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通过双原核显微注射提高转基因小鼠研制效率的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立高效的转基因小鼠制备技术,为开展遗传工程动物模型研究奠定技术基础。方法通过向小鼠受精卵原核中注入不同浓度的DNA分子,筛选最适注射用DNA浓度;将K14/hCTLA4-Ig基因表达载体分子通过显微注射分别导入小鼠受精卵雌、雄原核,并设立单原核注射对照组;利用输卵管腹壶部穿刺移植法将注射后的小鼠受精卵移植于同期发情的受体母鼠;利用PCR对出生的转基因首建小鼠进行筛选。结果最适DNA分子浓度为10ng/μl;在单、双原核注射组胚胎2细胞卵裂率分别为52.3%(132/253)和45.0%(108/240),差异有显著性(P<0.05);注射胚胎移植后体内存活率分别为18.1%(24/132)和16.7%(18/108),差异无显著性;转基因首建小鼠阳性率分别为3/24和5/18,转基因阳性小鼠占总注射胚胎的比例为1.2%(3/253)和2.08%(5/240),差异有极显著性(P<0.01)。结论尽管双原核注射对胚胎的2细胞卵裂率有一定影响,但通过双原核注射可有效提高转基因小鼠的制备效率。 相似文献
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以21世纪初近10年的冬小麦(Triticum aestivum)生育期调研数据和气象站点数据为基础, 利用“多元逐步回归分析+残差插值”方法, 绘制了2000年后华北地区冬小麦生育期等值线图, 通过研究两个时期(1971-1980年和21世纪初近10年)华北地区气候资源及冬小麦生育期的变化, 探讨了气候变化对华北地区冬小麦生育期的影响。结果表明: (1)华北地区北部年均气温及≥10 ℃积温增加显著, 但降水减少, 暖干趋势明显, 中部和南部年平均气温和≥10 ℃积温也呈现增加趋势, 但降水增多, 日照下降, 出现暖湿趋势; (2)除南部江苏、安徽两省冬小麦播种期无明显变化外, 华北地区冬小麦播种期普遍推迟, 一般在7-10天; 冬小麦返青期变化较为复杂, 西部地区的冬小麦返青期推迟2-10天, 而东南部的山东、安徽及江苏地区冬小麦返青期明显提前, 一般在5-7天; 华北地区冬小麦的拔节期提前, 北部地区幅度较大, 为5-10天; 冬小麦抽穗期推迟明显, 以华北中部和北部最为明显, 为10-15天; 除华北南部胶东半岛外, 华北大部分地区冬小麦成熟期推迟, 一般在5-10天; (3)气候要素的波动是引起华北地区冬小麦生育期变化的主要原因: 日照时数与冬小麦返青期和拔节期呈显著相关, 日照时数减少, 冬小麦返青期和拔节期提前, 而受年平均气温升高的影响, 冬小麦抽穗期有所推迟, 积温的增加对冬小麦成熟期有推迟作用, 同时降水对冬小麦生长的拔节和抽穗有促进作用。 相似文献
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素有"毒剂之王"之称的芥子气(HD)是目前危害最大的化学战剂之一,染毒后在体内可产生不同类型的特征性生物标志物,其对中毒诊断、溯源性分析以及毒理机制等研究有着重要的意义.本文首先采用同位素稀释-NCI-GC/MS分析方法监测和鉴定了HD体外全血染毒后产生的血红蛋白N端缬氨酸加合物(HETE-Val);其次,研究了不同剂量HD(0.02~0.15LD50)经皮染毒家兔体内HETE-Val的时效、量效关系.结果表明,HETE-Val与家兔中毒剂量间有良好的量效关系,而时效关系表明染毒后15min内即可产生并检测到HETE-Val,一周内达到最大,随后逐渐下降,但至染毒后第103天仍可监测到该加合物.与血红蛋白N端缬氨酸加合反应的HD仅占HD染毒总量的~0.15‰,与家兔血液反应的HD约占HD染毒总量的~1%.表明HETE-Val是一种重要的生物标志物,并可应用于HD暴露的确证和化学武器核查的溯源性检测. 相似文献
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山羊发情后期三种不同超排方法的比较 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 研究在山羊发情后期三种不同超排方法的超排效果。方法 实验以 2 0只本地山羊为实验材料 ,以氯前列烯醇二次注射法进行同期发情 ,研究了于发情后期 (发情结束后第 2天 )进行 3种不同的超排方法 (对照组 :3 0 0IUFSH 6次减量法 ,F -pvp组 :3 0 0IUFSH溶于 3 0 %PVP一次注射 ,F -pmsg组 :先注射 2 0 0IUFSH ,2 4h后结合 3 3 0IUPMSG一次注射法 )的超排效果。结果 二次注射氯前列烯醇在 60h内同期率为 80 % (16 2 0 ) ,3种超排方法平均获黄体数分别为 9 75± 4 65,11 75± 8 3 4 ,11± 9 13 ;平均获可用胚数分别为 7± 2 94,8± 5 48,7 5± 5 80 ;胚胎回收率分别为 62 16% ,68 0 8% ,61 3 6%。t检验证明实验组 (F pvp组和F pmsg组 )平均获黄体和平均可用胚与对照组差异有显著性 (P <0 0 5) ,而胚胎回收率 (卡方检验 )差异无显著性 (P >0 0 5)。结论 山羊发情周期的发情后期进行超排能取得很好的卵巢反应 ,而且FSH一次注射法 (溶于 3 0 %PVP或 2 4h后结合少量PMSG)与多次减量法的超排效果一致 ,这表明 ,在山羊发情后期使用FSH一次注射的超排方法有可能作为一种简化的体内生产胚胎的方法加以进一步开发和应用 相似文献
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通过田间试验,研究了太湖地区不同轮作模式下稻季温室气体排放规律.结果表明: 水稻生长季CH4排放呈先升高后降低趋势,CH4排放主要集中在水稻生育前期,烤田后至水稻收获期间CH4排放量较低;N2O的排放主要集中在3次施肥及烤田期.稻季排放的CH4对全球增温潜势(GWP)的贡献远高于N2O,各处理所占比例为94.7%~99.6%,是温室气体减排的主要对象.不同轮作模式下,稻季CH4排放总量及其GWP存在显著差异,表现为小麦-水稻>紫云英-水稻>休闲-水稻轮作;稻季N2O排放总量及其GWP没有显著性差异.与不施肥处理相比,紫云英-水稻轮作模式下施加氮肥显著降低了CH4排放量和GWP,但不同氮肥用量下的CH4排放量和GWP没有显著性差异,而紫云英还田稻季施氮240 kg·hm-2下的水稻产量却最高.综合经济效益和环境效益,紫云英还田稻季施氮240 kg·hm-2下的增产减排综合效果更好,是值得当地推广的耕作制度. 相似文献
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基于地理和气象要素的春玉米生育期栅格化方法 总被引:1,自引:0,他引:1
本文以黄河流域春玉米生育期和气象站点气象数据为主要数据源,采用多元逐步回归法分析了各生育期和经度、纬度、海拔高度、降水、年均温、≥10℃积温和日照时数等影响因子的关系,建立逐步回归方程,对各生育期空间栅格化方法进行了探讨,结果表明:(1)生育期空间拟合插值的统计检验说明春玉米“播种期”、“抽雄期”和“收获期”三个时期模拟效果最好,“拔节期”效果精度相对较好;(2)播种期基本满足从西南到东北延后的变化趋势,而拔节期、抽雄期和收获期基本上表现了从南北向中部、中部向东西两侧延后的现象。本研究得到的生育期与地理和气象要素之间的逐步回归方程,可为气候条件变化下作物生育期栅格化模拟试验以及农业生产应该采取的适应机制研究提供一定的依据。 相似文献
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兽医生物技术国家重点实验空位于我国的东北名城——哈尔滨。它始建于1986年,是在中国农科院哈尔滨兽医研究所有关从事生物技术研究的实验室的基础上建设的。1989年,该实验室建成,通过了国家验收,成为第二批向国内外开放的国家重点实验室。生物技术是在最新生命科学及工程技术成就的基础上,通过基因重组、染色体工程、细胞融合、固定化酶、固定化细胞和发酵工程等手段来对生物系统加以调控,从而进行工业、 相似文献
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生物降解地膜应用与地膜残留污染防控 总被引:33,自引:0,他引:33
地膜是农业生产中重要的生产资料之一,过去30多年,地膜用量和农作物覆膜面积一直稳定增长,2014年地膜用量达到了144万t,覆膜面积超过1 800万hm~2,该技术对保障我国农产品安全供给作出了重大贡献。与此同时,地膜残留污染问题越来越严重,一些农田的地膜残留量超过250 kg/hm~2,在我国西北的局部区域,地膜残留已经对农田土壤、作物生长发育、农事作业等造成严重影响和危害。生物降解地膜成为替代普通PE地膜、解决地膜残留污染的一种有效措施和手段,目前生物降解地膜正处于产品研发和评价试验的关键阶段,部分生物降解地膜产品在马铃薯、花生、烟草生产上显示出良好的效果,但总体上还面临巨大挑战,主要包括需要进一步提高地膜产品质量,提高地膜产品破裂和降解可控性,改善地膜的增温保墒能力,实现满足农作物对地膜覆盖功能的要求;此外,需要降低生物降解地膜综合成本,促进生物降解地膜规模化应用。总体上,随着技术进步和农业生产环境的变化,生物降解地膜应用将具有良好的前景。 相似文献
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