岩舒血药浓度检测的实验研究

目的:建立中药复合制剂岩舒的血药浓度检测平台。方法:采用日本日立L-2130高效液相色谱仪对苦参碱标准品进行生理盐水和标准血清的色谱分析以及对输注岩舒患者的血清色谱分析,并在实验前制备标准曲线,完成回收率实验和精密度测定。结果:在所有色谱图上,色谱保留时间以3．61、3．59、3．69、3．63min为共同标识,且实验稳定,可信度高。在实测色谱图上色谱保留时间为3．64±0．05min为岩舒血药浓度的标准值,峰高为岩舒血药浓度的百分含量。结论:本研究将为临床测定岩舒的血药浓度和半衰期建立良好的检测平台。     

华北紫丁香叶的生药学研究

目的:为华北紫丁香叶的鉴别、开发利用提供依据。方法:采用原植物、性状、显微结构的鉴别及紫外光谱的鉴别。结果:较为系统阐明了华北紫丁香叶的生药学理论。结论:为建立华北紫丁香叶的生药学质量标准提供依据。     

恶性肿瘤患者LGT指纹阴转阳的对比分析

目的:分析恶性肿瘤危重病人预警蛋白(LGT-Lost Goodwill Target)指纹由阴性向阳性转变后是否出现有意义的差异指纹.方法:应用CM10弱阳离子芯片结合表面增强飞行时间质谱(Surface Enhanced Laser Desorption/Ionization Time of Flight MassSpectrometry,SELDI-TOF-MS)技术检测21例恶性肿瘤患者(分析组)LGT指纹由阴性向阳性变异前后的血清蛋白质指纹谱,以质/核比(M/Z):11100+H～11900+H,出现丰度>10%峰簇(cluster),视为LGT阳性,反之为阴性.另选择12例肿瘤患者各1份血清样本,间隔一周检测一次,再选择5例肿瘤患者取连续两天血清标本各1份进行检测,以此作为影响因素对照组.去除与对照组相同差异指纹后,比较LGT阳性向阴性转变后差异蛋白质组指纹有无显著性.结果:分析组中恶性肿瘤患者LGT指纹由阴性向阳性变异时,有18个蛋白质指纹差异有统计学意义(P<0.05),对照组中有差异指纹44个,其中M/Z为1005、1008的指纹与分析组相同,将之剔除后,剩余了16个有统计学意义的差异蛋白质指纹,其中上调指纹的m/z(质/核比)值分别为6626、2889、6429、8866、3452、1259、3052、3699、8531、757、1146和8765.下调指纹的m/z值分别为17650、7979、778和1006.结论:SEL-DI-TOF-MS技术检测恶性肿瘤患者血清捕获的m/z:6626、2889、6429、8866、3452、1259、3052、3699、8531、757、1146和8765蛋白质指纹呈上调趋势,m/z:17650、7979、778和1006蛋白质指纹呈下调趋势,可视为恶性肿瘤LGT指纹阴转阳的差异蛋白质.     

Aurora-A高表达对食管癌细胞侵袭和 MMP-9表达的影响

目的:建立Aurora-A高表达的稳定细胞系,并探讨Aurora-A高表达对食管癌细胞侵袭和MMP-9蛋白表达与活性的影响。方法:利用脂质体法稳定转染Aurora-A表达质粒,通过Westernblot和RT-PCR鉴定Aurora-A高表达的稳定细胞系。利用细胞体外侵袭实验观察细胞的侵袭能力,并通过Western blot、ELISA和明胶酶谱的方法观察MMP-9的蛋白表达水平和活性。结果:建立了Aurora-A高表达的稳定细胞系,且Aurora-A高表达能增加食管癌细胞的体外侵袭能力,并提高了MMP-9的蛋白表达水平和活性。结论:初步阐明了Aurora-A促进食管癌细胞侵袭的作用以及分子机制,为Aurora-A可能成为治疗食管癌的有效靶点提供了依据。     

肿瘤患者CD8+T细胞中CD28表达的研究进展

CD28与B7结合形成的共刺激信号是T细胞激活的第二信号,肿瘤患者CD8^＋T细胞上CD28分子在肿瘤免疫中发挥着重要作用。人体抗肿瘤免疫主要由CD8^＋T细胞介导,根据CD28的表达与否可将CD8^＋T细胞分为细胞毒T细胞（CD8^＋CD28^＋,CTL）和抑制性T细胞（CD8^＋C28^-,Ts）。CTL是体内杀伤肿瘤细胞的主要功能性细胞之一,当该细胞与肿瘤接触时,通过共刺激信号而被激活,发挥其对肿瘤细胞的杀伤作用;Ts在机体的免疫耐受中发挥作用。现就肿瘤患者CD8^＋T细胞上CD28的表达作一综述。     

危重病人预警蛋白质组指纹表达与无效化疗的相关性研究

目的:探索无效化疗与危重病人预警蛋白质组(LGT)指纹的相关性。方法:取昆明小鼠30只,平均体重19-22g,建立小鼠S180肉瘤动物模型,随机分为A(n=10)、B(n=5)、C(n=10)、D(n=5)四组,A组腹腔注射顺铂2.6mg/kg/d×4天,C组腹腔注射顺铂2.6mg/kg/d×8天,于用药结束后4天处死小鼠,B组和D组分别为肿瘤对照组(B组与A组处死小鼠时间相同,D组与C组处死时间相同,同时摘眼球取血进行SELDI(表面增强飞行时间质谱)技术检测,并计算瘤重。比较A组与B组、C组与D组之间肿瘤瘤重有无差异,并根据化疗后肿瘤与对照组比有无缩小分成化疗有效和无效组,比较二组之间LGT蛋白质组指纹出现率有无差异。结果:①模型鼠肿瘤瘤重与LGT蛋白质组指纹的出现率呈正相关,相关系数rs=1.00,P<0.01。A组瘤重与B组相比无统计学差异(P>0.05),C组瘤重明显高于D组,有统计学差异(P<0.05)。②各组LGT蛋白质组指纹的出现率分别为:A组:55.6% B组:50% C组:22.2% D组:80%。A组的LGT蛋白质组指纹出现率高于C组,相比有统计学差异(P<0.05)。结论:无效化疗可造成模型鼠肿瘤的增大和LGT蛋白质组指纹出现率的增高,表明肿瘤增大是造成肿瘤模型小鼠死亡的重要原因。     

p16、cyclin D1在消化道癌细胞周期调控中的关系探讨

P16和cyclinD1是参与细胞周期调控及维持细胞正常增殖的关键蛋白,通过G1/S监测点即R点（restriction point）发挥调控作用。cyclinD1与CDK4/6（细胞周期依赖性激酶）结合形成cyclinD1/CDK4/6复合物,促使CDK4/6活化,细胞越过G1/S监测点进入细胞分裂周期。P16可重复地和特异性地与cyclinD1竞争调控CDK4/6,抑制两者的激酶活性,使细胞不能快速通过G1/S转换。由此可见,两者相辅相成、相互制约,其适时适度的表达是细胞周期得以正常运转的前提。近年来,大量的研究结果显示,P16基因的缺失及cyclinD1过度表达与恶性肿瘤发生、发展、及恶化关系密切。因此,对P16和cyclinD1的深入研究将有助于胃肠道肿瘤的分期、疗效判断、预后、转移、复发和治疗。     

危重病人预警蛋白质组指纹与肿瘤患者生存关系的报告

目的:探讨危重病人预警蛋白质(lost goodwill target,LGT)多肽谱指纹的峰型和丰度对判断肿瘤患者病情发展及预后的意义.方法:对接受SELDI(Surface enhanced laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometer)技术检测的178名患者生存期与死亡时间进行调查,并根据SELDI检测所获得的指纹图中,以LGT指纹存在与否,分成无峰组、单峰组、双峰组、三峰和多峰组.采用多因素方差分析和COX风险回归模型分析的方法,比较四组中哪一种状态下死亡风险最大.结果:恶性肿瘤患者经SELDI技术检测所获取的指纹图中,如果LGT呈阴性表达,死亡风险低于单、双峰组,远低于三峰和多峰组;LGT呈三峰和多峰表达,其死亡风险远高于单、双峰组,差异有统计学意义(P<0.05),死亡率极高.结论:采用SELDI技术检测肿瘤患者的血清,LGT出现三峰和多峰表达,提示肿瘤患者病情即将恶化,该指纹标识为LGT阳性指标;单、双峰者为疑似指标;LGT指纹阴性表达,肿瘤患者近期预后良好,死亡风险极小.     

亚洲玉米螟末龄幼虫促前胸腺激素与蜕皮甾类激素滴度的变化

用放射免疫分析法(Radioimmunoassay,RIA)以12小时间隔测定了亚洲玉米螟Ostrinia tfurnacalis末龄非滞育幼虫血淋巴中蜕皮甾类激素滴度.通过前胸腺体外培养,以12小时间隔测定了前胸腺体外分泌活性的变化.发现二者的变化在相同发育阶段是一致的.在亚洲玉米螟上建立了促前胸腺激素(PTTH)体外测定法,并用此法以24小时间隔测定了末龄幼虫脑和血淋巴中PTTH滴度.发现血淋巴中PTTH滴度在末龄第5和7天各有一高峰,脑中只在第5天有一高峰.     

反相高效液相色谱法测定血浆游离氨基酸

本文报告了采用高效液相色谱法反相梯度洗脱,邻苯二甲醛和β-巯基乙醇柱前衍生化,荧光检测分血浆游离氨基酸。实验采用线性洗脱,在50分钟内可同时测定18种氨基酸,血浆样品的预处理简单,衍生化反应的时间仅需1分30秒,血浆样品的实际进样量少于1μl。本测定方法的精确度高,各个氨基酸保留时间的变异系数平均为0.89%±0.45%(SD),峰面积的变异系数平均为2.06%±1.76%(SD),各个氨基酸的浓度在15—150μmol/L的范围中,线性关系的相关系数平均为0.985±0.0305(SD)。准确性好,各个氨基酸的回收率平均为97.6%±5.1%(SD)。实验还讨论了氨基酸分离时溶液pH值、柱温、离心速度等因素对分析结果的影响。