芥子气暴露的确证：家兔皮肤染毒后血红蛋白N端缬氨酸加合物的同位素稀释-NCI-GC/MS溯源性检测

素有＂毒剂之王＂之称的芥子气（HD）是目前危害最大的化学战剂之一,染毒后在体内可产生不同类型的特征性生物标志物,其对中毒诊断、溯源性分析以及毒理机制等研究有着重要的意义.本文首先采用同位素稀释-NCI-GC/MS分析方法监测和鉴定了HD体外全血染毒后产生的血红蛋白N端缬氨酸加合物（HETE-Val）;其次,研究了不同剂量HD（0.02～0.15LD50）经皮染毒家兔体内HETE-Val的时效、量效关系.结果表明,HETE-Val与家兔中毒剂量间有良好的量效关系,而时效关系表明染毒后15min内即可产生并检测到HETE-Val,一周内达到最大,随后逐渐下降,但至染毒后第103天仍可监测到该加合物.与血红蛋白N端缬氨酸加合反应的HD仅占HD染毒总量的～0.15‰,与家兔血液反应的HD约占HD染毒总量的～1%.表明HETE-Val是一种重要的生物标志物,并可应用于HD暴露的确证和化学武器核查的溯源性检测.     

PRKAA1和UNC5CL基因位点多态性与胃癌的相关性研究

目的:研究PRKAA1和UNC5CL基因位点多态性与胃癌发病的关系。方法:以我院2014年1月~2016年12月收治的90例胃癌患者为观察组,选择同期在我院进行治疗的90例胃炎患者作为对照组。提取分析患者的全血DNA样品,对其PRKAA1和UNC5CL基因位点基因分型进行检测,并进行组间比较。结果:(1)与对照组比较,观察组PRKAA1基因的rs13361707位点的CC型基因出现频率、rs10074991位点的GG基因出现频率、rs10036575位点的TT基因出现频率均显著高于对照组,rs10036575位点的CT+CC基因出现频率显著低于对照组,差异均具有统计学意义(P0.05)。(2)观察组UNC5CL基因的rs2294693、rs742494位点的各基因分型的出现频率与对照组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:胃癌患者的发病与PRKAA1基因多态性表达有一定的相关性,当rs13361707位点为CC型、rs10074991位点为GG型、rs10036575位点为TT型时,胃癌的发病率增加,当rs10036575位点为CT+CC型时,胃癌发病率降低。而胃癌患者的发病与UNC5CL基因位点多态性表达无明显相关性。     

肿节风注射液辅助治疗晚期食道癌的疗效及对患者血清VEGF、S100A4水平的影响

目的:探讨肿节风注射液辅助治疗晚期食道癌的疗效及对患者血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)、钙结合蛋白S100A4(S100A4)水平的影响。方法:选取2015年12月～2018年12月我院收治的晚期食道癌患者61例,采用随机数字表法将患者分为两组。对照组患者采用TP方案进行化疗,观察组在对照组的基础上给予肿节风注射液。比较两组患者的临床治疗效果,治疗前后的症状积分、生存质量评分和血清VEGF、S100A4水平的变化以及不良反应的发生情况。结果:治疗后,观察组总有效率和疾病控制率分别为93.55%、87.1%,均显著高于对照组(70%、60%,P0.05)。两组患者治疗后的症状积分、血清VEGF、S100A4水平均较治疗前显著下降,且观察组以上指标均显著低于对照组(P0.05)。对照组患者治疗后的生存质量评分明显下降,而观察组生存质量评分较治疗前无明显变化,但显著高于对照组(P0.05)。两组患者白细胞减少、血小板减少、贫血、恶心呕吐及肝肾功能异常等不良反应发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:肿节风注射液联合化疗可显著提高晚期食道癌患者的临床疗效,改善患者的生存质量,可能与其有效降低患者血清VEGF、S100A4水平有关。     

T2毒素的纯化及抗肝癌活性的研究

[目的]纯化T2毒素并探讨其抗肝癌活性。[方法]采用萃取法、柱层析法和高效液相色谱法从污染的玉米粒中分离T2毒素,采用MTT法、结晶紫染色法、荧光染色法考察其对两种肝癌细胞数量和形态的影响,划痕实验考察对细胞迁移的影响。[结果]纯化后,T2毒素纯度达到98%;当T2毒素浓度为8μg/mL时,对肝癌细胞的抑制率分别为(95±1.34)%(Hep G2)和(97±2.59)%(SMMC-7721),IC50分别为0.003 77μg/mL和0.003 25μg/mL,且有剂量依赖性。给药24 h后,与对照组相比,贴壁细胞减少,细胞体积缩小,肿瘤细胞迁移能力减弱。[结论]T2毒素能够成为一种潜在的抗肝癌药物。     

间伐强度对华北落叶松天然更新的影响

以山西庞泉沟自然保护区华北落叶松纯林为对象,设置5个间伐强度(5%、25%、45%、65%、85%),利用相关性分析,构建间伐强度-林下生境-天然更新的结构方程模型,分析间伐强度对华北落叶松天然更新的影响机制。结果表明：中度间伐(45%)和强度间伐(85%)林地的更新指数明显大于其他间伐强度并且差异显著。构建的结构方程模型适配度良好,间伐强度对各因子的影响依次为：土壤碱解氮(-0.564)>更新指数(0.548)>土壤容重(-0.462)>母树平均高度(-0.348)>草本植物盖度(-0.343)>土壤有机质(0.173)>枯落物未分解层厚度(-0.146)>土壤全氮(0.110),间伐强度对更新指数有正向影响,这种影响主要通过调整母树高度、加速枯落物分解、改善土壤理化性质,间接促进华北落叶松天然更新。抚育间伐能够有效改善更新苗的生存环境,在后续森林经营中从华北落叶松天然更新的角度考虑,间伐强度选取中度间伐(45%)和强度间伐(85%)更为合理。     

甘肃仓鼠的分类地位

自1928年Allen发表采自甘肃卓尼的甘肃仓鼠(Cansumys canus)以来,对其分类地位的争论就没有停止,不同学者从形态学和生态学方面研究得出了不同的结论。为了确认Allen所命名的甘肃仓鼠的分类地位,本研究利用形态性状和遗传性状,比较研究了甘肃、宁夏标本(包括模式产地标本)与华北、东北大仓鼠标本共计169只。结果显示:甘肃、宁夏地区标本身体及头骨量度与大仓鼠指名亚种、东北亚种间大多无显著性差异;地理分布连续,其间无隔离,也无地理重叠;生态特征与华北、东北的大仓鼠相似;基于线粒体DNA D-loop区序列的遗传变异分析表明,甘肃、宁夏地区种群与大仓鼠东北亚种种群关系较大仓鼠东北亚种种群与指名亚种种群关系更近;单倍型演化关系显示,指名亚种种群和东北亚种种群分别独立地由甘肃种群单倍型衍生而来,并且三个种群单倍型之间的分歧较浅,没有形成种上的分歧程度。据此,甘肃、宁夏地区“甘肃仓鼠”应为大仓鼠甘肃亚种[Cricetulus triton canus(Allen),1928]。     

玉米酒糟中醇溶蛋白的结构特征研究

目的:通过实验和特征预测相结合的方法,分析酒糟中醇溶蛋白的物理化学性质及其结构,为玉米醇溶蛋白的生物学应用奠定基础。方法:将从玉米酒糟中醇提的玉米醇溶蛋白的SDS-PAGE条带进行ESI-Q-TOMS质谱分析,从得到的氨基酸序列,用生物信息学工具预测蛋白的疏水性、二级结构、三级结构等性质。结果:目的条带为玉米醇溶蛋白z1D alpha zein,相对分子质量为24 521,等电点为8.85,为疏水蛋白,其二级结构以α螺旋为主,三级结构成纺锤状。结论:为玉米酒糟中玉米醇溶蛋白的开发利用奠定了基础。     

pET3c-FGF2K18S/S69C突变体的构建及表达条件优化

构建和表达人FGF2K18S/S69C 突变体,并筛选最佳的表达条件.对GenBank数据库FGF2序列进行分析后,发现了位于第18位和第69位的氨基酸定向突变之后,能够增加FGF2稳定性.基因合成FGF2K18S/S69C突变体,与载体pET3c连接后转化至大肠杆菌BL21中,用乳糖诱导,以蛋白质表达量为指标,考察诱导剂浓度、装液体积、诱导时机、时间和温度对表达量的影响.成功构建pET3c-FGF2K18S/S69C突变体重组质粒,经菌落PCR、双酶切法和测序法证实质粒构建正确,目的片段长度约447 bp.在BL21中成功表达,FGF2K18S/S69C最佳发酵工艺为:装液量30 mL/250 mL锥形瓶,A600为0.8,乳糖浓度0.5 g/L,37℃、180 r/min诱导4 h.Western blot分析该表达产物表明,该蛋白质可以和人FGF2抗体特异性结合.通过构建pET3c-FGF2突变体基因工程菌,并优化其表达条件,为后续研究FGF2K18S/S69C突变体提供了基础.