。阻断α_2受体后,在 WKY 大鼠中,可乐宁的降压效应被完全阻断,而在 SHR_(sp)仅部分被阻断;两种大鼠的外周 ANF 与对照组相比无明显差异。可乐宁组两种大鼠的血浆儿茶酚胺水平明显降低,育亨宾可阻断该反应。以上结果提示,ANF 未参与 NTS 内微量注射可乐宁引起的降压效应,在 SHR_(sp),ANF 释放的减少可能为血压依赖的代偿反应;可乐宁通过α_2受体介导抑制外周儿茶酚胺的释放。     

心肌特异表达的肌小节相关激酶基因p93的克隆与鉴定

心肌收缩受到由蛋白质因子构成的信号转导通路的调控 ,但确切机制尚未完全明了。从人心脏cDNA文库中克隆到心肌特异表达的可能参与信号转导调控的新基因 ,命名为p93基因。该基因定位于 1p31.1,属于MAP KKKs家族的相近亚家族。Northern印迹及含 76种组织的点杂交显示了p93仅在心肌组织中表达 ;免疫组化表明它主要定位于成人与胎儿的心肌细胞核 ,胞液次之 ;体外激酶活性实验证明野生型p93是一个可以进行自我磷酸化的功能性激酶分子 ;以该基因C端为诱饵质粒的酵母双杂交筛选表明 ,p93主要与心肌肌钙蛋白I(cTnI)等与收缩有关的肌小节蛋白发生相互作用 ,并以免疫共沉淀实验得到了验证。推测p93可能通过激酶信号转导通路的方式参与对肌小节收缩蛋白的调节。     

CD/TK单、双自杀基因重组腺病毒的制备及初步应用

为制备表达大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶 (cytosinedeaminase ,CD)和单纯疱疹病毒 1 胸苷激酶(herpessimplexvirustype 1thymidinekinase ,TK)双自杀基因的重组腺病毒载体 ,为再狭窄基因治疗的应用奠定基础 ,首先构建了含单、双自杀基因的腺病毒穿梭载体 ,细菌内同源重组法获得重组腺病毒质粒 .脂质体介导下转染 2 93细胞进行包装并大量扩增得到Ad TK、Ad CD、Ad TK CD、Ad LacZ 4种重组腺病毒 .氯化铯 (CsCl)梯度离心法纯化后利用报告基因绿色荧光蛋白 (GFP)测定病毒滴度 ,可达 10 9pfu ml .PCR和Western印迹法对外源基因进行鉴定 ,证明单、双自杀基因均已整合入腺病毒基因组并表达 .重组腺病毒感染血管平滑肌细胞后 ,用MTT法比较了单、双自杀基因的杀伤作用 ,发现在感染复数≤ 2 0时 ,双自杀基因对细胞的抑制作用明显高于单基因 .成功地构建腺病毒双自杀基因共表达载体 ,为进一步的体内外实验奠定了基础 .