我国社区儿童皮肤感染金黄色葡萄球菌的耐药研究

为分析我国社区儿童皮肤感染来源的金黄色葡萄球菌流行特点及耐药现状,明确社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)中mecA基因携带情况及葡萄球菌盒式染色体SCCmec基因分型情况,并为临床治疗选择合理而有效的治疗方案提供依据,本文对全国13家儿童医院1 416例皮肤感染患儿的皮损分泌物进行细菌培养,应用琼脂稀释法检测16种抗生素对培养出的金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度,应用聚合酶链式反应对CA-MRSA进行mecA基因检测及SCCmec基因分型。从1 416例患儿皮损中培养出金黄色葡萄球菌1 043株,对16种抗生素的药敏试验结果显示,耐药率前3位依次为红霉素97.3%,青霉素96.7%,克林霉素89%,其次为四环素42.2%、氯霉素15%、庆大霉素9.8%、环丙沙星6.6%、复方新诺明4.6%、苯唑西林3.4%、头孢呋辛3.1%、利福平2.4%、头孢曲松1.7%、头孢唑啉1.6%、夫西地酸1.3%、莫匹罗星0.8%。CA-MRSA分离率为3.4%,各地区均未发现万古霉素耐药或中介耐药菌株。35株CA-MRSA均携带mecA基因,SCCmec基因分型结果为Ⅳ型14株（40%）、Ⅴ型19株（54.3%）、未定型2株（5.7%）。本研究提示,治疗我国社区儿童皮肤金黄色葡萄球菌感染性疾病,仍首选全身应用耐青霉素酶的半合成青霉素和第1、2代头孢菌素,其他可选择的有夫西地酸、复方新诺明、利福平、万古霉素,外用治疗选择莫匹罗星,具有较好的抗菌活性。我国儿童CA-MRSA中mecA携带率100%,SCCmec Ⅳ和Ⅴ型为主要类型。     

申克孢子丝菌酵母相和菌丝相cDNA消减文库的构建

目的 筛选与申克孢子丝菌酵母相与菌丝相双相转换相关的差异表达基因,为探讨其双相转换的分子的机制奠定基础.方法 应用抑制性消减杂交技术,构建高特异性的申克孢子丝菌菌丝相（mycelium,M）和酵母相（yeast,Y）的正反cDNA消减文库,并对其差异表达的基因进行生物信息学分析.结果 M＋Y文库获得751条表达序列标签,平均长度为690.98 bp,经拼接后获得101条非冗余序列.Y＋M文库获得875条表达序列标签,平均长度为575.9 bp,拼接获得249条非冗余序列.经BLASTN比对,这些差异表达基因中,某些结构基因和功能不明的细胞分子类基因可能与双相转换有关.结论 成功构建了高特异性的申克孢子丝菌菌丝相和酵母相的正反cDNA 消减文库,为进一步筛选申克孢子丝菌的双相转换基因奠定了基础.     

ET抗体对葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征的免疫保护作用

目的探讨ET抗体对葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征的免疫保护作用。方法用重组ETA和ETB建立检测血清ETA和ETB抗体的间接ELISA法,用建立的ELISA法测定商业化人高效价丙种球蛋白（IVlg）、葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征（SSSS）患儿、特应性皮炎（AD）患儿和健康儿童血清中ETA和ETB抗体的效价。用重组ETA和ETB皮下注射新生小鼠建立SSSS动物模型,在注射重组ETA和ETB的同时和3h后在小鼠腹腔内注射ETA和ETB抗体,观察小鼠发病情况和皮肤组织病理改变。结果IVlg中测出高效价的ETA和ETB抗体;SSSS患儿、AD患儿和健康儿童血清中ETB抗体效价（A450nm）分别为0．863±0．276、1．027±0．222、0．990±0．151。SSSS患儿血清中ETB抗体效价明显低于AD患儿和健康儿童,差异有统计学意义（P〈0．05）,但三者问ETA抗体的效价差异无统计学意义（P〉0．05）。注射ETA和ETB抗体的新生小鼠发病、皮肤组织病理改变和死亡率均低于仅注射重组ETA和ETB小鼠。结论ET抗体对葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征具有免疫保护作用,以ETB抗体为主,可减轻皮肤损伤,降低死亡率。