| 迟钝爱德华氏菌RNA提取及痕量基因组DNA去除方法探究 |
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| 引用本文： | 王克平,叶江,张惠展.迟钝爱德华氏菌RNA提取及痕量基因组DNA去除方法探究[J].生物技术通报,2012(6):179-182. |
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| 作者姓名： | 王克平 叶江 张惠展 |
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| 作者单位： | 华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237 |
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| 基金项目： | 生物反应器工程国家重点实验室重点项目配套子课题 |
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| 摘 要： | 迟钝爱德华氏菌EIB202是一类细胞壁结构特殊的革兰氏阴性菌,高质量RNA提取相对较难。为了从转录组水平研究这类致病菌的致病机理,需要摸索有效的RNA提取及RNA样品中痕量基因组DNA去除方法。对常规RNA提取步骤进行改进,增加PBS清洗、反复冻融及较高浓度溶菌酶处理等步骤;另外,利用小体系基因组DNA去除系统,Mg2+与Mn2+协同激活DNase I去除RNA样品中基因组DNA污染。利用优化方法提取的RNA在质量及浓度(1 740 ng/μL)方面均有了显著改善,并建立了一套完全去除RNA样品中痕量基因组DNA污染的程序。
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| 关 键 词： | 迟钝爱德华氏菌 RNA 基因组DNA DNaseI RT-PCR |
RNA Isolation from Edwardsiella tarda and Removal of Contaminating Genomic DNA in RNA Samples |
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| Wang Keping
,
Ye Jiang
,
Zhang Huizhan.RNA Isolation from Edwardsiella tarda and Removal of Contaminating Genomic DNA in RNA Samples[J].Biotechnology Bulletin,2012(6):179-182. |
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| Authors: | Wang Keping Ye Jiang Zhang Huizhan |
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| Institution: | Wang Keping Ye Jiang Zhang Huizhan(Bioreactor Engineering,State Key Laboratory of East China University of Science and Technology of Biological Engineering,Shanghai 200237) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Edwardsiella tarda RNA Genomic DNA DNase I RT-PCR |
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