大肠杆菌表达的重组白细胞介素-2的初步纯化

本文对大肠杆菌表达产生的重组白细胞介素-2进行了纯化研究。通过比较两种方法制备的rIL-2包含体的纯度,发现用4mol/L脲溶解可溶性细菌蛋白后可使rIL-2包含体纯度达70％;在高浓度变性剂条件下进行凝胶过滤,解决了rIL-2易聚合的问题;结合透析,利用空气氧化形成高活性氧化型rIL-2;经SephadexG-100凝胶过滤,DEAE离子交换等步骤纯化,得到了均一性rIL-2,纯度达98％,比活达4.3×10~6u/mg蛋白,得率为30.8％。     

反相高压液相色谱折叠重组人白细胞介素-2

重组人白细胞介素２（ｒｈＩＬ２）基因表达产物在大肠杆菌中以不溶性包涵体形式存在,经过菌体发酵和收集、超声破菌、包涵体抽提、稀释透析初步复性、反相高压液相色谱纯化,终产物纯度大于９９％。反相高压液相色谱不仅可以纯化ｒｈＩＬ２,且使产物的总活性提高７９～９倍,比活性提高１４～１８倍,达到１５×１０７ｕ／ｍｇ蛋白质,蛋白得率为５０％～５６％。结果表明,反相高压液相色谱具有纯化和显著提高ｒｈＩＬ２折叠效率的双重功效,为非ＳＤＳ变复性法生产ｒｈＩＬ２提供了简便有效的方法     

肾脏移植供肾保存方法概述

肾脏移植是救治慢性肾功能衰竭的最有效的方法。至1993年底,我国肾移植数已超过10000例次。长征医院肾脏移植中心于1993年12月在国内首次突破1000例次,其一年人/肾存活率达85/95％。肾脏移植工作的开展与肾脏保存技术的不断进步是密不可分的。     

反相高压液相色谱折叠重组人白细胞介素-2

重组人白细胞介素－２（ｒｈＩＬ－２）基因表达产物在大肠杆菌中以不溶性包涵体形式存在,经过菌体发酵和收集、超声破菌、包涵体抽提、稀释透析初步复性、反相高压液相色谱纯化,终产物纯度大于９９％。反相高压液相色谱不仅可以纯化ｒｈＩＬ－２,且使产物的总活性提高７．９－９倍,比活性提高１４￣１８倍,达到１．５×１０＾７ｕ／ｍｇ蛋白质,蛋白得率为５０％￣５６％。结果表明,反相高压液相色谱具有纯化和显提高ｒｈＨ     

反相高压液相色谱折叠重组人白细胞介素-2

重组人白细胞介素-2(rhIL-2)基因表达产物在大肠杆菌中以不溶性包涵体形式存在,经过菌体发酵和收集、超声破菌、包涵体抽提、稀释透析初步复性、反相高压液相色谱纯化,终产物纯度大于99％。反相高压液相色谱不仅可以纯化rhIL-2,且使产物的总活性提高7．9～9倍,比活性提高14～18倍,达到1.5×10⁷u／mg蛋白质,蛋白得率为50％～56％。结果表明．反相高压液相色谱具有纯化和显著提高rhIL-2折叠效率的双重功效,为非SDS变复性法生产rhIL-2提供了简便有效的方法。     

肾移植术后隐球菌性脑膜炎合并肺炎1例并文献复习

目的 探讨肾移植术后隐球菌性脑膜炎合并肺炎的诊断及治疗.方法 对1例肾移植术后隐球菌性脑膜炎合并肺炎患者的临床及实验室检查特点进行分析,并结合文献复习进行讨论.结果 给予患者两性霉素B脂质体联合伏立康唑诱导、伏立康唑维持治疗后头痛、咳嗽等症状消失,影像学检查示肺部病灶吸收.治疗过程中未发生急性排斥.结论 肾移植术后隐球菌性脑膜炎并发肺炎患者的临床表现缺乏特异性,脑脊液墨汁染色和隐球菌抗原乳胶凝集试验是诊断的主要手段.及时诊断和有效抗真菌治疗可改善患者的预后.治疗过程中免疫抑制药物需作相应调整.     

肾移植与人工肾——概述与方法

尿毒症是由多种慢性疾病造成的肾单位严重毁损,使机体在排泄代谢废物和调节水、电解质、酸碱平衡等方面出现紊乱的临床综合征群,是威胁生命的重要病症之一。据欧美各国报道终末期肾病的发病率是每年每百万人口中约50～100人。美国每年等待作肾脏替代救治的终末期肾病患者约有5万人,按照我国每百万人口年发病率为100人左右推算,等待救治的患者已超过10万人。在这类患者中主要是青壮年。大力推行此项救治工作意义重大。终末期肾病(ESRD)的肾脏已是病废的器官,需行肾替代治疗。用与病废器官同样的生物器官予以替代,为器官移植;用人工技术研制的装置代替器官的功能,则是人工器官。治疗ESRD患者的主要方法也就是肾移植与人工肾。     

大肠杆菌表达的重组肿瘤坏死因子的纯化

采用离子交换层析分离纯化大肠杆菌表达的重组人肿瘤坏死因子（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α,ｒｈＴＮＦ－α）,通过分步洗脱得到了含ｒｈＴＮＦ－α单一条带的色谱峰,比活达２．４×１０８Ｕ／ｍｇ,回收率为７７．２％,为ｒｈＴＮＦ－α的大规模制备及临床应用奠定了基础。