ω-3 多不饱和脂肪酸对母婴健康结局影响的研究进展

综述了国内外研究中ω-3 PUFAs补充与妊娠期间母婴健康结局的关系以及目前推荐摄入的国家的现状和推荐后所带来的健康效益，为我国妇女在妊娠期间是否需要补充剂ω-3 PUFAs以及其推荐摄入量提供科学依据。     

幽门螺杆菌感染与胃癌相关基因的筛选及预后分析

目的通过分析幽门螺杆菌感染胃黏膜组织和胃癌细胞系后的差异基因变化,并在癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库和肿瘤基因芯片(Oncomine)数据库进行验证,探究幽门螺杆菌导致胃癌发生、发展的分子机制。方法分析基因表达汇编(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库幽门螺杆菌感染相关芯片集GSE5081与GSE70394,绘制维恩图查找幽门螺杆菌感染后共同上调的差异基因。对共同上调的差异基因进行功能富集分析。通过TCGA和Oncomine数据库验证差异基因在胃癌中的表达。利用Kaplan-Meier Plotter数据库和GEPIA数据库分析差异基因表达高低与胃癌患者预后是否存在相关性。结果通过差异基因筛选和维恩分析,两个芯片集共有21个共同上调差异基因。GO分析发现共同上调差异基因主要富集在对细菌来源分子的反应、趋化因子CXCR受体结合、中性粒细胞趋化作用等相关的基因功能上;KEGG通路主要富集在癌症通路、TNF信号通路、趋化因子信号通路等。STRING以及PPI数据库分析发现21个基因中PRDM1、IL10、NRP1、BIRC3、GNG13、CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL8基因存在有网络关系,属于关键枢纽基因。通过TCGA和Oncomine数据库筛选及验证,发现在胃癌组织中NRP1、CXCL1、CXCL8基因明显上调,结果差异有统计学意义(TCGA数据库中,三者P值均小于0.05,Oncomine数据库中,NRP1:t=4.607,P0.01;CXCL1:t=5.854,P0.01;CXCL8:t=5.316,P0.01)。在Kaplan-Meier Plotter数据库(210615-at芯片:P0.01;210510-s-at芯片:P0.01;212298-at芯片:P0.01)以及GEPIA数据库(P0.01)两个数据库中,NRP1的高表达均与胃癌的预后负相关。结论不同的数据库均显示NRP1、CXCL1、CXCL8三个基因与幽门螺杆菌感染相关,同时在胃癌中高表达,并且NRP1的高表达与胃癌的不良预后相关,这些结果为进一步探究幽门螺杆菌导致胃癌发生、发展的分子机制提供了重要基础。     

地屈孕酮联合环孢素A治疗原因不明复发性流产的效果观察

目的:探讨地屈孕酮联合环孢素A治疗原因不明复发性流产的临床效果。方法:选取2015年5月～2018年6月我院诊治的原因不明复发性流产患者81例,根据患者入院先后顺序分为两组,对照组40例给予地屈孕酮进行治疗,观察组41例在对照组的基础上给予环孢素A治疗。比较两组患者的妊娠成功率和妊娠结局,两组患者孕8周和孕10周的血清绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、孕酮(P)、雌二醇(E2)水平以及两组患者孕前T、B和NK淋巴细胞水平。结果:观察组患者的妊娠成功率为87.8%,显著高于对照组(67.5%,P0.05),但两组患者妊娠成功后的早产、分娩孕周相比无统计学差异(P0.05)。观察组患者孕8周和孕10周的血清β-HCG和E2水平均显著高于对照组(P0.05),而两组血清P水平比较差异无统计学意义(P0.05)。观察组患者孕前CD4+、CD4+/CD8+和NK细胞水平均显著低于对照组,CD8+水平显著高于对照组(P0.05),但两组CD3+和B细胞水平比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:地屈孕酮联合环孢素A可显著提高原因不明复发性流产患者孕早期血清β-HCG和E2水平,抑制患者的免疫功能,提高妊娠成功率,且不影响妊娠结局。     

抗坏血酸对幽门螺杆菌相关萎缩性胃炎小鼠的干预

目的研究不同浓度抗坏血酸(ascorbic acid)溶液对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)相关萎缩性胃炎小鼠模型的作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为5组,每组10只。组1为空白对照组,余4组小鼠用幽门螺杆菌悉尼菌株(Helicobacter pylori-Sydney strain 1,H.pylori-SS1)感染2周,快速尿素酶法和免疫组织化学法检测H.pylori-SS1的定植;组3、组4和组5小鼠分别给予抗坏血酸低倍剂量(0.1 g/L)、中倍剂量(0.5 g/L)和高倍剂量(1.0 g/L)灌胃22周。灌胃结束后,处死所有小鼠取胃组织和血清,H&E染色观察组织学变化,ELISA检测血清胃泌素(gastrin)和白介素8(IL-8)水平。结果与H.pylori组相比,抗坏血酸干预组胃组织萎缩程度减轻、血清胃泌素水平升高、炎症因子水平降低(组2 vs组3:F=21.730,P=0.029;组2 vs组3:F=42.781,P=0.015;组2 vs组3:F=35.720,P=0.021),中倍剂量组较低倍剂量组有更显著的作用(组3 vs组4:F=21.730,P=0.041;组3 vs组4:F=42.781,P=0.034;组3 vs组4:F=35.720,P=0.043),但高倍剂量组与中倍剂量组差异无统计学意义(组4 vs组5:F=21.730,P=0.125;组4 vs组5:F=42.781,P=0.391;组4 vs组5:F=35.720,P=0.450)。结论抗坏血酸干预可减轻小鼠H.pylori相关萎缩性胃炎症状,高剂量抗坏血酸与中低剂量比无显著差异。     

幽门螺杆菌感染新型原代人胃上皮细胞模型的建立

目的培养三维(3D)人胃黏膜上皮类器官,转为二维(2D)原代胃黏膜细胞培养,并建成人2D原代胃上皮细胞的幽门螺杆菌感染模型。方法 (1)从正常人胃上皮组织中分离胃腺,在含有多种生长调节和凋亡抑制等混合因子的培养基中,依附于基质胶而培养成3D类器官;(2)利用免疫荧光技术鉴定胃上皮类器官的相关分子标记;(3)研究正常原代胃上皮细胞被幽门螺杆菌感染后的形态学变化,利用免疫印迹技术鉴定幽门螺杆菌感染相关蛋白的表达水平。结果成功培养出可长期传代的人胃上皮3D类器官,具有典型的人胃黏膜上皮分子标记。而且3D类器官转为2D平面培养的原代胃上皮细胞,可作为幽门螺杆菌的体外原代细胞感染模型。结论 3D胃上皮类器官,可作为2D原代胃上皮细胞的持久来源,为研究幽门螺杆菌感染人体胃上皮的分子机制带来个体化的新模型。     

熊脱氧酸治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的临床效果分析

目的:探讨熊脱氧酸治疗妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)的临床效果及其可能机制。方法:选择2013年8月到2018年2月在我院诊治的ICP患者105例作为研究对象,根据治疗方法分为对照组50例和研究组55例,对照组给予腺苷蛋氨酸治疗,研究组给予腺苷蛋氨酸联合熊脱氧酸治疗,检测和比较两组的临床总有效率,治疗前后的血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素12(IL-12)、甘胆酸(CG)和总胆汁酸(TBA)水平的变化及妊娠结局。结果:所有患者都顺利分娩,无死亡产妇与胎儿。研究组的总有效率为98.2%,显著高于对照组(88.0%),差异有统计学意义(P0.05)。两组治疗后的血清CG、TBA、IL-12及TNF-α水平均显著低于治疗前(P0.05),且研究组以上指标均明显低于对照组(P0.05)。研究组的剖宫产、早产、新生儿窒息、产后出血、羊水粪染等发生率显著低于对照组(P0.05)。结论:熊脱氧酸治疗ICP能有效提高治疗效果,改善妊娠结局,这可能与其降低血清患者TNF-α、IL-12、CG、TBA水平有关。     

幽门螺杆菌对胃癌前期阶段 胃上皮DNA同源重组修复关键蛋白的影响

目的通过检测胃癌前期阶段幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)阳性和阴性患者胃黏膜组织中DNA损伤标志物γH2AX及同源重组(homologous recombination,HR)修复关键蛋白MRE11、Rad51、CtIP表达水平,评价H.pylori感染在胃癌前期阶段对HR精确修复的影响。方法选择2017年3月至9月行胃镜及病理检测的165例H.pylori阳性和阴性患者,取胃黏膜上皮组织,石蜡包埋切片,行HE染色,根据世界卫生组织标准和更新的悉尼标准,划分病理类型。然后应用免疫组织化学染色方法检测H.pylori和DNA损伤标记蛋白及HR修复关键蛋白表达水平,并行统计学分析。结果胃黏膜上皮细胞中γH2AX的表达,在CSG、CAG和IM阶段,H.pylori阳性组表达高于阴性组(Mann-Whitney U=1116.5,P=0.001;Mann-Whitney U=185.0,P=0.018;Mann-Whitney U=214.5,P=0.041),在Dys阶段,H.pylori阳性组和阴性组差异无统计学意义(Mann-Whitney U=35.5,P=0.964);MRE11的表达,在CSG、CAG阶段,H.pylori阳性组表达高于阴性组(MannWhitney U=1117.0,P=0.001;Mann-Whitney U=201.0,P=0.002),在IM、Dys阶段,H.pylori阳性组和阴性组差异无统计学意义(Mann-Whitney U=171.0,P=0.568;Mann-Whitney U=41.5,P=0.616);Rad51的表达,在CSG、IM阶段,H.pylori阳性组表达低于阴性组(Mann-Whitney U=490.0,P=0.002;Mann-Whitney U=73.0,P=0.007),在CAG、Dys阶段,H.pylori阳性组和阴性组差异无统计学意义(Mann-Whitney U=101.0,P=0.404;Mann-Whitney U=24.0,P=0.291);CtIP的表达,在CSG、IM阶段,H.pylori阳性组表达低于阴性组(Mann-Whitney U=593.0,P=0.044;Mann-Whitney U=58.5,P=0.001),在CAG、Dys阶段,H.pylori阳性组和阴性组差异无统计学意义(Mann-Whitney U=84.0,P=0.136;Mann-Whitney U=18.5,P=0.102)。结论在胃癌前期发展阶段,H.pylori感染导致人体胃上皮细胞DNA损伤,却抑制部分HR修复通道关键蛋白表达,从而可能抑制精确的HR修复,增加细胞恶变几率。     

基于数据挖掘分析ONECUT2基因在胃癌的表达及与幽门螺杆菌感染的相关性

目的分析ONECUT2基因在胃癌中的表达及其与幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染的相关性。方法 (1)利用Oncomine数据库、TCGA数据库分析ONECUT2基因在胃癌中的表达,R软件包进行基因的共聚类微阵列数据分析。(2)利用Kaplan-Meier Plotter数据库和GEPIA数据库分析ONECUT2差异表达与胃癌患者预后的关系。(3)利用生物信息学功能注释数据平台DAVID对胃癌中与ONECUT2基因表达正相关的前200个基因进行功能富集分析。(4)利用GEO数据库中的数据分析H.pylori感染与ONECUT2表达的相关性。结果 (1)Oncomine数据库中的数据在胃癌、膀胱癌等8种肿瘤中共有14项研究显示ONECUT2基因在肿瘤组织中的高表达;其中胃癌相关的有两项(t=6.064,P0.000 1;t=4.335,P0.000 1);TCGA数据库的数据也证实胃癌中ONECUT2高表达(t=6.680,P0.001)。(2)胃癌中ONECUT2与EHF、FUT6、TNFRSF11A、RSAEF、EPCAM等20个基因有较高的共表达。(3)GO分析发现胃癌中ONECUT2富集在分子结构活性等相关的基因功能上;而KEGG富集分析发现ONECUT2富集于紧密连接功能等6个通路。(4)Kaplan-Meier Plotter数据库中207676-at芯片结果显示ONECUT2高表达组患者远期生存率下降(P0.001);GEPIA数据库中的分析结果同样显示ONECUT2高表达组患者其总体生存率(P0.05)和无病生存率(P0.01)下降。GEO数据库中GSE74577(P=0.005)、GSE70394(P=0.034)和GSE25146(P=0.036)三个数据集均显示H.pylori感染AGS和GES-1细胞系后ONECUT2表达上调。结论 ONECUT2在胃癌中高表达,且与胃癌一类致癌原H.pylori感染相关。ONECUT2高表达组患者远期生存率下降,表明其与胃癌发生发展密切相关,可能成为胃癌治疗的新靶点。     

LHPP在人胃腺癌组织中的表达及意义

目的通过检测LHPP(phospholysine phosphohistidine inorganic pyrophosphate phosphatase)在人胃腺癌组织和胃腺癌细胞系,以及幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染正常胃上皮细胞系后的表达水平,评估LHPP表达及LHPP与胃腺癌的关系。方法 (1)使用TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库和GEO(Gene Expression Omnibus)数据库中的胃腺癌基因表达数据,分析LHPP在胃腺癌组织和正常胃黏膜组织中的表达差异。(2)选取2017年3月至2018年5月行胃部分切除术或全胃切除术的41例胃腺癌患者,取胃癌组织及匹配的正常胃黏膜上皮组织,应用免疫组化检测LHPP在胃腺癌组织和正常胃黏膜组织中的表达差异。(3)取常规传代培养的第三代正常胃黏膜上皮细胞系GES-1和胃腺癌细胞系AGS,qRT-PCR检测两组LHPP基因表达差异。(4)应用H.pylori P12标准菌株以感染复数(multiplicity of infection,MOI)50感染GES-1细胞系6、12、18和24 h后,Western blot检测各个时间点LHPP和H.pylori毒力蛋白CagA表达量。结果 TCGA数据库中的LHPP表达数据表明LHPP在胃腺癌中表达下调(t=7.064,P0.0001),来自GEO数据库中GSE65801表达数据的芯片测序结果得到相同的结论(P=0.001)。免疫组化证实LHPP在低分化胃腺癌中低表达,且表达与分化程度相关(χ~2=5.559,P=0.018),而与性别(χ~2=2.304,P=0.129)、年龄(χ~2=0.001,P=0.986)、浸润深度(χ~2=1.007,P=0.316)、淋巴结转移(χ~2=0.693,P=0.405)及肿瘤分期(χ~2=0.003,P=0.953)不相关。LHPP在胃腺癌细胞系AGS中表达低于正常胃上皮细胞系GES-1(t=10.38,P=0.005)。H.pylori感染GES-1细胞后LHPP表达随着感染时间延长总体有升高趋势。结论 LHPP在胃腺癌中低表达并与腺癌分化程度相关,有望成为胃腺癌诊断治疗的新靶点。     

康艾注射液在子宫颈癌术后同步放化疗中的应用及对患者血清IGF-2、SCC、IFN-γ水平的影响

目的:分析康艾注射液用于子宫颈癌术后同步放化疗中的临床效果及对患者血清胰岛素样生长因子-2(IGF-2)、鳞状细胞癌抗原(SCC)、干扰素-γ(IFN-γ)水平的影响。方法:选择我院2014年8月～2016年8月收治的102例子宫颈癌患者,依据抽签法分为对照组与研究组,每组各51例。两组均行腹腔镜宫颈癌切除术,对照组于术后采用同步放化疗,研究组基于对照组加以康艾注射液治疗。比较两组的临床疗效,治疗前后血清IGF-2、SCC、IFN-γ水平,NK细胞、CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+以及不良反应的发生情况。结果:治疗后,研究组总有效率显著高于对照组(P0.05)。治疗后,两组血清IGF-2、SCC、IFN-γ水平、CD8~+均较治疗前显著降低,且研究组以上指标显著低于对照组;两组NK细胞、CD3~+、CD4~+均较治疗前明显上升,且研究组以上指标显著高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。研究组不良反应的发生率明显低于对照组(P0.05)。结论:康艾注射液用于子宫颈癌术后同步放化疗的临床效果确切,且能够显著降低患者血清IGF-2、SCC、IFN-γ水平并改善患者的免疫功能。