小鼠ameloblastin基因重组慢性病毒表达载体的构建及表达

目的：构建表达小鼠ameloblastin基因的慢性病毒表达载体,生产有感染及表达能力的病毒,为进一步研究ameloblastin基因在牙釉质形成中的功能奠定基础。方法：利用RT．PCR的方法从出生后1d钟状期小鼠牙胚组织totalRNA中扩增ameloblastin编码区cDNA,并克隆到pCRII-TOPO载体中,再亚克隆到pNL-IRES2-EGFP中。将病毒三质粒系统转染293T细胞,收集病毒,并鉴定病毒感染及表达能力。结果：通过酶切和PCR的方法鉴定ameloblastin基因已成功的构建入慢性病毒表达载体pNL-IRES2-EGFP中,经293T细胞生产的病毒感染人牙髓干细胞（DPSCs）,DPSCs有较强荧光发出,并可稳定表达ameloblastin基因。结论：成功的构建了慢性病毒表达载体,并获得有感染及表达能力的病毒。     

人vWF-A1多肽的融合表达及生物学活性鉴定

血管性血友病因子 (vWF)通过与血小板膜糖蛋白结合介导血小板的粘附和聚集 ,在血栓形成过程中发挥重要作用 .通过阻断血小板与vWF的结合可抑制血栓形成 .应用RT PCR方法从人脐带内皮细胞中克隆vWF A1区基因并在原核细胞内进行表达 ,经过纯化、复性 ,获得重组蛋白(rvWF A1) .用流式细胞术检测rvWF A1与转染了糖蛋白Ib(GPⅠb)的CHO K1细胞和血小板GPⅠb的结合能力 ,血小板聚集仪测定rvWF A1对瑞斯托霉素 (ristocetin)诱导的血小板聚集作用的影响 .重组表达载体pET 2 0b(+ ) vWF A1在大肠杆菌BL2 1(DE3)plus中得到有效表达 ,表达的重组蛋白量占菌体总蛋白 30 % .次氮基三乙酸镍琼脂糖 (Ni NTAagarose)柱纯化后 ,其纯度为 95 % .经复性的rvWF A1蛋白具有良好的生物学活性 ,它可与转染了GPⅠb的CHO K1细胞和血小板结合 ,阳性率分别为 96 90 %与 78 6 0 % ,且可以抑制ristocetin诱导的血小板聚集 ,其抑制效应呈剂量依赖性 .IC50 的rvWF A1浓度为 0 5 6 μmol L ,当浓度为 1 4 μmol L时抑制率最高达 84 70 % .结果表明 ,在原核细胞中表达人rvWF A1区蛋白可抑制血浆中野生型vWF与血小板的结合 ,具有抗血栓形成的潜在应用前景     

朴菇菌丝球液体培养的研究

本文报道在不同的液体培养基深层培养朴菇[Flammulina velutipes(Fr.)sing.]菌丝球的生长情况和培养液中氨基酸、糖含量以及pH值的变化,为开发液体培养朴菇菌种提供一定的参考价值。     

妊娠合并子宫肌瘤剖宫产时肌瘤剔除的指征及治疗方法

目的:研究妊娠合并子宫肌瘤剖宫产时剔除子宫肌瘤的指征和治疗方法。方法:选择2011年2月~2015年12月在我院进行诊治的妊娠合并子宫肌瘤患者80例,根据治疗方法的不同分为观察组40例与对照组40例,观察组采用剖宫产时剔除肌瘤治疗,对照组采用单纯剖宫产术,并选择40例正常剖宫产者为常规组。记录观察组的手术时间、术中出血量、手术前后血红蛋白差值、术后肛门排气时间和住院时间;不同肌瘤大小、类型和数量的术中出血量;比较三组新生儿的一般情况及产妇产后恢复情况。结果:观察组和对照组的肌瘤大小、类型和数量等一般情况相比均无明显差异(P0.05);观察组的手术时间明显长于对照组和常规组(P0.05),三组间的术中出血量、手术前后血红蛋白差值、术后肛门排气时间和住院时间相比无明显差异(P0.05);子宫肌瘤小≤5 cm的患者术中出血量明显小于5 cm的患者(P0.05),而不同肌瘤类型和数量的术中出血量无明显差异(P0.05);对照组和观察组新生儿评分≤7分、新生儿体重2500 g、胎儿宫内发育迟缓和早产儿的发生率均明显高于常规组(P0.05),对照组和观察组之间相比无明显差异(P0.05)。结论:妊娠合并子宫肌瘤患者如果肌瘤直径≤5 cm可考虑在行子宫肌瘤剔除术;而当直径5 cm时,因术中出血量较多且风险较大,剖宫产时不主张同时行肌瘤剔除术。     

股神经阻滞麻醉联合局部浸润麻醉在老年髋关节置换手术中的应用

目的:探究股神经阻滞麻醉联合伤口局部浸润麻醉对老年髋关节置换术后疼痛程度的影响。方法:选择2016年1月~2018年6月我院收治的髋关节置换术的85例患者,据患者入院的编号的奇偶随机分为两组。对照组的42例采用伤口浸润麻醉方法,观察组的43例采用股神经阻滞麻醉联合伤口浸润麻醉方法。比较两组的麻醉效果、镇痛效果、术后阿片类药物的使用情况、住院时间及下床活动时间。结果:观察组感觉阻滞时间、恢复痛觉时间均显著长于对照组(P<0.05),术后12 h的视觉模拟评分法(Visual analog scales,VAS)评分较对照组明显降低(P<0.05),但两组术后6 h和1 d的VAS评分无统计学差异(P>0.05);观察组术后1 d的阿片类药物使用剂量较对照组明显降低(P<0.05),但两组术后2 d的阿片类药物使用剂量比较无统计学差异(P>0.05),观察组住院时间及下床活动时间较对照组明显缩短(P<0.05)。结论:股神经阻滞联合伤口浸润麻醉对于进行髋关节置换术的老年患者具有较好的镇痛效果,且在手术后阿片类镇痛药物的使用剂量减少,住院时间和下床活动时间均有所改善。