LGT蛋白质组阳性肿瘤患者免疫功能的观察报告——LGT系列论文之八

目的：了解LGT（lost goodwill target）蛋白质组阳性表达患者CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋、T细胞和NK细胞的变化规律.方法：对30例LGT蛋白质组阳性表达的肿瘤患者分别采用美国BD公司生产的流式细胞检测仪及提供的相应单克隆抗体检测患者空腹血清CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋、T细胞和NK细胞并用美国赛费吉（Ciphergen）公司制造的蛋白质指纹仪及该公司提供的弱阳离子交换芯片（WCX2）按其操作方法（SELDI检测技术）配对检测肿瘤患者空腹血清中的蛋白质指纹,对有病情加重的患者均检查两次以上.以指纹图上质荷比（M/Z）为11100＋H～11900＋H之间出现一峰簇样（cluster）的指纹标志为LGT阳性诊断标准,并按蛋白质指纹LGT检测阳性次数分成二组.对二组内CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋、T细胞和NK细胞与正常参考值之间进行统计学显著性检验.结果：CD3^＋T细胞值在LGT蛋白质组持续阳性表达组是增高的,在另一组是无变化,二者之间有显著性差异,而CD8^＋T细胞在二组内同时增高,CD4^＋T细胞和NK细胞二组同时低下,无显著性差别.结论：本研究提示肿瘤晚期可能存在有酪氨酸蛋白激酶修饰的细胞内信号传导,使之病情加重,而肿瘤早期则不明显.这是一种新的看法,应加强这个方面的研究.     

化学诱变剂EMS对知母种子萌发的影响

以知母（Anemarrhena asphodeloides）种子为材料,分别采用1%、2%、4%、6%浓度的EMS处理6、8、12和24 h,在恒温培养箱内进行种子萌发实验,研究不同浓度的化学诱变剂甲基磺酸乙酯（ethyl methane sulfonate,EMS）处理对知母种子萌发的影响,筛选适宜的诱变浓度和诱变时间。结果表明：随EMS浓度的增加和处理时间的延长,知母种子发芽率呈现逐渐降低的趋势,以相对发芽率达到半致死浓度为标准,6%EMS浸种12和24 h可作为EMS诱导知母建立突变体库的适宜条件。     

Gli1与β-catenin相互作用促进二者在结肠癌细胞中的协同核输入

Wnt信号通路和Hedgehog（Hh）信号通路在胚胎和干细胞的发育中发挥重要作用.此外,这两条信号途径在结肠癌复发和浸润的过程也至关重要.然而,Wnt信号通路、Hedgehog信号通路二者之间具体的交互作用机制目前仍不清楚.本文发现,这两条途径的关键分子Gli1和β-联蛋白之间存在蛋白质相互作用.Gli1与β-联蛋白之间的分子相互作用有助于二者的核输入.同时发现,在肠癌细胞系中,Gli1与β-联蛋白协同上调表达. LiCl激活细胞Wnt信号通路使Gli1表达水平增加, RNA干扰抑制Wnt信号通路,Gli1的表达水平下降.同时,Gli1的过表达也提高了细胞内β-联蛋白的表达水平,并且用Hedgehog信号通路抑制剂GANT61处理细胞,降低Gli1的表达后细胞内β 联蛋白的表达相应下降.本研究揭示了Gli1 和 β-联蛋白的相互作用及二者协助核输入在Wnt、Hedgehog信号通路交互调节中发挥重要作用,Wnt、Hedgehog信号通路交互作用为大肠癌发生发展研究提供了细胞水平交互调控机制.     

中药消癌平、金龙胶囊联合奥宁治疗老年巨块型原发性肝细胞性肝癌的前瞻性研究

目的:探索中药消癌平、金龙胶囊联合奥宁治疗老年巨块型原发性肝细胞性肝癌的疗效和应用价值.方法:2位老年原发性肝细胞性肝癌患者,第一例采用消癌平60 ml+5%葡萄糖液250 ml,静脉滴注16天,奥宁15-18 μg/h,Civ(连续静脉泵入),16天;第二例在前一例基础上加用金龙胶囊4粒,3次/日,连续口服14天.每次治疗结束休息一周进行AFP、影像学评价和QOL评分.结果:第一例患者治疗2个周期AFP降至162.8 μg/L,肿块7.910.2 cm,增大约18%,QOL评分48分,疗效评价SD,该患者治疗两周期后,自行转其他医院行超声聚焦刀治疗后死亡.第二例患者治疗3周期后,AFP降至1107μg/L,B超示肿瘤缩小至4.514.33 cm,缩小约70%,QOL评分53分,疗效评价PR,目前患者无症状.结论:消癌平、奥宁联合奥宁治疗巨块型原发性肝细胞性肝癌是一种有效的方法.     

蛋白质组指纹作为吉非替尼治疗肺癌适应症筛选标准的初步验证报告

目的:验证M/Z:8693,4889低表达;M/Z:1762,1576高表达四组蛋白质指纹预测吉非替尼治疗非小细胞肺癌疗效的符合情况.方法:对6名准备服用吉非替尼治疗的非小细胞肺癌患者,服药前行SELDI检查,服药1个月后,按实体瘤疗效评定标准评定疗效.对已经服用吉非替尼治疗达1个月以上并有可观察肿瘤评价疗效的外院非小细胞肺癌患者9名,于疗效评价后的第二、三天进行SELDI检查.比较CR+PR组中M/Z:8693、4889低表达,M/Z:1762、1576高表达指纹的符合率.结果:按实体瘤疗效评价CP+PR组的10名患者全部符合,M/Z:8693,(漂移±50H+),M/Z:4889,(漂移±100H+)低表达,M/Z:1762,(漂移±50H+),M/Z:1576,(漂移±50H+)高表达,符合率10/10;3名PD患者全部符合,M/Z:8693,(漂移±50H+),M/Z:4889,(漂移±100H+)高表达,M/Z:1762,(漂移±50H+),M/Z:1576,(漂移±50H+)低表达,符合率3/3.其中M/Z:8693±50H+指纹为主要评价指纹.结论:非小细胞肺癌患者血清蛋白质指纹M/Z符合8693,(漂移±50H+),4889,(漂移±100H+)低表达,1762,(漂移±50H+),1576,(漂移±50H+)高表达,接受吉非替尼治疗有较高疗效.(注:M/Z=质/核)     

用SELDI技术预测吉非替尼治疗肺癌疗效的前瞻性研究报告

目的:介绍SELDL-TOF-MS技术预测吉非替尼治疗肺癌疗效观察,探索新的用药指征.方法:应用CM10弱阳离子芯片结合表面增强飞行时间质谱(SELDL-TOF-MS)技术检测9例晚期肺癌患者口服吉非替尼前血清样本的蛋白质谱,口服吉非替尼1个月后,根据实体瘤近期疗效标准分为服药有效组(CR PR)(4例)和无效组(SD PD)(5例),利用BiomarkerWizard软件比较各组间的血清蛋白质指纹图谱.结果:有效组与无效组相比有4个蛋白质峰有显著差异性,M/Z分别为4889,1576,1762和8693,与无效组相比.有效组上调的峰为2个,其M/Z为1576和1762,下调的峰为2个,其M/Z为4889和8693.结论:SELDI-TOF-MS技术可筛选出预测吉非替尼治疗疗效的相关蛋白质组指纹,此方法捕获的蛋白质组指纹,可作为一种选择用药的新指标.     

恶性肿瘤患者外周血中CTL、Ts细胞绝对数值的变化及临床意义分析

观察肿瘤患者外周血中CD8 CD28 (CTL)、CD8 CD28-(Ts)T细胞绝对数值的变化,分析其与肿瘤的相关性。方法:采用流式细胞术测定118例肿瘤患者外周血CTL、Ts细胞数,按能否手术和复发转移分成3组,即A组:手术后组;B组:肿瘤无法切除组;C组:复发转移组。并选择15例健康者作为对照,采用SPSS10．0软件进行各组间比较分析。结果:恶性肿瘤患者外周血中CTL细胞绝对数明显下降,Ts细胞显著升高,与对照组有显著差异(p＜0．05)。A组CTL细胞计数与B、C组有显著性差别,三组的CTL、Ts细胞与对照组有显著差别(p＜0．05),B、C两组之间CTL、Ts细胞均没有明显差别。结论:肿瘤患者外周血CTL细胞低表达、Ts细胞高表达,而且在肿瘤的不同发展阶段,其绝对值也存在显著差异。观察肿瘤患者外周血中CTL、Ts细胞绝对数值的变化,对了解肿瘤患者细胞免疫功能状态有一定的价值,从而为肿瘤的免疫治疗提供参考。     

高效毛细管电泳法测定甘草中甘草酸的含量

采用高效毛细管电泳法成功地分离测定了甘草中甘草酸的含量, 在pH=5.8 的50mmol/L 磷酸缓冲液, 检测波长252nm, 分离电压25KV, 进样压力20 mm 汞柱, 温度30℃的检测条件下, 标准溶液在0.0448mg/ml~0.224mg/ml 范围内与峰面积成良好的线性关系, 回归方程为:Y=4.16×10⁶x-8.94×10⁴, 相关系数r=0.9939, 具有较高的灵敏度和准确度。该法操作简便、迅速、可靠、测试费用低。     

恶性肿瘤患者病情恶化前后与持续稳定时蛋白质指纹的比较分析

目的:比较分析恶性肿瘤患者病情恶化前后与持续稳定时的蛋白质指纹.方法:选择应用CM10弱阳离子芯片结合表面增强飞行时间质谱(surface enhanced laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术检测的107例经手术治疗,且LGT指纹(指血清中出现质核比(M/Z):11000+H～12000+H的蛋白质指纹,设定为LGT阳性指纹,反之为阴性)在手术前为阴性的恶性肿瘤患者,随访1年,根据随访后LGT指纹仍为阴性组(95人)A组,和由阴性转变为阳性组(12人)B组.其中A组第1次检测结果设为A1组,第2次检测结果设为A2组;B组第1次检测结果设为B1组,第2次检测结果设为B2组.采用Protein Chip 3.2.0和Biomarker Wizard 3.1软件比较各组间有无差异指纹.结果:A1组-A2组:M/Z:2073、4116、2901、1558、4052、2048、1401、1298、1509、2888指纹上调,M/Z:3568、10050、2600、4629、9287、14822指纹下调;A1组-B1组:M/Z:8972、8460及8767指纹上调,M/Z:3192、3155、4326、4281、4381、3304、5448及2942指纹下调;A2组-B1组:M/Z:15851、15534、8460指纹上调,M/Z:3285、3304、3346、4178、3192、3266、951、5167、3930、4271、4052、4961、4259及2681指纹下调;B1组-B2组:M/Z:11648、11873、11489、11532及11405指纹上调,M/Z:8767指纹下调;A1组-B2组:M/Z:11618、11405、11648、11489、11532和11744指纹上调,无表达下调的指纹;A2组-B2组:M/Z:11489、11648、11405、11532、11318及11873指纹上调,无表达下调的指纹.结论:恶性肿瘤患者其LGT蛋白质指纹在疾病初期及持续稳定期均呈阴性时,LGT阳性表达是病情恶化的主要标识.本研究中,血清蛋白质指纹M/Z:8767上调和下调所表达的意义是不同的,尤其是在动态观察下,从有到消失及从无到出现,代表病情演变的两个不同结果,其意义仍需进一步研究证实.M/Z:8460蛋白质指纹表达上调,M/Z:3192、3304表达下调,可视为预示日后病情发生进展的蛋白质指纹.