结核分枝杆菌感染小鼠的脾脏和肺脏组织荷菌量与病理变化

目的分析结核急性感染小鼠脾脏和肺脏的组织荷菌量以及病理的动态变化。方法以3×105CFU结核分枝杆菌标准株H37Rv尾静脉途径感染雌性C57BL/6J小鼠,测定感染后1 d、1周、2周、3周、4周、6周和8周肺脏及脾脏组织的荷菌量,脾脏和肺脏组织经HE染色分析病理变化。结果感染动物的脾脏荷菌量在前3周逐步提高,在4～8周脾脏荷菌量维持稳定,肺脏组织在2～8周组织荷菌量逐步升高。病理分析显示动物感染3周后肺脏和脾脏出现肉芽肿,在6～8周病理损伤加重。结论小鼠经尾静脉感染高剂量结核分枝杆菌在8周前表现为急性感染状态,适用于抗结核药物的体内药效学评价。     

利用亮氨酸和赖氨酸设计新型α-螺旋抗菌肽

【目的】根据螺旋轮模型设计以亮氨酸(L)为疏水面,赖氨酸(K)为亲水面的新型α-螺旋抗菌肽LK,并对该抗菌肽的生物学活性进行检测。【方法】利用圆二色光谱分析LK的二级结构,同时,评价LK的抑菌活性、稳定性和细胞选择性。【结果】在模拟细胞膜的环境中LK呈α-螺旋型结构。LK对多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌有很强的抑菌活性,最小抑菌浓度(MIC)在2-4μmol/L之间。LK具有很强的酸碱盐稳定性。肽浓度为2-4μmol/L时,LK表现出较低的溶血活性和细胞毒性。【结论】根据螺旋轮模型结构,以疏水性的L和正电荷性的K设计的新型抗菌肽LK具有较高的细胞选择性及稳定性,具有替代抗生素的发展潜力。     

豫北盐碱地引种红麻杂交种试验初报

为了筛选适合豫北盐碱地种植的高产红麻杂交组合,本研究以H318为对照,比较了栽培在盐碱土壤上的6对红麻杂交组合F1代和F2代的11个性状,分析了各个材料各个性状的竞争优势,F1代和F2代性状的平均竞争优势、显著性、相关性以及F2代性状相对于F1代的衰退率。结果表明:因组合不同,F1代与F2代各个性状的竞争优势差异较大,F2代显著衰退,但少数组合F2代仍具有一定利用价值;F1代与F2代间皮厚、鲜皮晒干率和鲜茎出麻率3个性状上存在极显著正相关;若以收获红麻全杆为目的,则F1代以组合F3A/992、F2代以组合F3A/R7为最佳;若以收获红麻纤维为目的,则F1代以组合P3A/R1、F2代以组合P3A/992为最佳。     

β-发卡抗菌肽的全新设计及其生物学活性

通过缬氨酸和精氨酸的交替连接形成β-发卡结构的两条侧链,D-脯氨酸和甘氨酸形成β-转角单元以及侧链末端的两个半胱氨酸连接形成一个二硫键,来设计得到全新的由16残基构成的β-发卡抗菌肽VR。对设计得到的抗菌肽VR的生物学活性进行了检测,主要测定了新型β-发卡抗菌肽VR的最小杀菌浓度、对红细胞的溶血活性、杀菌动力学和盐敏感性。结果发现,VR和蜂毒素具有相似的杀菌活性,而溶血活性远低于蜂毒素,这表明VR比蜂毒素具有更高的细胞选择性。在NaCl的浓度低于100 mmol/L时,VR的杀菌活性没有受到影响;在NaCl的浓度为100 mmol/L时,VR具有50%的杀菌活性。综上可见,VR具有较优异的生物学活性,拥有成为抗生素替代物的发展潜力。     

病原诱导的小麦ERF转录因子TaERF1b的原核表达及纯化

为了得到纯化的TaERFlb活性蛋白,将TaERFlb基因含有AP2／ERF结构域的片段插入原核表达载体pGEX-4T-1的多克隆位点中,构建GST-TaERFlb融合蛋白表达载体,并转化到犬肠杆菌BL21（DE3）中。0．1mmol／L1PTG即能诱导融合蛋白表达,37℃诱导4h或30℃诱导8h,融合蛋白均以包涵体的形式表达,16℃诱导12h,融合蛋白不表达。包涵体经溶解及稀释复性后,过GST亲和层析柱,获得纯化的融合蛋白,考马斯亮蓝法测得纯化蛋白的浓度约为0．5ug／ul,凝胶阻滞实验表明包涵体复性成功．所得蛋白具有生物活性：     

蜡盘衣属1中国新记录种——肉腊盘衣(新拟)

通过对蜡盘衣属(Biatora)地衣的形态解剖学及化学研究,结合基因nrDNA ITS序列的系统发育分析,报道了采自河北省小五台山的蜡盘衣属地衣1中国新记录种——肉腊盘衣(新拟)[Biatora carneoalbida(Müll. Arg.) Coppins]。该种识别特征为地衣体壳状;子囊盘常簇生,盘面橙黄色;子囊棒状,8孢;子囊孢子无色,长纺锤形,(13.3～20.0)×(1.7～5.0)μm。该标本目前馆藏于中国科学院微生物研究所菌物标本馆地衣标本室(HMAS-L)和河北师范大学植物标本室(HBNU)。     

鱼腥草组培体系优化及耐低温突变体的筛选

为解决豫北地区没有鱼腥草栽培,缺乏耐低温能越冬材料的需求,本实验以鱼腥草茎段为外植体进行不同植物生长调节剂及其浓度的组织培养诱导侧芽发生,优化了鱼腥草侧芽组织培养体系;使用不同浓度的甲基磺酸乙酯（EMs）诱变侧芽,诱导耐低温突变体,通过测定诱变材料可溶性糖含量、过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）活性变化鉴定材料耐寒性。结果表明茎段侧芽诱导的最佳植物生长调节剂组合培养基MS＋6-BA2．0mg·L-1＋NAA0．2mg·L-1;诱变处理的最佳组合为0．4％EMS处理6h,获得8株耐低温突变体;侧芽生根的最佳浓度组合为1／2MS＋NAA0．8mg·L-1。     

小鼠对结核分枝杆菌Ag85B-Esat6-HspX融合基因的免疫反应

目的研究结核分枝杆菌Ag85B-Esat6-HspX融合基因的免疫原性。方法将40只BALB/c小鼠随机分成4组,NS组、BCG组、pcDNA-HspX组和pcDNA-Ag85B-Esat6-HspX组,每组10只。BCG组只在0周时皮内注射卡介苗1次。NS组、pcDNA-HspX组及融合基因组分别于0、2、4周肌肉注射生理盐水和重组质粒DNA,共免疫3次。在免疫的第2周,4周及最后一次免疫后2周检测体血清中的总IgG水平。同时,最后一次免疫后2周,取脾细胞检测细胞免疫反应。结果构建的融合基因重组质粒DNA免疫动物后能产生针对结核杆菌特定抗原的特异性细胞免疫和体液免疫应答,具有较强的免疫原性。结论结核分枝杆菌Ag85B-Esat6-HspX融合基因可作为DNA疫苗进行保护作用的研究。     

中国30个陆地棉主栽品种的SSR指纹图谱

利用SSR分子标记技术,对中国不同生态棉区曾经或正在种植的主要来源于岱字棉、斯字棉、福字棉、乌干达棉的30个陆地棉主栽品种进行了DNA指纹分析。从1 803对SSR引物中筛选到重复性好、多态性丰富的20对核心引物。这些引物分属棉花15条染色体,共检测到116个等位基因,平均每对引物5.8个;PIC值范围为0.384~0.900,平均为0.716;MI值范围为1.152~9.000,平均为4.374。30个品种中有4个品种具有各自的特异引物,可将其与其它26个品种区分开,其它26个品种可利用至少2对引物组合进行区分。为更方便、准确地鉴定各品种,构建了30个品种20对核心引物的十进制数字指纹代码。该研究为陆地棉的品种鉴定和纯度检测、新品种权益保护以及标准DNA指纹库构建提供了重要依据。