迟钝爱德华氏菌RNA提取及痕量基因组DNA去除方法探究

迟钝爱德华氏菌EIB202是一类细胞壁结构特殊的革兰氏阴性菌,高质量RNA提取相对较难。为了从转录组水平研究这类致病菌的致病机理,需要摸索有效的RNA提取及RNA样品中痕量基因组DNA去除方法。对常规RNA提取步骤进行改进,增加PBS清洗、反复冻融及较高浓度溶菌酶处理等步骤;另外,利用小体系基因组DNA去除系统,Mg2+与Mn2+协同激活DNase I去除RNA样品中基因组DNA污染。利用优化方法提取的RNA在质量及浓度(1 740 ng/μL)方面均有了显著改善,并建立了一套完全去除RNA样品中痕量基因组DNA污染的程序。     

披硷草的核型分析

披价草〔Clinelymus dahuricus(Turcz. )Nevski] 是多年生牧草,属禾本科大麦族披硷草属^[1]。披 硷草系原产我国东北地区的野生种,广泛分布 在东北、华北、西北诸省的山地、草原、草甸、林 缘、路旁,在日本、蒙古、苏联等国亦有分布^[2,3] 我国从1958年开始栽培驯化,目前已成为干旱 草原区栽培的主要牧草之一^[3]。目前关于披硷 草细胞遗传学的研究工作报道尚少,我们于 1980年对披硷草的体细胞染色休的形态进行 了观察,并分析了它的核型,现将结果报告于 下。     

山野豌豆的快速繁殖

植物名称:山野豌豆(Vicia amoena)。材料类别:2～4叶期无菌苗叶基,上、下胚轴。培养条件:基本培养基为MS。经正交试验:(1)叶基诱导愈伤组织与分化培养基为MS 6-BA1.0～2.0mg/L(单位下同) NAA0～0.2;(2)上、下胚轴诱导愈伤组织和分化培养基为MS 6-BA0.5～1.0 NAA0-0.1;(3)生根培养基均为1/MS NAA0.5。全部培养基均加蔗糖3％,琼脂粉0.5％,pH5.8,培养温度25±1℃,光照度2000     

披硷草的核型分析

披硷草[Clinelymus dahuricus(Turcz.)Nevski]是多年生牧草,属禾本科大麦族披硷草属。披硷草系原产我国东北地区的野生种,广泛分布在东北、华北、西北诸省的山地、草原、草甸、林缘、路旁,在日本、蒙古、苏联等国亦有分布。我国从1958年开始栽培驯化,目前已成为干旱草原区栽培的主要牧草之一。目前关于披硷     

硷茅的组织培养

植物名称:硷茅(Puccinellia chinamhoensic)。材料类别:两年生4～6叶期植株的茎段和叶片。培养条件:1.以MS为基本培养基。2.诱导愈伤组织培养基和分化培养基为(1)MS 2,4-D0.1mg/L(单位下同);(2)MS 2,4-D0.5。3.生根培养基为1/2MS IAA0.5。4.蔗糖3％,琼脂粉0.5％,pH5.8,培养温度25±2℃,每日光照10小时,光照度2000lx。生长与分化情况:剪取硷茅幼嫩的茎段和叶片,用2％安替福尼溶液消毒15分钟,再用无菌水漂洗3～4次,切取0.5cm左右的切段,接种在培养基(1)